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1、山西医科大学 硕士学位论文 大鼠离体心肌骨骼肌中肌红蛋白降解与死亡时间的相关性研究 姓名：任文涛 申请学位级别：硕士 专业：法医学 指导教师：王英元 2011-03-15 山西医科大学硕士学位论文 I 大鼠离体心肌骨骼肌中肌红蛋白降解与死亡时间的 相关性研究 摘 要 目的：运用免疫印记（western blot）法检测大鼠死后离体心肌骨骼肌中肌红蛋白 在高温（30）和低温（10）两种环境下含量的变化，研究在不同温度下肌红蛋白降解 的规律， 探讨其降解规律与死亡时间的关系， 旨在为法医学死亡时间的推断提供科学依据。 方法：将健康 SD 大鼠 16 只，雌雄不限，体重 200g50g， ，随机平均
2、分为高温组和 低温组，每组 8 只。将 16 只大鼠头部置于封闭的橡胶手套内，并用手掌固定其四肢和躯 干，直至缺氧窒息死亡，提取大鼠的心肌和骨骼肌，放置于保湿盒后，置于人工气候箱中 （高温组温度恒定为 30， 低温组温度恒定为 10， 湿度恒定 40%） 。 分别于大鼠死后 0h、 12h、24h、36h、48h、60h、72h，应用免疫印记（western blot ）法检测各组大鼠心肌 和骨骼肌中肌红蛋白随死亡时间的变化， 并结合医学图像分析技术以及统计学方法进行结 果分析，比较大鼠离体心肌、骨骼肌肌红蛋白在高温和低温情况下降解规律之间的异同， 探讨肌红蛋白降解规律与死亡时间的关系， 并计
3、算各参数与死亡时间的相关系数， 求出回 归方程。 结果：1、高温和低温条件下，大鼠心肌、骨骼肌肌红蛋白的含量均随着死亡时间的 延长而呈下降的趋势，与死亡时间具有相关性。2、高温情况下骨骼肌肌红蛋白和心肌肌 红蛋白的降解速度比低温情况快。3、高温和低温条件下，骨骼肌肌红蛋白均比心肌肌红 蛋白降解慢。 结论：1、在 30和 10条件下，大鼠骨骼肌和心肌肌红蛋白降解情况不完全一致， 但是都呈现规律性变化趋势， 与死亡时间有一定的关系， 其变化规律可作为推断死亡时间 的指标之一，服务于法医学实践。 2、温度会影响到离体组织肌红蛋白的降解速度，在一定范围内会随着温度的升高而 加快，开展温度对推断死亡时间
4、影响的研究很有法医学意义。 3、免疫印记(Western blot)法技术操作简单且易行，适合法医学研究和实际检案工 作的需要。 关键词：法医病理学；心肌肌红蛋白；骨骼肌肌红蛋白；死亡时间 山西医科大学硕士学位论文 II A Study of the Realationship between the Postmortem Interval and the Degradation of cardiac myoglobin and skeletal myoglobin in vitro rat Abstract Objective: the content of isolated rat car
5、diac and skeletal muscle were detectde by immunoblotting (western blot) at high temperature (30 ) and low temperature (10 ) and to study the rule of the degradation of isolated rat cardiac and skeletal myoglobin ,and to discuss the relationship between the degradation of isolated rat cardiac and ske
6、letal myoglobin and the time of death , in order to provide the scientific basis for forensic early time of death. Methods: 16 healthy SD rats, weighing 200g50g, were randomly divided into high-temperature group and the hypothermia group, 8 in each group.Head of 16 rats were placed in a closed rubbe
7、r gloves, and fixed with the palm of their limbs and trunk, until the oxygen suffocation, remove the myocardium and skeletal muscle, on the humidor, placed in the artificial climate chamber, a constant temperature of the high-temperature group is 30 , the constant temperature of the hypothermia grou
8、p was 10 , humidity under constant 40%, and stored 0h, 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h after the extraction of rat tissue proteins,respectively.To research the degradation of isolated rat cardiac and skeletal myoglobin and the time of death, medical image combined with statistical analysis to anlysis t
9、he results, then,to observe the relationship between the degradation of isolated rat myohemoglobin and the time of death,.Finally, to reseach the difference between the rule of regulation of vitro rat cardiac and skeletal myoglobin in high temperature and low temperature condition. Results:1.On the
10、high temperature and the low temperature conditions, the content of myohemoglobin in rats myocardial, skeletal myoglobin were downregulation with the extension of the time of death. 2. The degradation of cardiac myoglobin, skeletal myoglobin were faster in the high-temperature group compared with th
11、at in the hypothermia group. 3.On the high temperature and the low temperature conditions, the degradation of cardiac myoglobin in rats was slower than skeletal myoglobin . Conclusions: 1.On the high temperature and the low temperature conditions, the content of myohemoglobin in rats myocardial, ske
12、letal muscle were showed regular change trend.May be here is a certein relationshipcan be inferred, it can be a index to deduce the death time . 2、temperature affects vitro regulation of myoglobin.it is important to the reaserch of the impact of temperature to hte early death time. 3、Western blot is
13、 a simple operation technique, and is suitable for forensic science research . Key words: Forensic pathology,Cardiac myoglobin；Skeletal myoglobin, Postmortem interval 学位论文独创性声明学位论文独创性声明 本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。 文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法 律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申 请的论文或成果。与我一
14、同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中 作了明确的说明并表示致谢。 本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果： 1、交回学校授予的学位证书； 2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报； 3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害， 进行公开道歉； 4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。 论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书学位论文版权使用授权书 本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留 或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版， 允许论文被查阅和借阅； 本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部
15、分内容编入有关数据库进 行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果 时，署名单位仍然为山西医科大学。 （保密论文在解密后应遵守此规定） 论文作者签名： 日期： 年 月 日 指导教师签名： 日期： 年 月 日 （本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及个人不得擅自使用） 山西医科大学硕士学位论文 1 前 言 前 言 死亡时间（time of death）或称死后间隔时间（postmortem interval，PMI）即机 体死亡至发现、检查尸体时经历的时间间隔。分为早期死亡时间和晚期死亡时间，早
16、期死 亡时间是指尸体未出现明显腐败现象的时期， 在法医学实际工作中， 有些案件通过案情调 查，能够准确推断出早期死亡时间，但是对于涉及到无名尸体以及杀人碎尸、移尸等的案 件，较为准确的推断出早期死亡时间，对案件的侦察有着举足轻重和不可替代的作用，在 很大程度上对确定案件性质、确定作案时间、划定和排除嫌疑人 1，2、缩小侦查范围、重 建案件过程以及死亡医疗纠纷的仲裁有着重要的现实意义， 并且民事纠纷中的财产继承和 保险理赔案件也需要解决死亡时间的推断，为案件审理和侦破提供科学的法医学依据。 死亡时间推断是法医学鉴定中首先要解决的重要任务之一 3，一直是法医学工作的重 点难点。长期以来，国内外的学者已采用多种技术和方法尝试对死亡时间的推断，尤其是 早期PMI的推断， 利用死后的各种尸体现象 4,5,6如:尸斑、 尸温、 尸僵的发展、 超生反应7,8,9、 蝇蛆的生长发育情况 10,11、胃肠内容物的消化程度12、酶活性变
