《大蒜素对尼古丁致牙周膜成纤维细胞氧化毒性的影响的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《大蒜素对尼古丁致牙周膜成纤维细胞氧化毒性的影响的研究（43页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中南大学 硕士学位论文 大蒜素对尼古丁致牙周膜成纤维细胞氧化毒性的影响的研究 姓名：李斌龙 申请学位级别：硕士 专业：口腔临床医学 指导教师：谢晓莉 20100501 中南人学七年制硕士学位论文 中文摘要 摘要 目的 通过比较尼古丁单独作用及尼古丁与大蒜素共同作用后牙周膜 成纤维细胞的存活率及细胞内谷胱廿肽的浓度，探讨大蒜素对尼古丁 在牙周膜成纤维细胞所引起的氧化毒性的影响，为大蒜素运用于牙周 病的治疗提供理论依据。 方法 1 通过组织块培养法对牙周膜成纤维细胞进行体外培养、传代 及鉴定。 2 通过M T T 法测定尼古丁对牙周膜成纤维细胞存活率的影响， 从而建立尼古丁对牙周膜成纤维细胞氧化毒
2、性的模型。 3 通过M T T 法测定大蒜素与尼古丁共同作用后牙周膜成纤维细 胞的存活率，评估大蒜素对尼古丁氧化毒性的影响。 4 运用谷胱甘肽试剂盒测定尼古丁单独作用及尼古丁和大蒜素 共同作用后不同时间点( 1 、4 、8 、1 2 、2 4 h ) 牙周膜成纤维细胞内谷 胱甘肽的浓度。 结果 1 成功培养牙周膜成纤维细胞并传代。 2 与对照组相比，0 8 m g m l 、1 6 m g m l 尼古丁能够显著降低牙 剧膜成纤维细胞的存活率( P O 1 m g m l 时，可降低P D L C s 的存活率，0 8 m g m l 尼古丁作用2 4 h 可对P D L C s 产生显著毒性
3、( 细胞存活率仅为对照组的7 7 ， P 0 0 5 ) ，这说明，空白组细胞在培养环境中未受到明显的氧化损伤。而 经0 8 m g m l 尼古丁处理后P D L C s 内G S H 浓度仅为空白组G S H 浓度的 5 2 2 8 1 1 ，这种变化与C h a n g Y 等的研究结果相近，进一步提示了尼古丁所 带来的氧化损伤与G S H 的消耗之问的关系。 实验组细胞内的G S H 浓度在各时间点之间也很接近( 差别小于3 P 0 0 5 ) ， 与尼古丁作用组相比，P D L C s 内的G S H 浓度提高了1 9 4 8 6 7 ；与空白组相 比，仅降低5 ，差异无统计学意义。
4、这说明：6 0 I t g m l 大蒜素几乎可以完全抑 制0 8 m g m l 尼古丁所引起的G S H 的氧化消耗，进而起到保护作用。 关于大蒜素降低细胞内G S H 氧化消耗的具体机制，国内外尚未见专题报道。 笔者分析如下：大蒜素分子中含有S = O 、C = C 键，这些键不稳定，易打开，这 导致了大蒜素自身对高温和碱的不稳定性。当遇到R O S 时，S = O 、C = C 键打开 并提供2 个自由电子，从而将2 分子R O S 结合全自身。该反应形成的产物性质 1 6 稳定，阻断了链式反应。 此外，2 4 h 内尼古丁组细胞所含G S H 浓度呈现出“先降后升再降”的趋势。 这与
5、邹朝霞等1 4 2 】在“香烟提取物对肺上皮细胞中G S H 影响的研究”中得出的结 果一致，其可能原因如下：起始阶段由于尼古丁的氧化消耗，导致胞内G S H 减 少，之后细胞自身的抗氧化调节使得G S H 增加，到2 4 h 时因细胞的部分凋亡导 致G S H 再次减少。 结合第三章所得出的“6 0 9 9 m l 大蒜素可以良好地抑制尼古丁所引起的 P D L C s 存活率的降低”这一结论，我们认为，一定浓度范围内的大蒜素可以通 过自身与氧化自由皋的结合来减少或消除氧化自由暴刈谷胱甘肽的消耗，从而对 P D L C s 进行抗氧化保护。 1 7 第三章结论 1 6 0 I r t g m
6、 l 大蒜素能够抑制尼古丁所致的牙周韧带细胞的氧 化毒性，其机制与大蒜素能减少牙周韧带细胞内的谷胱甘肽的氧 化消耗有关。 2 可将改良后的大蒜素制剂用于临床牙周病的辅助治疗。 参考文献 1 曹采芳临床牙周病学北京：北京大学医学出版社，2 0 0 6 ，3 2 T i p t o nD A ，D a b b o u sM K E f f e c t so fn i c o t i n eo np r o l i f e r a t i o na n de x t r a c e l l u l a r m a t r i xp r o d u c t i o no fh u m a ng i n
7、 g i v a lf i b r o b l a s t si nv i t r o JP e f i o d o n t o1 19 9 5 ， 6 6 ：1 0 5 6 1 0 6 4 3 A u r o r a ，E s m e r a l d aT M ，K a r i n aG S ，e ta 1 R o o ts u r f a c ec o n d i t i o n i n gw i t hn i c o t i n e o rc o t i n i n er e d u c e sv i a b i l i t ya n dd e n s i t yo ff i b r o
8、 b l a s t si nv i t r o C l i nO r a lI n v e s t 2 0 0 5 9 ：1 8 0 18 6 4 G i a n n o p o u l o uC ，R o e h r i c hN ，M o m b e l l iA E f f e c to fn i c o t i n e t r e a t e de p i t h e l i a l c e l l so nt h ep r o l i f e r a t i o na n dc o l l a g e np r o d u c t i o no fg i n g i v a lf
9、i b r o b l a s t s JC l i n P e r i o d o n t 0 1 2 0 0 1 ，2 8 ：7 6 9 - 7 7 5 5 B o y k oG A ，M e l c h e rA H ，B r u n e a eD M F o r m a t i o no fn e wp e r i o d o n t a ll i g a m e n tb y p er i o d o n t a ll i g a me n tc e l l si m p l a n t e di nv i v oa f t e rc u l t u r ei nv i t r o
10、Ap r e l i m i n a r y s t u d yo ft r a n s p l a nt e dr o o t si nt h ed o g JP e r i o d o n t a lR e s 19 81 16 ( 1 ) ：7 3 - 8 8 6 L e k i cP ，R o j aJ ，B i r e kC ，e ta 1 P h e n o t y p i eC o n l p a l i s o no fp e f i o d o n tl i g a m e n tc e i l s i nv i v oa n di nv i t r o JP e r i o
11、 d o n t a lR e s 2 0 0 1 ，3 6 ：7 1 - 7 9 7 司徒镇强，吴军正细胞培养北京：世图B ，2 0 0 7 8 冯雪，林珠，段银钟胰岛素样生长因子I I 对培养人牙周膜成纤维细胞生物学 活性的影响牙体牙髓牙周病学杂志2 0 0 0 ，1 0 ( 5 ) ：2 6 5 2 6 7 9 郝建军，汪甲，史俊南等牛肌腱胶原体在人牙髓成纤维细胞等原代培养中的 应用牙体牙髓牙周病学杂志1 9 9 4 ，6 ( 4 ) ：7 4 10 A hM k ，T o h n s o nG k ，K a l d a h lW B ，e ta 1 T h ee f f e c to
12、fs m o k i n go nt h er e s p o n s e t op e r i o d o n t a lt h e r a p y JC l i nP e r i o d o n t a l 19 9 4 21 ( 2 ) ：91 9 7 11 P a l m e rR M ，W i l s o nR F ，H a s a nA S ，e ta 1 M e c h a n i s mo fa c t i o no fe n v i r o n m e n t a l f a c t o r s - - - t o b a c c os m o k i n g JC l i
13、nP e r i o d o n t a l 2 0 0 5 3 2 ( S u p p l y 6 ) ：18 0 19 5 1 2 谢晓莉，唐瞻贵，袁涛洪佳力克( 大蒜素) 治疗1 3 腔溃疡的临床研究 临床口腔医学杂志2 0 0 42 0 ( 2 ) 1 3 谢晓莉，彭解英，方厂云，等慢性根尖周炎大蒜素治疗的对比研究现代 1 9 1 2 1 腔医学杂志2 0 0 5 ，1 9 ( 1 ) ：3 6 3 7 1 4 A r m i t a g eA ，e ta 1 A b s o r p t i o na n dm e t a b o l i s mo f n i c o t i n ef
14、 r o mc i g a r e t t e s B rM e d 1 9 7 5 ，4 ：3 1 3 - 3 1 6 15 H o f f m a n nD A d a m sJ D C a r c i n o g e n i ct o b a c c o s p e c i f i cN n i t r o s a m i n e si ns n u f f a n di nt h es a l i v ao f s n u f f d i p p e r s C a n c e rR e s 1 9 8 1 ，4 1 ：4 3 0 5 4 3 0 8 16 S c h e v e l
15、b e i n ，H ，19 7 2 N i c o t i n e E n c y c l c O c c u p H e a l t hS a f e t y2 ，9 3 3 9 3 4 s e e a l s oP P 9 4 5 ，A r m i t a g e ( 19 7 4 ) 17 G u a n ，Z Z ，Y u ，e ta 1 D u a le f f e c t so fn i c o t i n eo no x i d a t i v es t r e s sa n d n e u r o p r o t e c t i o ni nP C 12c e l l s N
16、 e u r o c h e m I n t 2 0 0 3 ，4 3 ( 3 ) ：2 4 3 - 2 4 9 18 D e n i zY i l d i z N i c o t i n e i t sm e t a b o l i s ma n da no v e r v i e wo fi t sb i o l o g i c a le f l b c t s T o x i c o n 2 0 0 4 ，4 3 ：619 - 6 3 2 19 W a l d u m ，H L ，N i l s e n ，e ta 1 L o n gt e r me f f e c t so fi n h a l e dn i c o t i n e L i f eS c i 19 9 6 ，
