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1、分类号： 密级： 单位代码：1 0 4 2 2 学 号： 茹办孑 硕士学位论文 S h a n d o n gU n i v e r s i t yM a s t e r sT h e s i s 论文题目： 作 专 者 导师 合作导师 ) i Dt 1 年厂月J 日 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明 的法律责任由本人承担。 论文作者签名：墨生窒燮 日 期： 垒以上：星 关于
2、学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：型缀导师签名：邀日 期：塑么：! 呈 山东大学硕士学位论文 论文目录 中文摘要1 A b s t r a c t 4 符号说明8 前言9 9日U 吾 参考文献l5 实验材料2 0 1 主要仪器设备2 0 2 主要试剂和溶液2 1 3 实验动物2 8 4
3、细胞系2 8 实验方法2 9 1 表达载体的构建2 9 2 大鼠海马神经元的原代培养3 2 3 脂质体转染神经元或P C I 2 细胞3 3 4 检测分泌情况3 3 5 免疫荧光细胞化学染色3 4 6 免疫细胞化学染色以及荧光拍照3 5 7 荧光照片定量分析3 5 8 统计分析3 5 实验结果3 6 1 C D N F 在神经分泌细胞中的定位与分泌情况3 6 2 C D N F 的糖基化不影响它的分泌3 6 3 C D N F 中影响它的分泌的关键区域3 7 4 C D N F 瞬时分泌运输缺陷的关键步骤的鉴定3 8 5 M 7 不能有效地分选到调节型分泌途径3 9 讨论z 1 0 参考文献4
4、 4 附图4 6 2 ， 山东大学硕士学位论文 C O N T E N T S A b s t r a c ti nC h i n e s e 1 A b s t r a c t 4 A b b r e v i a t i o n s 8 P r e f a c e 9 R e f e r e n c e 15 M a t e r i a l s ：! ( ) 1 I n s t r u m e n t ：；! I I 2 R e a g e n t 2 1 3 E x p e r i m e n t a lA n i m a l s ：2 8 4 C e l IL i n e s ：1 8
5、E m p i r i c a lP r o c e d u r e ：1 9 1 P l a s m i dc o n s t r u c t i o n s ：2 9 2 C u l t u r eo ft h ep r i m a r yr a th i p p o c a m p a ln e u r o n s 3 2 3 T r a n s f e c t i o no fN e u r o n so rP C I2c e l l s 3 3 4 T h es e c r e t i o na n a l y s i s 3 3 5 I m m u n o c y t o c h
6、e m i c a ls t a i n i n g ：j I 4 l 6 I m m u n o c y t o c h e m i c a ls t a i n i n ga n dI m a g i n g 3 5 7 I m a g ea n a l y s i s 3 5 8 S t a t i s t i c a IM e t h o d 3 5 R e s u l t s 3 6 1 L o c a l i z a t i o na n ds e c r e t i o no fC D N F 3 6 2 G l y c o s y l a t i o no fC D N Fd
7、o e sn o ta f f e c ti t ss e c r e t i o n 3 6 3 K e ys u b d o m a i n sr e g u l a t i n gt h es e c r e t i o no fC D N F 3 7 4 I d e n t i f i c a t i o no ft r a f f i c k i n gd e f i c i tf o ra b e r r a n ts e c r e t i o n 3 8 5 D e f e c to fM 7i ns o r t i n gt or e g u l a t e ds e c r
8、 e t o r yp a t h w a y 3 9 D i s c u s s i o n 4 0 R e f e F e n c e 4 4 F i g u r e s J 1 6 3 一 山东大学硕士学位论文 一一_ A c k n o w I e g e m e n t 5 4 R e s e a r c hP a p e rP u b l i s h e d 5 5 山东大学硕士学位论文 大脑多巴胺神经营养因子在神经分泌细胞中的运输和分泌 硕士研究生：孙宗鹏 专业：细胞生物学 导师：陈哲宇教授 中文摘要 一、研究背景及目的 大脑多巴胺神经营养因子( C e r e b r a lD
9、 o p a m i n eN e u r o t r o p h i cF a c t o r , C D N F ) ， 是一种新发现的进化保守的蛋白，在大鼠帕金森病动物模型中，大脑多巴胺神经营 养因子C D N F 是一种潜在的能够保护和恢复多巴胺能神经元的功能的关键治疗蛋 白。C D N F 在包括大脑皮层，海马，黑质，纹状体和中脑等多个脑区的神经元中广 泛表达。人的C D N F 可以糖基化，并从瞬时转染细胞中分泌，然而，目前C D N F 分泌的调控机制还不清楚。 作为一个新发现的神经营养因子，关于C D N F 运输和分泌的一些基本问题还没 有解决。首先，C D N F 是怎么分泌的，是通过组成型分泌途径还是调节型分泌途径? 主要通过哪条途径? 第二，C D N F 蛋白合成中发生什么类型的糖基化? N 连接的 糖基化还是O 一连接的糖基化? 糖基化是否影响C D N F 蛋白的运输和分泌? 最后， 人们已经知道人的C D N F 没有前原序列，但是在C
