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1、西南园艺第3 0 卷2 0 0 2 年增f 大田接种A M 真菌对成年结果柚树果实品质的影响来 杨晓红。罗安才。李道高1赵素珍2田再泽3 ( 1 西南农业大学园艺园林学院 重庆4 0 0 7 1 6 ；2 重庆市长寿区果品办；3 四川省安岳县农业局) 菌根技术是目前世界上日益受到重视的高新生物技术，以柑橘特别是作砧木用的枳苗为材 料的菌根研究较多，而到目前为止，还没有见到以柚为材料的菌根研究报道。近年来，重庆市和 四川省的名牌抽在栽培面积和产量方面的发展取得了可喜的成绩，在柑橘品种结构调整中起到 了重要的作用。但品质的提高仍然是困绕名柚生产发展的重要限制因子。根据姚青、李道高等 ( 1 9 9
2、 9 ) 运用菌根技术提高了日本温州蜜柑成年结果树果实品质的经验，我们运用菌根生物技术 对重庆市的长寿沙田柚和四川省安岳县的通贤柚进行了，大田成年结果树试验，希望能在运用高 新技术提高名牌柚果实品质方面起到一定的示范带动作用。 1 试验材料及设计 1 1 试验地点与供试私十种试验地点为重庆市长寿县沙田柚产区和四川省安岳县通 贤抽产区的坡地成年结果柚子园。供试树种为长寿沙田柚和安岳通贤柚的2 0 年生结果柚树。 1 2 A M 真菌接种剂a ( G i g a s p o r as p ) 和G f ( G o m ws p ) 系日本农药株式会社生产的 商品A M 真菌菌剂。分别在西南农业大学
3、果树研究室温室中进行无菌扩繁，用灭菌河沙作主要 扩繁基质，扩繁宿主为玉米。扩繁玉米生长3 个月后，按照经验公式( 刘润进和李晓林，2 0 0 0 ) ， 测得2 种接种物每克培养基质中的接种势单位数量( I P ) 分别为：I P 。= 6 3 3 ，1 P 。= 2 0 7 4 。去掉 地上部分，取其根段切碎，与各自的培养基质混匀后，即为接种势高的A M 真菌营养菌丝接种剂。 计算A M 真菌接种势单位数量的经验公式为： t P = N W K + S = N L + S 其中，N 为单位长度根段内含有的囊泡或( 和) 孢子数和根上菌丝位点数的总和；W 为根重；K 为 单位重量根系长度；L
4、= W K ；s 为单位重量或体积接种剂内孢子数量。 对于不产孢的或根内产孢的A M 真菌，则计算的经验公式为： I P = N W K = N L 1 3 成年结果树接种在夏季伏旱到来之前，于2 0 0 0 年7 月4 日，将准备好的2 种A M 真菌接种物分别在试验点对成年结果柚树生长园土壤接种。每处理设3 个小区，每小区处理3 株树。对通贤柚树接种时，在树冠滴水线周围放射状挖沟槽接种。对长寿沙田柚树接种时，在树 冠滴水线周围环沟状接种。沟深1 5 2 0c m 。单株树接种量为5 k g 自行研制的A M 真菌营养菌 丝接种剂。对照树土壤不接种。所有树常规管理。 1 4接种树菌根感染率检
5、查用于菌根感染率检查的幼根取样分3 次进行：7 月4 日 接种前，9 月中旬和1 1 月初采果时。根样用F A A 固定，P h i l l i p H a m a n 法染色制片，光学显微镜 下观察、测量。 1 5 果实品质分析2 0 0 0 年1 1 月3 日4 日，分别采收沙田柚和通贤柚果样。每处理随 机取t 2 个果实测定品质。用折光仪测定固形物，用斐林试剂滴定法测定还原糖、转化糖和总糖 含量，用酸碱中和法测定酸含量，用2 ，6 - 二氯吲哚酚酊酚滴定法测定V c 含量，并计算糖酸比和 固酸比。 7 西南园艺第3 0 卷2 0 0 2 年增甲 1 6 数据处理采用统计软件进行方差分析和
6、多重比较，重复间的变易幅度用标准误差 表示，不同字母为在P = 0 0 5 水平上差异显著。 2 试验结果 2 1 大田接种A M 真菌对成年结果柚树茵根感染率的影响 对7 、9 和11 月3 次根样菌根感染率进行检测，以确认柚树是否接种成功。柚树菌根检查结 果列成表1 。表中数据表明：自然状态下成年柚树菌根感染率在1 0 ( 长寿沙田枘) 左右或更低 ( 安岳通贤柚) ，接种A M 真菌4 个月后，二品种柚树的菌根感染率与对照相比都有显著上升，沙 田柚为( 3 8 3 8 1 1 4 ) 、( 2 7 4 7 1 5 2 ) ，通贤柚为( 9 9 5 0 1 8 ) 、( 3 0 5 1 2
7、 1 6 ) ，而对 照的菌根感染率上升慢，高的也仅为1 0 左右，表明自行扩繁研制的A M 真菌营养菌丝体菌荆 对柚树接种成功。 表1大田接种A M 真菌对成年结果柚树菌根感染辜( ) 的影响 z ：平均值标准误羔y ：邓肯氏多重比较( P = 00 5 ) 不同的柚品种，对A M 真菌的感染情况不同。沙田柚接种2 个月时，c f 、a 处理的菌根感染 率分别是( 1 6 6 9 1 3 5 ) 和( 1 3 1 6 0 6 3 ) ，表明对G f 、G f 菌株都敏感。4 个月时，a 、a 处理的菌根感染率分别是( 3 8 3 8 1 1 4 ) 和( 2 7 4 74 - 1 5 2 )
8、 ，表明对岱菌株更敏感；安 岳通贤柚果园土壤接种后，菌根感染很慢，2 个月时基本上没有感染，G f 、G f 的菌根感染率为 ( 0 3 4 0 0 3 ) 和( 0 2 2 0 0 1 ) ，但在后2 个月，菌根感染率也显著提高，a 、G f 的菌根感 染率为( 9 9 5 0 1 8 ) 和( 3 0 5 14 - 2 1 6 ) ，由此看出通贤柚对G f 菌株感染效果更好。 2 2 大田接种A M 真菌对成年结果柚树果实品质的影响 I J 月初，我们对影响果实品质的常规指标如固形物、糖含量、酸含量、糖酸比值、固酸比值 以及v c 含量作了分析( 表2 ) 。试验结果表明：土壤接种A M
9、真菌4 个月后的成年结果柚树，果 实的固形物和糖含量与对照相比略有提高或没有多大的变化，但是酸含量有下降的趋势，糖酸 比值和同酸比值比对照显著高。也就是说，菌根可使柚子果实的甜度上升，这对含酸量较高 ( 通贤柚) 和含酸量较低( 沙田柚) 的柚子来讲，无疑是改善或进一步提高果实品质的新途径。表 中数据还表明，菌根显著地提高了柚子果实的V c 含量。 表2 大田接种丛柱菌根真菌对柚果实品质的影响 通 a1 0626 1 00 1 3c57 5 00 4 9883 6 ：t O 必b1 培：t O0 P71 0 00 3b90 0 0 ( 助3 8 n 0 2b 贤 G f 1 14 24 0 O
10、0 1 7b 57 7 00 4 0a82 6 0 lb0 4 00 瞻a79 5 00 1 c1 0 9 6 0 0 1 c3 86 6 0 皿c 柚 C K1 0 02 0 5 0 ( 2 0a55 8 O0 4 3a76 3 0 5a11 3 n 0 陀b6 7 5 0 0 3 a8 8 4 n l P a t3 3 扣0 0 7a 采果时间：2 0 0 0 1 1 0 3 - 0 4 8 西南园艺第3 0 卷2 0 0 2 年增刊 3 讨论 3 1 关于大田接种A M 真菌与柑橘生产 虽然A M 真菌对柑橘生长和果实品质都有积极效应，但由于大田自然状态下情况复杂，加上 接种技术和接种剂
11、的缺乏，A M 真菌在我国甚至于世界上直接用于大田接种成年结果树提高柑 橘品质的研究报道极少。许多研究者发现在成年果园中接种菌根真菌并无显著的作用，认为可 能是土壤中复杂的微生物群落抵消了接种菌根菌的作用。本试验的接种成功和表现出的对柚子 果实品质改良趋势，为菌根技术在柑橘生产中展现出r 广阔的应用前景。 3 2 接种量和接种方法 成年结果树接种十分困难的另一个原因是必须备有足量的、侵染势高的接种剂以保证A M 真菌与根系的充分接触和侵染能力。如果接种量太小，土壤中的其它微生物群落将掩盖A M 真 菌的积极作用。 在对通贤柚接种时，我们采用了放射状槽式接种，在对沙田柚接种时，我们采用了环状沟接
12、 种法，接种量相同。试验结果显示，环状沟接种使菌剂与根系的接触面积增大，根系容易感染，接 种2 个月后，沙田柚的菌根感染率明显升高，而通贤柚基本上没有感染上，2 个月后才逐渐感染。 因此，我们认为，在接种剂足够的情况下，环状沟接种较槽式接种成功率高。 3 3 接种树种、品种及其接种菌剂 试验中，通贤柚对饼处理的菌株感染率高，容易感染；沙田柚对a 处理的菌剂感染率高迅 速感染。表明柑橘品种不同，形成高感染率的A M 真菌菌种不一样。研究筛选特定果树树种、品 种侵染活性高、碳成本低、生长促进效应好的A M 菌种( 株) 及其适宜的菌剂形式，是大田高效接 种A M 真菌成功的前提。 3 4 大田接种
13、A M 真菌存在的问题极其解决办法 应用A M 真菌于柑橘生产的目的，就是利用A M 真菌具有能帮助宿主植物吸收水分和矿质 营养的生理生态学特性使在干旱、贫瘠地区的柑橘生产以最低的投入获得最大的收益。目前，由 于A M 真菌在无宿主离体纯培养中还不能完成生活史，使得A M 真菌菌剂生产成本不仅很高，而 且容易污染。尽管大田接种A M 真菌在改善坡地橘园果实品质方面展现出诱人的前景，太高的 菌剂成本将很大程度上成为A M 真菌在柑橘生产中应用的限制因子，这为菌根科学家提出了严 峻而紧迫的研究任务。要使果树、林木迅速经济地菌根化，目前最好的办法就是改变接种时期， 即不在成年期接种，对苗圃中的幼苗接
14、种，这样不仅菌剂用量少+ 而且感染速度快，幼苗一旦感染 A M 真菌后，终身收益：生长期改善树体营养、促进移栽成活和生长；成年结果期改善树体营养， 提高作物产量和果实品质。 4 结论 自行扩繁研制的A M 真菌营养菌丝体菌剂具有很高的接种势，可以用于柑橘根系的菌根化； 在接种剂量充足的情况下，大田中使用A M 真菌营养菌丝体能直接有效地对成年结果柚树接种 上A M 真菌；接种柚树果实的糖酸比、固酸比和V c 含量升高，提高了果实品质；不同地点不同的 柚树品种，A M 真菌的菌根感染率不一样；安岳通贤柚对球囊霉属( G l o m u ss p ) 敏感；长寿沙田柚 对球囊霉属和巨孢囊霉属( G i g a z p o r as p ) 敏感，但对巨孢囊霉属的菌根感染率更高。 + 重庆市科委“柑橘节水栽培及肥水一体化技术研究”项目资助。 西南农业大学博士启动基金“经济植物V A 菌根茵扩繁研究”项目资助。 9
