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1、实验三 食品中粗脂肪含量的测定(索氏抽提法)一、目的与要求1、 学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法.2、 掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素.二、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质,在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取,提取样品中的脂肪后,蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。三、仪器与试剂1、 仪器(1)、索氏提取器 如图3-3所示(2)、电热恒温鼓风干燥箱(3)、干燥器 (4)、恒温水浴箱2、试剂(1)无水乙醚(不含过氧化物)或石油醚(沸程30-60C)(2)滤纸筒四、测定步骤1、样品处理(1) 固体样品: 准确称取均匀样品2-5g(精确至0.01mg),装入滤纸筒内。
2、(2) 液体或半固体: 准确称取均匀样品5-10g(精确至0.01mg),置于蒸发皿中,加入海砂约20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然后在95-105C下干燥。研细后全部转入滤纸筒内,用沾有乙醚的脱脂棉擦净所用器皿,并将棉花也放入滤纸筒内。2、 索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103C2C的烘箱内干燥至恒重(前后两次称量差不超过2mg)。3、 样品测定(1) 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内,连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶,由抽提器冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处,通入冷凝水,将底瓶浸没在水浴中加热,用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。(2)
3、抽提温度的控制:水浴温度应控制在使提取液在每6-8min回流一次为宜。(3) 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定,一般样品提取6-12h,坚果样品提取约16h。提取结束时,用毛玻璃板接取一滴提取液,如无油斑则表明提取完毕。(4) 提取完毕。取下脂肪烧瓶,回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下12mL时,在水浴上赶尽残留的溶剂,于95105C下干燥2h后,置于干燥器中冷却至室温,称量。继续干燥30min后冷却称量,反复干燥至恒重(前后两次称量差不超过2mg)。五、结果计算1.数据记录表样品的质量m/g脂肪烧瓶的质量m0/g脂肪和脂肪烧瓶的质量m1/g第一次第二次第三次恒重值 1、 计
4、算公式X = 100式中:X-样品中粗脂肪的质量分数,%; m-样品的质量,g; m0 -脂肪烧瓶的质量,g;m1 -脂肪和脂肪烧瓶的质量,g.六、注意事项1、 抽提剂乙醚是易燃,易爆物质,应注意通风并且不能有火源。2、 样品滤纸色的高度不能超过虹吸管,否则上部脂肪不能提尽而造成误差。3、 样品和醚浸出物在烘箱中干燥时,时间不能过长,以防止极不饱和的脂肪酸受热氧化而增加质量。4、 脂肪烧瓶在烘箱中干燥时,瓶口侧放,以利空气流通。而且先不要关上烘箱门,与90C以下鼓风干燥1020min,驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧,升至所需温度。5、 乙醚若放置时间过长,会产生过氧化物。过氧化物不稳定,当蒸馏或干燥时会发生爆炸,故使用前应严格检查,并除去过氧化物。(1) 检查方法:取5mL乙醚于试管中,加KI(100g/L)溶液1mL,充分振摇1min。静置分层。若有过氧化物则放出游离碘,水层是黄色(或加4滴5 g/L淀粉指示剂显蓝色),则该乙醚需处理后使用。(2) 去除过氧化物的方法:将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝,收集重蒸馏乙醚。6、 反复加热可能会因脂类氧化而增重,质量增加时,以增重前的质量为恒重。思考题:1、 简述索氏抽提器的提取原理及应用范围?2、 潮湿的样品可否采用乙醚直接提取?为什么?3、 使用乙醚作脂肪提取溶剂时,应注意的事项有哪些?为什么?