《原位产生共反应试剂及纳米材料构建的高灵敏电化学发光免疫传感器的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《原位产生共反应试剂及纳米材料构建的高灵敏电化学发光免疫传感器的研究（41页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、学位论文题目： 本人提交的 究成果。论文c 标i 。 学位论文作者： 毕欢 签字日期： 2 0 1 】- 午，月6 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完今了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有卡义保留并向国家自关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 汁论文被禽测和科f 阅。水人授权西南大学研究生部可以将学位论文的 个嗣5 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 拙等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密， 口保密期限至年月止) 。 学位论文作者签名：牟欢 签字日期： 2 0 1 ) - 年午同6 日 导师签名：螈
2、稚劳 签字日期： 山f 2 年牛月芗秒日 j 摘 A B S 第一 1 3 纳米材料5 1 4 电致化学发光免疫传感器的发展前景5 1 5 本文研究思路6 第二章基于过硫酸根的新型电致化学发光免疫传感器的研究7 2 1 引言7 2 2 实验部分8 2 2 1 试剂8 2 2 2 仪器8 2 2 3 传感器的制备8 2 3 结果与讨论9 2 3 1S 2 0 8 厶的反应机理9 2 3 2 修饰电极的E C L 和A F M 表征1 0 2 3 3 实验条件优化。1 1 2 3 3 1L C y s 电聚合时间的优化。1 1 2 3 3 2 抗原孵育时间的优化1 2 2 3 4E C L 免疫传
3、感器的性能。1 2 2 3 4 1E C L 免疫传感器的E C L 信号响应特性。1 2 2 3 4 2E C L 免疫传感器的选择性l3 2 3 4 3E C L 免疫传感器的重现性1 3 2 3 4 4 实际样品的检测1 3 2 4 结论l3 第三章 基于原位产生过硫酸根共反应试剂的电致化学发光免疫传感器的研究l5 3 1 弓I 言1 5 3 2 实验部分15 3 2 1 仪器。15 3 2 2 试剂。16 f l L l ltl ll l ll Y 2 0 8 3 2 3 功能化碳纳米管( F C N T s ) 的制备 3 2 4F C N T s P d N P s 的常0 备。
4、3 2 5 二抗( F C N T s P d N P s a n t i A F P G O D & H R P ) 的制备 3 2 5E C L 免疫传感器的制备 3 3 结果与讨论 3 3 1F C N T S P d N P s 纳米材料的T E M 表征 3 3 2 电极修饰过程的E C L 信号表征1 7 3 3 3 催化效果分析l8 3 3 4E C L 免疫传感器对A F P 抗原的检测。l9 3 3 5E C L 免疫传感器的选择性、重现性以及稳定性2 0 3 3 5 实际样品的检测。2 0 3 4 结论2 1 第四章基于原位产生鲁米诺共反应试剂的电致化学发光免疫传感器的研究
5、。2 2 4 1 引言2 2 4 2 实验部分。2 3 4 2 1 仪器2 3 4 2 2 试剂。2 3 4 2 3 功能化碳纳米管( F C N T S ) 的制备2 3 4 2 4F C N T s P d N P s 的制备。2 3 4 2 5 二抗( F C N T s P d N P s a n t i - A F P - G O D ) 的制备。2 3 4 2 6E C L 免疫传感器的修饰过程和检测机理2 4 4 3 结果与讨论。2 4 4 3 1F C N T S P d N P s 纳米材料的T E M 表征2 4 4 3 2 修饰电极的E C L 和A F M 表征。2 5
6、 4 3 - 3 多重催化剂的催化机理。2 5 4 3 4E C L 免疫传感器的性能。2 6 4 3 4 2E C L 免疫传感器的选择性2 7 4 3 4 3E C L 免疫传感器的重现性2 7 4 3 4 4E C L 免疫传感器的初步应用。2 7 4 4 结论2 7 参考文献2 8 作者部分相关论文题录3 3 j l | 【谢3 4 1 J 墨 I 两南人学硕十学何论文 摘要 原位产生共反应试剂及纳米材料构建的高灵 敏电化学发光免疫传感器的研究 无机化学专业硕士研究生牛欢 指导教师柴雅琴教授 摘要 电致化学发光免疫传感器是将免疫传感器与电致化学发光( E C L ) 技术结合而发展起来
7、 的具有高选择性、高灵敏度、低背景等优点的生物传感器。为达到临床诊断治疗对痕量蛋白 质定量测定的要求，免疫分析信号增强技术一直都是免疫分析领域研究的一个重要方向，在 电极表面原位产生发光试剂的共反应试剂为免疫分析的研究与发展提供了新的思路。因此， 将酶反应引入E C L 反应中原位产生共反应试剂结合纳米材料特有的优点对发展高灵敏的免 疫传感器起到重要的理论意义和实际的应用价值。 本论文主要从以下几个方面开展研究工作： 1 基于L 半胱氨酸膜增强过硫酸根的电致化学发光构建电致化学发光免疫传感器 该工作首次将过硫酸根溶解氧这一发光体系用于免疫分析。首先，L 半胱氨酸 ( L C y s ) 沉积于
8、金电极的表面，促进电子传递，从而增强过硫酸根发光体系的光信号。 然后，纳米金通过L C y s 表面的氨基吸附于电极表面，增强了电极表面对抗体的吸附能力， 同时促进电子传递，进一步放大E C L 信号。接着，纳米金与抗体的氨基形成共价键，将 抗体修饰于电极表面。最后，牛血清白蛋白( B S A ) 用于封闭非特异性位点，防止非特异 性吸附。该E C L 免疫传感器利用L C y s 和纳米金共同放大免疫反应信号，提高了免疫传 感器的灵敏度。在最优的实验条件下检测甲胎蛋白。其线性范围为0 0 1 1 0 0n g m L ，检测 限为3 3p g m L 。该传感器制备简单，具有良好的选择性和重
9、现性。 2 基于原位产生过硫酸根的共反应试剂用于构建超灵敏的电致化学发光免疫传感器 溶解氧作为过硫酸根共反应试剂存在标记困难，检测底液中浓度低的缺点。利用酶的催 化反应，在电极表面原位产生溶解氧，以解决上述缺点。首先利用硼氢化钠在功能化碳纳米 管( F C N T S ) 表面还原氯铂酸。制备F C N T s P d N P s 纳米复合物，该纳米复合物用于吸附二抗 ( a i t i A F P ) 。葡糖糖氧化酶( G O D ) 和辣根过氧化物酶( H F u P ) 用于封闭纳米复合物的非特 异性位点，最终制备了F C N T s - P d N P s a n t i - A F
10、P G O D - H P R 生物偶合物。通过夹心法将制 备的生物偶合物吸附于电极表面，发光试剂过硫酸根存在于检测底液中同时检测底液中加 l 两南人学硕十学何论文摘要 入适量的葡萄糖。G O D 首先催化葡萄糖产生H 2 0 2 。接着H 2 0 2 被H P R 催化在电极表面原位 产生0 2 。P d N P s 作为催化剂，催化过硫酸根与氧气的电化学发光反应，进一步催化放大光信 号，提高检测灵敏度。在最优条件下检测甲胎蛋白，其线性范围为0 0 1p g m L 1 0 0n g m L 。 同时该传感器具有较好的重现性和选择性，有望应用于临床分析诊断。 3 基于原位产生鲁米诺的共反应试剂用于构建超灵敏的电致化学发光免疫传感器 鲁米诺- H 2 0 2 发光体系被广泛应用于免疫分析，但H 2 0 2 作为鲁米诺的共反应试剂存在标 记困难和不稳定的问题。该工作将酶反应引入E C L 反应中，原位产生H 2 0 2 ，成功解决上述 问题。首先利用硼氢化钠在功能化碳纳米管( F C N T s ) 表面还原氯铂酸，制备F C N T s P d N P s 纳米复合物。该纳米复合物用于吸附二抗( a n t i A F P ) 。葡萄糖氧化酶( G o D ) 用于封闭非特 异性位点。在含有适量葡萄糖的检测底液中，葡萄糖在
