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1、老年学杂志 19 9 4 年第 1 魂卷 第 1 期 构祀和构祀多糖与抗衰延寿 戴寿芝文润玲 李 为马 杜传馨 , 韩梅曾德福网 (宁夏医学院免疫研究室 , 银川 蔚装秀英赵晓航黎雪 如 捷王慕娣杨志伟高乐 7 500 04) 摘 要对喂饲和服用拘祀及其多糖的实验动物( , J 、鼠和果蝇) 和老年人测定了平均寿命 、 最高寿命和能 反映免疫学 、 生理生化学和遗传学机能状态的指标 1, 项 。 结果表明 , 构祀和构祀多糖能显著地延长果蝇平均 寿 命 , 提高或显著提高和改善老年人上述诸领域中的绝大部分指 标(溶菌酶活力 , 坛G含量 , T细胞转化率 , I FN 和I L一2含量 , T
2、 3 含量 ,cA MP和 。G MP含量 , s o D和L PO含量) , 使这些指标向年轻化方向逆转 : 对实验 动物的最离寿命无影响 。 说明单味拘祀或拘祀多糖具有延缓衰老和延长动物平均寿命 的作用 . 关键词 构祀构祀多塘抗衰延寿 宁夏拘祀(勿 认m b a rb a r u 拼 , L )的果 实一一拘 祀子是名贵中药 , 具有滋肝补肾 、 益精明目和强壮机 体的作用 , ,” 。 含构祀的抗衰老方剂确有抗衰延寿之 效 , 但单味构祀和构祀 多糖的抗衰延寿实验未见报 道 。 本 研究用宁夏产 构祀子和构祀提取物构祀 多糖 , 以现代技术对 老年志愿者和实验动物一一小 白鼠及果蝇进行
3、了多学科多指标的实验研究 。 1 材料和方法 1 . 1 材料 老年志愿者 : 来 自宁夏回旅 自治认干部休养所 、 社会福利院 、 敬老院和老银于一学的至明显疾病的叨 岁以 矛老旅人 . 他划不翔 姚性毛明刊 小 以和野生型 黑腹果蝇 : 分别来自生州主冲制品所和北京厂范大 学遗传室 。 拘祀士来自寸烤翻%花台园林场 。 我气多掀 来自宁夏中药研究所 。 LZM 、 坛免疫板和标准参考 白 . 清 、, H 一T d R 和放 免 药盒 ( T 3, T , c AMP , 。: _, 河尸)分别来 白中科院生化厂北京生物 制品所和 北 宗原子能所 。 f 私 E Z 议免药盒来自 _i :
4、 海内分泌研 究所 。 Pl 一执、 soD标准品和LPO测定药盒分别来自 广州医药工业研究所 、 长沙生 叱厂 和门本和 光纯药 工业 株式会社 。 TdR和尺尸M王更64。分别为Sigm 。 和 Gi b c 。 产品 。 WI SH细胞株和V S V病毒采自第二军 医大学微生物室 。 。 和 y千扰素标准品分别来自北京 药品生物制品检定所和 顶防医学科学院病毒研 究 国家自然科学基金资助项目 1 宁夏医学院微生物学教研室 2 宁夏医学院生物化学研究室 所 。 CT L L细胞株来 自土海医科大学免疫室 。 冷冻离 心机为玫c kma n TJ一6R型 。 多头 细 胞收集器为 1)YQ一
5、01型 。 C(、 : 孵箱为日本Hi rasawa 厂产 品 。 丫 免疫计数器(FJZoo3/50)和p液闪仪(FJ一2202双 道液体闪烁计 数器、为核工业部西安 26 2 厂产品 。 生 化分析仪为珍c k olan42 型 。 紫外线强度计为星月牌 UVR一254型 。 1 2 方法 1 . 2 . 1 测定指标 里 . 2 : l 1 免疫据标 血清溶菌酶 (LZM)活力 , 血 清免袋球蛋白 (IgG 、 坛A 、 坛M)含 量 , 淋巴细胞转 化 能力 . 于抗 素 (下N) 和白绷胞介素 2(比一2 ) 诱 生 全能少J 。 l 2 12 生理生先指 标血清甲状 腺激素 (T
6、 。, T ;: 含里 , 监清翠删 厂T、 和雌二醉(E : )含量 、 血 浆 c AMp和代二MP含 蟹 全血超氧 化 物歧化酶 临OD)活性 , _血清 过悦叱脂质( L PO) 含量 , 血清 胆固酵和甘油三酷含量 。 1 . 2 . 1 . 3 遗传学指标姊妹染色单体交换( SCE ) 频率和 D NA 修复能力 。 12 1 .4 寿命指 际 实脸动物 的平均 寿命和最高 寿命 。 1 . 2 . 2 测定方法 L Z 各 l 免疫 、 生理生化和遗传学指标的实脸方法 实验第一天空腹静脉未血 , 第二天 起服用拘祀 子 , 每天 5 0 9 , 分三次咀嚼吞 咽下胃 , 连服l
7、( )天 , 总 量为 50 0 9 。第 1 1天再 次采血 , 测定上述各项指标 , 比 较服药前后的差异 。 各免疫 指标的测定方法分别按 临床免疫技术 、 临床免疫学检验和干扰素学等教科 34 书进行 . 生理生化指标的测定方法 , 除抗血清稀释度 随测定时间的不同而作适当的修改外 , 其余均按各 放免 药盒所附说明书进行 。 L Po 含量按八木荧光法 测定 。SO D 活性用邻苯三酚自氧化改 良法印测定 。 血 清胆 固醇和甘油三酩含量按玫c k ma n 4 2型生化分析 仪所附说 明书进行测定 。 D NA 修复功能按 李质怀 法闭进行 。 SCE 频率按贺维顺法即进行 。 I
8、 L一2活性 用C T L L HT dR 掺入法进行测定 。 L 2 .2 寿命实验方法 1 . 2 . 2 . 1 小鼠实验饲料 测得小鼠每日食量后 , 按 中国药典规定成人拘祀服量 ( 5159)的 1 0 倍 , 即 每 1 0 0 9基础饲料中加入 1 .49 构祀子为实验饲 料 。 将 20 0 只2月龄雌性 小鼠按体重搭配分为1 8笼 , 其 中 6 笼以基础饲料喂养到 1 2 月龄开始喂饲实验饲 料为第一组 , 并开始记录死亡小鼠的日龄 。 另6笼从 1 8月龄开始喂饲实验饲料为第 2组 , 并开始记录死 亡小鼠的日龄 . 其余 6 笼一直喂饲基础饲料为对照 组 , 并从 12
9、月龄起 统计死亡小鼠的日龄作第一组的 对照值 , 从1 8月龄起统计死亡小鼠的日龄作第二组 的对照值 。 小鼠全部死亡后计算出平均寿命和最高 寿命 。 1 .2 .2 .2 果蝇实验每 100 9 基础培养基中分别加 人拘祀 子 1 49 、 0 . 7 9 、 o 359 和 拘祀多糖 0 0149 、 0 00 79 、 o 00359 , 得 6 组实验培养基 。 收集生活在 基础培养基上的雌雄混养的1 0 日龄蝇 , 随机分装入 各实验培养基瓶和对照瓶中 , 每瓶约8 0 只 , 让雌蝇 产卵1 0 小时 , 取出果蝇后将瓶放 入暗温箱2 5士 。 . 5中孵化 , 每组设 6 个重复
10、瓶 , 每日三次( 8 , 1 6 , 2 2时)计蛹和成虫数 。 用作寿命实验的果蝇是在上述 实验培养 基和基础培 养基上1 0小时内羽化出的成 虫 , 在不麻醉的条件下 , 不分性别移入相应的实验瓶 和对照瓶中 , 每瓶约5 0只 , 各组设 6 个重复瓶 , 每 天 8 时 、 2 0时统计死亡的果蝇数并称重 。 每 4天将果 蝇移入相应的新饲料瓶中 。 果蝇全部死亡后算出平 均寿命和最高寿命 。 2 结 果 2 . 1 服用构祀子后 机体的非特异性免疫细 胞免 疫和体液免疫机 能均有不同程度的增强 (见表1) 。 2 . 2 服药后机体的激素变化 激素作用的调节物 质 cAM P和 c
11、G MP 、 SOD 、 L PO和甘油三酷的含 量均有显著变化(见表2 ) 。 2 . 3 服用构祀后老年人淋巴细胞DNA修复能力 淋巴细抱D NA修复能力明显提高 ,SC E 频率明显降 表 1口服构祀对老年人免疫指标的影响 ( x 士:) L ZM19(g/L) 淋转率 IFN 乙一2 (x10 一 g /L) GA M (5 1)(log GMT )(G士S ) 例 数 32 353535 312023 服药前 2 4 . 59土7 . 64 14 . 57士4 . 2519 9士0 . 9 5 1 . 15士0 . 6 6 23 . 74士13 332 . 363 56士2 7 .
12、4 服药后 7 6 . 91士5 9 . 07 17 . 29士6 . 202 . 62上1 . 68 1 . 34士0 . 5 7 1 84 . 18士104 . 0 31 . Go4 7 8士42 . 6 P 值 0 . 0 0 2 0 . 05 0 . 05 0 . 001 0 . 01 0 . 01 表 2口服构祀对老年人生理生化指标的影响 ( x 士 : ) 指 标 T : T TE ZeAMPeG MP SODLPO 甘油三醋 血浆胆固醉 例数 3 2321933434 20 202020 4 . 05 服药前 1 . 00 士0 . 58 71 . 03 士25 . 48 士0
13、. 56 0 78 士0 . 09 28 . 83 士8 . 59 6 . 70 士4 . 3 6 1 9 1 , 2 0 士1 9 . 75 5 . 37 士0 . 60 1 29 士0 , 22 5 . 63 士0 . 15 服药后 0 . 85 上0 , 60 71 . 69 士48 . 80 4 . 53 士1 . 58 0 . 77 士0 . 0 9 36 . 14 土9 . 60 0 . 01 4 。 20 士379 282 . 10 士4868 1 . 9 3 士0 . 3 7 1 . 08 士0 . 3 1 5 94 士0 . 18 P值 0 . 05 0 . 05 0 . 0
14、 01 0 . 01 0 . 05 单 位 , T : xzo一 g /L , T ; xzo一 g/ L , Txlo一 g/L , E z 冰 10 一 ,mol/L, SOD 拌g/g H b , LPO 又10一 t no l/L , x10 一g /L , eAMP 义10一 gmol/L 甘油三醋 m mo l/L , 血浆胆固醉 , eG MP mm ol/L 低 (见表3 ) 。 2 . 4 喂饲构祀 或构祀多糖小鼠的平均寿命实验 组平均寿命比对照组长 , 但差别无显著意义 (见表 4) 。 2 . 5 喂饲拘祀或拘祀多糖的果蝇平均寿命实验 组平均寿命比对照组长 , 某些组间差
15、别极显著 , 各组 最高寿命均无 明显差别(见表 5) 。 表 3 口服构祀对老年人D NA 修复速度和 S C E频率的影响 D 丫A修复速度 (epm/分) SCE/细胞 例数 1 92 5 服药前 505士1 7 3 7 . 3 6士1 . 89 服药后 848土27 75 . 5 6士1 16 尸值 0 . 0 1 0 . 0510 29 6 78 . 89士34 . 45 0 . 05 642 . 80士39 . 65减 6 6 8 . 46士3 4 . 95减 狱 1002 00 06 浦h月b 实验 1组 实验 I 组 对照组 均与相应的对照组相比 , 试统计从 1 2月龄开始
16、, 表 5 喂饲拘祀或构祀多糖对果蝇寿命 的影响 ( x士 : ) 组别 成虫平均寿命 (天) P 值 成虫最高成虫平均 寿命 (天) 体! ( mg) 构祀 1 组 构 祀 l 组 拘祀 , 组 构祀多塘 I 组 ( 0 。 01 0 。 05 对照组 66 . 28 士1 4 . 1 2 6785 士1 3 , 58 60 、 1 2 士1 2 46 6 8 56 士14 3 艺 61 . 32 士14 . 80 60 , 68 士12 . 5 4 60 . 8 8 士12 . 5 6 106 108 104 106 109 105 106 0 . 9 0 6 士0 . 113 0 , 9 2 6 士0 . 121 0 。 9 15 士0 . 10 9 0 . 924 士0 . 1 1 5 0 . 91 6 士0 . 1 1 6 0 。 909 士0 . 1 18 0 . 911 士0 . 120 乙均与对照组相比 3 讨 论 衰老是机体的一种复杂的生物学过程 , 三十
