《控作用及蛹虫草菌丝体的药理学研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《控作用及蛹虫草菌丝体的药理学研究（54页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、安徽农业大学 硕士学位论文 昆虫激素对蛹虫草液体发酵培养的调控作用及蛹虫草菌丝体的 药理学研究 姓名：施明珠 申请学位级别：硕士 专业：森林保护学 指导教师：计东风;李增智 20080601 摘要 本研究选择昆虫蜕皮激素 胞外多糖产量 胞内多糖产量 菌丝体产量。 保幼激素H I 不同处理组在培养7d 后取样测定，菌丝体产量和虫草素产量较对 照组略有提高，分别增加了5 1 9 7 和O 1 2 1 1 ，但胞内多糖和胞外多糖产量明显 下降，下降幅度分别为3 4 5 5 1 6 和2 4 9 3 0 8 。保幼激素I I I 影响了蛹虫草液体培 养过程中的生长代谢节奏，对照组胞内多糖含量、胞外多糖
2、产量和虫草素含量在培养 7 d 后达到最大值，而保幼激素I I I 不同处理组胞内多糖含量、胞外多糖产量和虫草素 含量在培养ld 、3d 、3d 取样分析时达到最大值。与此同时，不同浓度的保幼激素 I I l 在处理初期对蛹虫草菌丝体生长表现出明显的抑制作用，培养ld 后测定，菌丝体 产量较对照下降了5 2 4 5 9 7 ，至培养第5d ，各处理的菌丝体产量才与对照相仿。 伊蜕皮激素和保幼激素I I I 共同处理，培养7d 后测定，菌丝体产量比对照组有所 提高，提高幅度与伊蜕皮激素单因素处理组相仿：胞外多糖产量较对照组低，且随着 保幼激素I 添加量的增加而下降；另一方面，胞内多糖和虫草素含量
3、均比对照组和 单因素处理组高，其中伊蜕皮激素和保幼激素I I I l ：4 添加组( 浓度分别为1 2 和4 8 m g 1 ) 胞内多糖和虫草素产量比对照组分别增加了6 8 4 和1 2 3 2 。同时，随着复合 处理组内保幼激素I I I 与伊蜕皮激素浓度比的提高，胞外多糖产量和虫草素含量的高 峰期相应提前。 伊蜕皮激素和保幼激素I I I 共同处理组与对照组菌丝体醇提物在2 6 0a m 和2 8 0n m 下检测发现，H P L C 图谱中峰值相似，推测伊蜕皮激素和保幼激素I I I 仅对蛹虫草菌 丝体活性物质的产量产生影响。 蛹虫草菌丝体醇提物( E E C M ) 药理试验方法如下
4、：将I C R 雄性老龄小鼠随 机分为正常组，模型组和蛹虫草菌丝体醇提物低、中、高剂量处理组( O 1 6 7 ， 0 3 3 4 ，0 6 6 8g k g - 1 d q ) ，其中在肾损伤试验中增加了参仙壮肾胶囊药物对照 处理组( O 2 5 0g k g d q ) 。除正常组外各处理组均肌注氢化可的松 ( 2 5 r a g k g “ t d 1 ) 造模7 d ，给药结束后测定小鼠肝组织丙二醛( M D A ) 含量、A T P 酶( N a + K + - A T P a s e ，c 一+ M 矿+ A T P a s e ) 、超氧化物歧化酶( S O D ) 和谷胱甘肽过
5、氧 化物酶( G S H P X ) 活力大小及小鼠血清尿素氮( B U N ) 、肌酐( S e r ) 、促肾上腺 皮质激素( A c T H ) 和皮质醇( C o r ) 的水平变化，同时通过光镜观察小鼠肝、肾组 织结构病理变化。 E E C M 可显著提高模型小鼠肝组织中A T P 酶( P I P Sy i e l d M y c e l i a ly i e l d ) J u v e n i l eh o r m o n eI I Ii n c r e a s e dt h em y c e l i a ly i e l da n dc o r d y c e p i ny i
6、 e l da tt h e7 t hd a y f r o m5 1 t o9 7 a n d0 1 t o2 1 1 ，h o w e v e r ；I P Sa n dE P Sy i e l d sd e c r e a s e df r o m 3 4 5 t 051 6 a n d2 4 9 t o3 0 8 ，r e s p e c t i v e l y J u v e n i l eh o r m o n eI I Ia f f e c t e dt h e r h y t h m so fm y c e l i ag r o w t ha n dm e t a b o l
7、i s mo fC o r d y c e p sm i l i t a r i sb yl i q u i df e r m e n t a t i o n I P Sc o n t e n t , E P Sy i e l da n dc o r d y c e p i nc o n t e n to ft h ec o n t r o lg r o u pa l lo b t a i n e dt h e m a x i m u m sa tt h e7 t hd a y , h o w e v e r , t h ej u v e n i l eh o r m o n eI I Ig
8、r o u p so b t a i n e dt h e m a x i m u m sa tt h el 鼍3 r d ，a n d3 砌d a y , r e s p e c t i v e l y I na d d i t i o n , j u v e n i l eh o r m o n eI I Ih a da l l i n h i b i t o r ye f f e c to nt h em y c e l i a lg r o w t hd u r i n gt h ee a r l ys t a g eo ff e r m e n t a t i o n W i t h
9、 i nt h e s c o p eo ft h i ss t u d y , j u v e n i l eh o r m o n eI I Id e c r e a s e dm y c e l i ay i e l df r o m5 2 4t o5 9 7 a f t e r ld a y , a n dr e a c h e dt h el e v e lo f t h ec o n t r o lg r o u pa tt h e5 md a y I I I W i mt h ef l - e e d y s o n ea n dj u v e n i l eh o r m o
10、n eI I Id i s p o s i n g ，m y e e l i a ly i e l d sw e r e i n c r e a s e da tt h e7 md a y , a n dt h ee f f e c t sw e r es i m i l a rt ot h ep - e c d y s o n et e s t O nt h eo n e h a n d , c o m p a r e d 谢mt h ec o n t r o lg r o u p ，E P Sy i e l dw a ss i g n i f i c a n t l yd e c r e
11、a s e do w i n gt ot h e i n c r e a s i n gj u v e n i l eh o r m o n eI I I ；o nt h eo t h e rh a n d ，c o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u pa n d o n e - f a c t o rt e s t , t h ec o n t e n t so fI P Sa n dc o r d y c e p i nw e r ei n c r e a s e d T h e r e i n t o ，t h ey i e l d
12、so f I P Sa n de o r d y c e p i no f j u v e n i l eh o r m o n eI I I ：p - e c d y s o n e = 1 ：4 g r o u p ( j u v e n i l eh o r m o n e I I I1 2m 胡，p - e c d y s o n e4 8m g 1 ) w e r ei n c r e a s e db y6 8 4 a n d1 2 3 2 ，r e s p e c t i v e l y I n a d d i t i o n , h i g h e rp r o p o r t
13、 i o no fj u v e n i l eh o r m o n eI I Ic a u s e dt h ep e r i o d so fE P Sy i e l d s m a x i m u ma n dc o r d y c e p i nc o n t e n tm a x i m u mt oo c c u rs o o n e r H P L Cc h r o m a t o g r a m so fe t h a n o le x t r a c to fC o r d y c e p sm i l i t a r i sm y e e l i ab e t w e e
14、 nt h e c o n t r o lg r o u pa n dt w o f a c t o r sg r o u p ( 1 ：1 ) a t2 6 0n ma n d2 8 0n l ns h o w e dt h a tt h er e t e n t i o n t i m e sw e r es i m i l a r , a n di ti m p l i e dt h a tf l - e e d y s o n ea n dj u v e n i l eh o r m o n eI I Io n l ya f f e c t e d t h ey i e l d so
15、ft h ea c t i v es u b s t a n c eo fC o r d y c e p sm i l i t a r i s M e t h o d so fp h a r m a c o l o g i c a lt e s to fE E C M ( e t h a n o le x t r a c to fC o r d y c e p sm i l i t a r i s m y e e l i a ) w e r ea sf o l l o w s ：o l dm a l eI C R m i c ew e r er a n d o m l yd i v i d e
16、 di n t on o r m a l ，c o n t r o l ， E E C M g r o u p sa n dt h es h e n - x i a n - z h u a n g s h e n - j i a o - n a n gg r o u p ( i nk i d n e yt e s t ) A l lg r o u p s e x c e p tt h en o r m a lc o n t r o lw e r ei n j e c t e dw i t hh y d r o c o r t i s o n e ( 2 5m g k g - l - d q ) f o r7d a y s T h eE E C Mg r o u p sw e r et r e a t e dw i t hE E C Ma tad o s eo f O 1 6 7 ，0 3 3 4
