第1章-组织学绪论2016.ppt

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1、组织学与胚胎学 Histology and Embryology,组胚教研室 高福莲教授等 办公电话 3029126 监督电话 3029945,课程教学安排,理论课46学时,周24学时。 组织学36学时,胚胎学10学时。 实验课 应用型 第4学期,组织病理学实验。 基础型 本学期1215周,20学时。 组织学15学时,胚胎学5学时。 请关注教学日历。,课程性质与成绩考核,新乡医学院教学计划(试行)-2015规定: 本科5年制各专业的专业基础必修课。 成绩评定方式为考试,考试及格可获2.5学分。 课程成绩:70的理论考试, 20的基础型实验考试, 10的平时成绩(实验课出勤、实验 报告、学习态度

2、等)。 考试时间:理论考试在期末、由学校统一安排。 基础型实验考试在实验课结束后进行。,第1章 组织学绪论,组织学绪论内容简介与目标,本节 组织学的内容 组织学的意义 组织学技术简介 组织学的学习 方法,组织学的内容 -掌握,组织学技术简介-熟悉,课本 组织学的内容和意义 组织学的发展简史和当代组织学 组织学的学习方法 组织学技术简介,一、组织学的内容,组织学(histology)是研究机体微细结构及 其相关功能的科学。,借助显微镜,显微解剖学,中国解剖学会,(一)显微镜,光学显微镜 (光镜,light microscope,LM) 电子显微镜 (电镜,electron microscope,

3、EM),光镜和电镜的放大原理,普通光学显微镜,荧光显微镜,荧光显微镜成像,激光共聚焦扫描显微镜成像,激光共聚焦扫描显微镜,光源为激光、共轭聚焦、计算机对图像处理分析。,倒置相差显微镜,透射与扫描电镜的成像原理,透射电子显微镜,扫描电子显微镜,光学显微镜 普通光学显微镜 荧光显微镜、激光共聚焦显微镜 相差显微镜 电子显微镜 透射电子显微镜 扫描电子显微镜,1mm=103m=106nm 光镜的放大倍数在千以内 电镜的放大倍数在万以上,光学和电子显微镜对结构的可分辨性 种类 结构 分辨率 度量单位 光学 光镜结构 0.2m m 电子 超微结构 0.2nm nm ( ultrastructure),组

4、织学(histology)是研究机体微细结构及 其相关功能的科学。,借助显微镜,显微解剖学,结构,中国解剖学会,一、组织学的内容,(二)机体的结构,分子 亚细胞 细胞 组织 器官 系统,生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖和脂。,细胞器如线粒体等。,细胞质、细胞核等。,上皮、结缔、肌组织和神经组织。,肝、胃等。,消化系统、呼吸系统等。,组织学(histology)是研究机体微细结构及 其相关功能的科学。,借助显微镜,显微解剖学,结构,功能,中国解剖学会,微细,一、组织学的内容,二、组织学的意义,结构是功能的基础,组织学的发展促进生理学的进步,组织学的学习为生理学打下良好基础。 疾病的判断必须以正常

5、为参照,良好的组织学知识为病理学的学习打下基础。,三、组织学技术简介,离体组织研究技术,活体组织研究技术,(一)离体组织研究技术,光电镜技术 组织化学术 组织定量技术,1.光电镜技术,离体组织缺陷 变腐 柔软 大块,涂 铺 磨 切,适应观察策略,(1)切片技术,光镜标本制作程序:石蜡包埋切片技术,透射电镜标本制作程序:超薄切片技术,离体组织缺陷 变腐 柔软 大块,涂 铺 磨 切,染色,适应观察策略,1.光电镜技术,反差小,(2)显示结构的常用染色法光镜,苏木精-伊红染色 (hematoxylin-eosin staining),简称HE染色。 染料 组织 名称 化学性质 色彩 化学性质 着色部

6、位 嗜好 苏木精 碱 蓝 酸 细胞核 嗜碱性 大量核糖体 伊红 酸 红 碱 大部分成分 嗜酸性 特殊染色 如硝酸银、甲苯胺蓝、醛复红等。 活体染色 台盼蓝活体注射。,HE染色,银染,甲苯胺蓝染色,铺片、醛复红等和台盼蓝活体染色,重金属盐 醋酸铀和柠檬酸铅,电子显微镜染色结果,黑白图象 高电子密度低电子密度,超微结构图,(2)显示结构的常用染色法电镜,透射电镜结构图,扫描电镜结构图,冷冻断裂技术原理,冷冻断裂扫描电镜图,(3)其它的电镜技术,冷冻蚀刻复型技术原理,冷冻蚀刻复型透射电镜图,电子显微镜染色结果,黑白图象,伪彩,离体标本缺陷 变腐 柔软 大块 反差小,涂 铺 磨 切,染色,冷冻蚀刻复型

7、,冷冻断裂,适应观察策略,1.光电镜技术,2.组织化学术,组织化学术是运用物理学、化学、免疫学、分子生物学等原理,对组织与细胞的化学成分及其变化规律进行定性、定位的技术。 按照运用原理的不同,分为: 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术,(1)一般组织化学术,一般组织化学术是在组织切片上滴加试剂,试剂和组织中的待检物发生化学反应,借助观察最终产物,对待检物定位的方法。 有色物质 光镜观察 最终产物 重金属盐 电镜观察,PAS反应(过碘酸希夫反应)的原理,多糖,1)PAS反应 显示多糖,PAS反应 肝糖原,PAS反应 小肠黏原颗粒,核复染,2)苏丹染色 显示脂类,石蜡切片 HE染色,冰冻切

8、片 苏丹染色,核复染,免疫组织化学术(immunohistochemstry)是利用抗原和抗体结合的原理,用标记的抗体检测组织中肽和蛋白质的技术。,抗体的标记物 荧光素 辣根过氧化物酶 胶体金,光镜或电镜,荧光显微镜,电镜,(2)免疫组织化学术,免疫组织化学(荧光素标记),免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记),核复染,(A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记),免疫组织化学电镜像,原位杂交术(in situ hybridization)为利用碱基配对的原则,用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针, 检测组织细胞内特定核酸的方法。 碱基的标记物 放射性核素 放射自显影 地高辛 免疫组织化学术,(3)

9、原位杂交术,原位杂交(地高辛标记),3.组织定量技术,显微分光光度术 通过测定组织化学术中最终显示物的强度,获得定量信息的技术。 图像分析术(image analysis) 又称形态计量术,是应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析,从而获得立体状态组织和细胞内各有形成分的数量、体积和表面积等参数的技术。 体视学(stereology) 从组织平面图像,研究三维立体结构的学科。,图像分析仪,计算机三维重建,(二)活体组织研究技术,属于观察机体不同功能状态的结构、物质代谢过程等的技术。 放射自显影术 细胞培养术 组织工程,1.放射自显影术,放射自显影术(autoradiography

10、)为利用放射性核素的可观察和显示性,研究物质在组织或细胞内消长、分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞代谢的技术。,方法:将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内,有规律地间断取材、制片,放射性自显影(涂感光乳胶、暴光 、显定影),显微镜观察银粒。,3H标记的胸腺嘧啶核苷放射自显影像,2.细胞培养术,细胞培养术(cell culture)为在体外模拟体内的条件下,培养机体细胞的技术。可研究: 代谢、增殖、分化、形态和功能变化。 各种理化因子对活细胞的直接影响。 组织培养术、器官培养术、in vitro。 原代培养、传代培养。 细胞系、细胞株。,细胞培养的器皿与倒置显微镜,培养细胞

11、的倒置相差显微镜图像,组织工程(tissue engineering)是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。,实验中的组织工程耳,3.组织工程,干细胞,器官移植供体,转化医学,离体组织的研究技术 光电镜技术 组织化学术 组织定量技术 显微分光光度术 图像分析术 体视学 活体组织的研究技术 细胞培养术 组织工程 放射自显影术,光镜技术 电镜技术 组织化学术 图像分析术 细胞培养技术与组织工程,四、组织学的学习方法,基本知识相互联系、相互对比、分析记忆。 用已有的知识去理解记忆新知识。 结构和功能的联系。 结构的直观化充分发挥观察能力。 借助插图、照片和图谱等,理解记忆结构。 立体和切

12、面的关系。,立体与切面的关系,典型结构:能反映立体结构特征的切面。,课程教学参考资料,图谱 彩色、黑白、电镜结构。 教科书 人民卫生出版社各版本专科教材等。 专著 组织学12版。 习题集解,网络组织学与胚胎学资源 新乡医学院省级精品课程 新乡医学院2010网络示范课程,新乡医学院省级精品课程组织学与胚胎学,精品课程/省级精品课/组织学与胚胎学/查看,网站说明 教学内容 学习辅助 课程支撑 申报专项,27个栏目,新乡医学院2010网络示范课程组织学与胚胎学,学习大纲 教师队伍 学习纲要 教学录像,课程辅导和答疑,网络 课程网页 新乡医学院省级精品课程 新乡医学院2010网络示范课程 电子邮件 gfl 场地 教研室 实验楼A座一楼东 课前后,小 结,课程教学安排 课程性质与考核 组织学绪论 一、组织学的内容 二、组织学的意义 三、组织学技术简介 四、组织学的学习方法 课程教学参考资料 课程辅导和答疑,组织学绪论思考题,组织标本制备中,离体组织的缺陷和克服对策是什么? 显示组织结构和化学成分的染色方法的异同? 用什么技术可以在扫描电镜下看组织内部结构? 用什么技术可以在透射电镜下看组织内部的立体状态?,下次课的内容,第2章 上皮组织,See you later,

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