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1、,培训材料十：奶牛结核病监控,新希望生态牧业有限公司 高级兽医师 中国奶协专家库兽医专家 姚 智 深,主要内容 一、概述 二、病原 三、流行病学 四、临床症状 五、诊断 六、防控 七、公共卫生,一、概述 结核病是由结核分支杆菌（牛型、人型及禽型）引起的慢性人畜共患传染病。以多种组织器官形成肉芽组织和干酪样、钙化结节病变为特征。临床上以低热、咳嗽、消瘦，生产性能低下为主要特征。 欧洲多个国家如丹麦，比利时，德国，挪威，荷兰，瑞典，芬兰，卢森堡，澳大利亚，加拿大等地已消灭了牛结核。日本，英国，法国，美国等已经控制了牛结核。 我国的人畜结核病虽然得到了控制，但近年来发病率又有增长趋势。,二、病原,属
2、于分支杆菌科、分支杆菌属。其形态为中等大小杆菌，革兰氏染色阳性，抗酸性染色被染成红色。无荚膜，无芽孢，无鞭毛，为专性需氧菌，对培养基要求苛刻。在人工培养基上生长缓慢，3周左右开始生长。 结核杆菌对热和紫外线敏感，6030min即可死亡，阳光直接照射数小时死亡。对环境的抵抗力较强，生长最适温度为37.5,最适生长PH为5.96.9。在干痰中能存活10个月，粪便中67个月，病变组织中27个月或更久，水中可存活5个月，冷藏奶油中10个月。常用消毒剂经40h可将其杀死，在70%酒精或者10%漂白粉中很快死亡。,结核杆菌的电镜扫描图,Ziehl-Neelsen氏抗酸性染色的结核杆菌（红色）,三、流行病学
3、,牛结核杆菌主要侵害人和家畜，家畜中牛最易感，其中奶牛和黄牛最易感。病牛、病人、带菌者都是本病的主要传染源。 可通过尘埃、污染的饲料和水、配种、空气等散播传染。 主要经呼吸道、消化道和生殖器等途径感染。 饲养管理不当与本病的传播有密切关系，畜舍通风不良、拥挤、潮湿、阳光不足、缺乏运动最易患病。 各种年龄的家畜均可能感染此病，并无明显的季节性。,主要感染途径为呼吸道和消化道。 相对来说，成年牛易经呼吸道感染，而青年牛易经消化道感染。 呼吸道感染主要由带菌尘埃或气溶胶所造成。 消化道感染则常因饲草、饲料被污染。 犊牛感染主要是吮吸带菌的乳汁 造成的。 此外，成年牛也可通过交配感染。,传播途径,免疫
4、和发生机理,牛分支杆菌是细胞内寄生菌。机体主要是通过细胞免疫来进行抵抗菌体。 发病机理 分支杆菌 被吞噬（忽略） 机体的巨噬细胞 被带入组织或淋巴管 侵入组织或淋巴结处发 生原发性病灶 抵抗力强时，病灶长期或终身不扩散 抵抗力弱时，细菌向其他淋巴结扩散，形成继发性病灶 细菌进入血液，散布全身，引起全身性结核。,四、临床症状,潜伏期一般为10-45d，长的达数月。牛结核常分为肺结核、乳房结核、淋巴结核，有时可见肠结核，生殖器结核，脑结核，浆膜结核和全身结核。 肺结核一般病初食欲、反刍无明显变化。会有干咳并且逐渐加重，有粘液脓性鼻涕，严重时可发生气喘。胸部会有摩擦音，叩诊出现浊音区。有体表淋巴结肿
5、大。病情恶化会发生全身性栗粒结核，即所谓的珍珠病。此时病牛体温升至40，呈弛张热或稽留热，呼吸更加困难，最后心力衰竭而死。,淋巴结核并不是一个独立的的病型，各型结核病的淋巴结都可能发生病变。病变淋巴结肿大，无热痛，常见于肩前、股前、腹股沟、颌下、咽及颈淋巴结等。 乳房结核的特征是：乳房上淋巴结肿大，乳房本身有局限性或者弥散性硬结，无热亦无痛。产奶量下降，乳汁常变得稀薄如水。由于肿块形成和乳腺萎缩，两侧乳房变得不对称，乳头变形而且位置失常，终至产乳停止。,病理变化,干酪样坏死：多见于组织器官内，常出现在结核结节中心，或脏器中直接可见黄色的干酪样病灶。有的干酪变为脓样液体或者钙化；有的坏死溶解排出
6、后，形成空洞（多见于肺）。 “珍珠样”结节：见于胸腔和腹腔的浆膜上，一般为栗粒至豌豆大的透明或半透明灰白色或黄色结节似珍珠状，结节联合状似葡萄。结节中心常干酪化或钙化。也有的小结节成长不规律，形成一蒂与浆膜连接。,牛结核病 肺结核 左侧干酪样结节 结节间为纤维结缔组织（1） 正常肺组织（2） 右侧干酪样坏死后形成肺空洞（3）,牛肺结核、支气管淋巴结核、干酪样坏死，边缘黑色为尘埃沉积（固定标本）,五、诊断,1.临床症状和病理变化诊断 。 2.病原学诊断 抗酸染色法 、细菌分离培养法。 3.免疫学试验牛的牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验。 4. 其它方法：PCR法、 迟发性变态反应试验 、
7、ELISA法、 淋巴细胞转化试验 、 -干扰素试验 、 菌体成分检测法。,结核菌素皮内变态反应试验（PPD）,用结核菌素进行的皮内变态反应试验是检查牛结核病主要方法。试验分二种，一种是牛型结核菌素单一试验，仅用牛型结核菌素进行，目的是检测是否存在牛型结核分枝杆菌的感染。 另一种是结核菌素比较试验，用牛型结核菌素和禽型（或副）结核菌素同时进行，这是一种鉴别诊断试验，用以明确是牛型结核分枝杆菌感染，还是副结核分枝杆菌或其他分枝杆菌感染。奶牛主要是排除副结核的干扰。,牛型结核菌素皮内变态反应试验,出生后20天的牛即可用本试验进行检疫。 操作方法如下： 1、注射部位及术前处理：将牛只编号后在颈侧中部上
8、1/3处剪毛（或提前一天剃毛），三个月以内的犊牛，也可在肩胛部进行，直径约10cm。（简易初查可于尾根皱褶处做）。用卡尺测量术部中央皮皱厚度，作好记录。注意术部应无明显的病变。 2、 注射剂量：不论大小牛只，一律皮内注射0.1mL（所含单位20005000IU）。冻干提纯结核菌素稀释后当天用完。,3、 注射方法 先以75酒精消毒术部，然后皮内注射定量的牛型结核菌素，注射后局部应出现小疱，如对注射有疑问时，应另选15cm以外的部位或对侧重做。 4、 注射次数和观察反应 皮内注射后经72小时判定，仔细观察局部有无热痛、肿胀等炎性反应，并以卡尺测量皮皱厚度，作好详细记录。 对疑似反应牛应立即在另一侧
9、以同一批提纯结核菌素同一剂量进行第二次皮内注射，再经72小时观察反应结果。 对阴性牛和疑似反应牛，于注射后96和120小时再分别观察一次，以防个别牛出现较晚的迟发型变态反应。,结果判定 1、阳性反应： 局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于4.0 mm 。 2、疑似反应： 局部炎性反应不明显，皮厚差大于或等于2.0 mm，同时小于4.0 mm 。 3、阴性反应： 无炎性反应。皮厚差在2.0 mm以下。 凡牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验疑似反应者，于3045日后进行复检，复检结果为阳性，则按阳性牛处理; 若仍呈疑似反应则间隔3045天再复检一次，结果仍为可疑反应者，视同阳性牛处理。,皮内
10、变态反应比较试验,本试验采用牛型结核菌素和禽型（或副）结核菌素同时进行。 操作方法： 在牛颈中部选2个点，一个在上1/3处一个在下1/3处。2个点之间的距离不得少于10cm。注射点及周围的皮肤应无异常。 禽型（或副）结核菌素的注射剂量为每头0.1ml，含0.25万IU。即将禽型（或副）结核菌素稀释成每毫升含2.5万IU后，皮内注射0.1毫升。 牛型结核菌素的注射剂量为每头0.1ml，含0.200.5万IU。即将牛型结核菌素稀释成每毫升含2.05.0万IU后，皮内注射0.1毫升。,结果判定 1、牛型结核菌素皮内变态反应试验阳性。 对牛型结核菌素的反应为阳性（局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于
11、4.0 mm），并且对牛型结核菌素的反应大于对禽型（或副）结核菌素的反应，二者皮差在2.0 mm以上，判为阳性。 对已经定性为牛型结核分枝杆菌感染的牛群。其中即使少数牛的皮差在2.0 mm以下，甚至对牛型结核菌素的反应略小于对禽型（或副）结核菌素的反应（反应差小于或等于2.0 mm），只要对牛型结核菌素的反应在2.0 mm以上，也应判定为牛型结核菌素皮内变态反应试验阳性牛。,2、禽型（或副）结核菌素皮内变态反应试验阳性。 对禽型（或副）结核菌素的反应大于对牛型结核菌素的反应，两者的皮差在2.0 mm以上，判为禽型（或副）结核菌素皮内变态反应试验阳性。 对已经定性为副结核分枝杆菌或禽型结核分枝杆
12、菌感染的牛群。其中即使少数牛的皮差在2.0 mm以下，甚至对禽型（或副）结核菌素的反应略小于对牛型结核菌素的反应（不超过2.0 mm），只要对禽型（或副）结核菌素的反应在2.0 mm以上，也应判为禽型（或副）结核菌素皮内变态反应试验阳性牛。,结核检疫,消毒,淋巴结核,比较试验,保定,刮毛,量皮,注射,对比试验,六、 防控,结核虽然有有效的药物治疗，但由于疗程长和考虑经济价值，奶牛一般不予治疗。主要采取以“监测、检疫、消毒、隔离、扑杀”相结合的综合性防控措施。 1、监测 如在牛结核病净化群中（包括犊牛群）检出阳性牛时，应及时扑杀阳性牛，其它牛按假定健康群处理。 成年牛净化群每年春秋两季用牛型结核
13、分枝杆菌PPD皮内变态反应试验各进行一次监测。初生犊牛，应于30日龄时进行第一次监测。,2、 检疫 异地引进的奶牛，必须来自于非疫区。异地调牛装运前30天内，须在当地检疫合格，方可调运。 调入的奶牛，必须隔离观察45天以上，且经牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验检查阴性者，方可混群饲养。 3、隔离 疑似结核病牛或牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验可疑牛须隔离复检。隔离牛舍处在下风口，并与健康牛舍相隔50米以上。 奶牛场生产区应与生活区隔离，场内不应饲养动物，并应禁止其它动物进入。,牛场工作人员，每年要定期进行健康检查。发现有患结核病的应及时调离岗位，隔离治疗。 4、净化 被确诊为结核病
14、牛的牛群（场）为牛结核病污染群（场），应全部实施牛结核病净化。 污染牛群的净化：应用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验对该牛群进行反复检测，每次间隔3个月，发现阳性牛及时扑杀直至净化。（适用于低度污染发病牛场）。 假定健康牛群的建立：经检测扑杀病牛及阳性牛后的牛群视为假定健康牛群，假定健康牛群异地隔离饲养为二级净化。高度污染发病牛场需二级净化。,健康牛群建立：牛群二级净化后仍需反复监测，每次间隔3个月，发现阳性牛及时扑杀，直至牛群连续两次以上监测结果均为阴性者，方可认为是牛结核病净化群。 健康犊牛群的培育：病牛所产犊牛，立即隔离饲养，饲喂检疫无结核病的母牛奶或巴杀奶。 犊牛应在出生1月龄、
15、3月龄、6月龄进行3次检疫。凡呈阳性者必须淘汰处理。如若均为阴性而且无任何可疑临床症状，可放入假定健康牛群中培育。为了过渡到健康牛群，以后也应每隔3个月进行一次检疫，直到连续两次以上监测结果均为阴性者则可称为健康牛群。,5、 消毒 经常性消毒：牛场及生产区出入口处，应设置消毒池，内置有效消毒剂，如35%来苏尔溶液或2%烧碱等。消毒药要定期更换，以保证一定的药效。 临时消毒：健康牛群中检出结核病牛并剔出病牛后，全场应进行一次全面消毒，包括牛舍、运动场及用具。常用药为5%来苏儿、10%漂白粉，3%福尔马林或2%苛性钠溶液。 定期消毒：假定建康牛场每年应进行2次全面预防性大消毒。产房每周进行一次消毒，产圈消毒在临产牛生产前及分娩后各进行一次消毒。牛舍、运动场及用具视情况定时消毒。,七、公共卫生,人结核病主要由人型或牛型结核分枝杆菌所致，牛型结核杆菌对人攻击力弱，在人结核病中约有5%为牛型，这也和人群普遍接种卡介苗有关。 人结核主要临床表现为长期发生低热，常呈不规则性，多在午后发热，傍晚下降，晨起或上午正常，倦怠，心悸。肺结核患者见咳嗽和咳痰，有空洞的患者则咳出脓痰，咯血。胸痛，呼吸困难。颈淋巴结核见颈部淋巴肿大，初期可移动，如破溃，则经久不愈。肠结核则腹痛，多位于右下腹，可见腹泻。其他有结核性胸膜炎及肾结核、骨关节结核等。,
