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1、ISO15189实验室认可中 临床微生物检验 技术要求,首都医科大学附属北京友谊医院 临床检验中心 苏建荣 youyilab,微生物专业认可特色 (与其他检验专业的区别),定性试验多，统一标准难 -晚于其他专业认可，评审专家角色重要、甚至出现争议（CNAS 率先 ） 对策：专家团队专业知识全面、制定统一标准 出现的问题种类繁多 -从项目申报的问题到指导临床，遍及全过程 对策：系统学习认可知识，参加培训宣贯 专业知识独特，进展多，变化快 -新老知识交叉出现 对策：对于评审专家来讲-学习 对于被评审单位-我今讲最新CLSI进展,主要讲课内容,新版 “应用说明”技术要素内容及理解： （医学实验室质量
2、和能力认可准则临床微生物学检验领域的应用说明） CLSI M100-S22，即2012版 生物安全内容在ISO 15189中的体现,医学实验室质量和能力认可准则临床微生物学检验领域的应用说明CNAS-GLxx：2012 医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南CNAS-GL23：2008,认可申请中常见问题申报项目,培养和鉴定（普通细菌6B010） ： 上呼吸道标本：与A组链球菌(分析物编码即领域代码前四位:6B070)、流感嗜血杆菌组合认可。 下呼吸道标本: 与肺炎链球菌(6B075)、流感嗜血杆菌组合认可。 粪便：与沙门菌鉴定(6B085)+血清学分类(6B820) 、 志
3、贺菌鉴定 +血清学分类、 霍乱弧菌鉴定 +血清学分类组合认可 脑脊液：与肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌组合认可 药物敏感性试验（普通细菌6C010） ： 自动化仪器检测法应与纸片扩散法和/或药敏试验（最低抑菌浓度）组合认可 纸片扩散法应与药敏试验（最低抑菌浓度）组合认可,解读“应用说明” 4 管理要求,4.1 组织和管理 4.1.1 实验室为独立法人单位的，应有医疗机构执业许可； 实验室为非独立法人单位的，其所属医疗机构执业证书的诊疗科目中应有医学实验室，自获准执业之日起，开展医学检验工作至少2年。,new!,解读“应用说明” 5 技术要求,5.1 人员 5.1.2 微生物实验室（以下
4、简称“实验室”）工作人员上岗前应接受辨色力检查。 5.1 人员 5.1.2微生物实验室的工作人员在上岗前需接受辨色力检查。需具备相关教育背景，并至少每年接受微生物专业技术及知识培训，熟悉微生物学实验室操作规程、消毒灭菌及生物安全知识。人员数量需满足所提供的服务的要求。 (已删除）,5.1.4 实验室负责人至少应具有以下资格：中级技术职称，医学、医学检验专业背景，或相关专业背景经过医学检验培训，3年临床微生物工作经验。 5.1.3实验室负责人至少具有以下资格： a) 医学实验室工作经历或培训2年以上；或 b) 医学实验室相关专业高级技术职称；或 c) 检验、生物化学、化学、生物科学等主修专业博士
5、，医学实验室工作经历或培训2年以上；或 d) 检验、生物化学、化学、生物科学等主修专业硕士，医学实验室工作经历或培训4年以上；或检验、生物化学、化学、生物科学等主修专业学士，医学实验室工作经历或培训8年以上。,new!,认可的授权签字人应至少具有中级以上专业技术职称，从事申请认可授权签字领域专业技术工作至少3年。 当微生物实验室作为医学实验室的一部分申请认可时，其负责人需有大学本科以上学历或中级以上技术职称，五年以上本专业工作经历。,new!,5.1.6 应每年对各级工作人员制定培训计划并进行微生物专业技术及知识培训、质量保证/质量管理培训、客户服务培训、安全培训、继续教育培训。 5.1.6
6、实验室需每年对各级工作人员制定培训计划并进行质量保证/质量管理训、客户服务培训、安全培训、继续教育培训。至少每6个月对人员进行胜任该岗位的考核，没有通过岗位职责考核人员需再培训和再考核，并记录。 （已删除）,5.2 设施和环境条件,5.2.1 实验室应有足够的办公、文字处理、培养基制备、实验工作空间。宜有适当的水池、排水管道、电源插座、通风设施、通讯设备。 5.2.1.1微生物实验室建筑、设施需与实验室从事的相应生物安全等级相符合。,(此页为新增内容） 5.2.2 应定期根据工作流程及性质实施安全风险评估，根据生物安全理论和技术的新进展制定、修订相应的生物安全操作和防护规程并进行培训，以减小职
7、业暴露的危险。当工作流程及性质发生变动时，应及时实施再评估。,new!,评估考虑内容：,微生物危险度风险评估 风险评估： 微生物危险度合理的预防措施 恒定不变 00,续5.2.2,至少应规定如下安全要求： (a)不同控制区域的防护措施及合适的警告； (b)已知或有潜在经空气、气溶胶传播危险的标本或病原体在生物安全柜内操作； (c)标本安全运送及处理，如工作人员接种疫苗，戴手套和进行呼吸道防护（适用时），确保容器密封性，嗅平板时的潜在危害及其防护等； (d)渗漏标本的处理措施； (e)工作环境及设备的消毒措施,new!,5.2.4 实验室内照明宜充足，避免阳光直射及反射，如果可能，可在实验室内不
8、同区域设置照明控制，以满足不同实验的需要。应有可靠的电力供应和应急照明。 5.2.4实验室内照明宜充足，避免阳光直射及反射，如果可能，可在实验室内不同区域设置照明控制，以满足不同实验的需要。宜有可靠的（不一定需要不间断电源或双路供电）电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等宜设专用电源。宜有适当的气体供应，以满足工作类型及工作量的需要。,5.2.10 应制定生物安全事故和危险品、危险设施等意外事故的预防措施和应急预案，并对全体人员进行培训。（新增内容） (生物安全认可ISO15489， 实验室安全认可15490),new!,5.3 实验室设备,5.3.1 设备配置应与实
9、验室服务相适应，生物安全柜的类型和安装应满足工作要求；孵育箱的数量和种类应满足诊断需要（如特殊温度范围和气体要求）；应贮存与诊断相配套的质控物，以便在染色、试剂、试验、鉴定系统和敏感性试验中使用；无菌体液的显微镜检查应配备细胞离心机。 5.3.1设备配置需与实验室服务相适应，如：有一定数量和类型的孵育箱，以满足诊断需要（如特殊温度范围）；贮存与诊断相配套的质控物，以便在染色、试剂、试验、鉴定系统和敏感性试验中使用；脑脊液检查配备细胞离心机。,new!,Diagram,Clean bench,Class I BSC,Class II BSC,Class III BSC,生物安全柜与洁净台： 风向
10、+与外界相连,BSL-3 百万级 Lab 分子生物学 Lab,3. 生物安全柜与洁净台的区别,实验室结构（负压）与生物安全柜？,5.3.2 设备校准、维护及性能等应符合如下要求： （a）自动化鉴定仪、血培养仪的校准应满足制造商建议； （b)每半年进行检定或校准的设备至少应包括浊度仪； (c)每年进行检定或校准的设备至少应包括：生物安全柜（高效过滤器、气流、负压等参数）、CO2浓度检测仪、细胞离心机、压力灭菌器、游标卡尺、培养箱、温度计、移液器、微量滴定管或自动分配器。 (d)应保存仪器功能监测记录的设备至少应包括：温度依赖设施（冰箱、孵育箱、水浴箱、加热块等每日记录温度）、CO2培养箱（每日记
11、录CO2浓度）、超净工作台（定期做无菌试验）、压力灭菌器（至少每个灭菌包外贴化学指示胶带、内置化学指示卡，定期进行生物监测）； (e)应制定预防性维护计划并记录的设备至少应包括：生物安全柜；CO2培养箱、自动化鉴定仪、血培养仪、压力灭菌器、超净工作台、显微镜和离心机。,new!,(此页为新增内容) 5.3.4所有试剂应标注或能追溯的信息包括：名称、浓度或滴度，存放条件，失效期。若试剂启封，改变了有效期和储存条件，宜记录新的有效期。试剂的储存条件应遵循生产商的建议，并在标明的有效期内使用。 培养基标签应包含生产日期（批号）、保质期（或失效期），适用时包括配方、质量控制、贮存条件等信息。 药敏用标
12、准菌株种类和数量应满足实验室工作要求，并保存其来源、传代等记录，并有证据表明标准菌株性能满足要求。 5.3.7如果设备故障影响了方法学性能，在设备修复、校准后，实验室应对设备性能进行验证，例如检测质控菌株或已知结果的标本。,new!,5.4 检验前程序,5.4.1 检验申请单应包括标本来源和临床诊断，必要时说明感染类型和/或目标微生物，宜提供抗菌药物使用信息。 5.4.1 检验申请单需包括标本来源，必要时说明感染类型和/或目标微生物。,new!,5.4.3 除通用要求外，微生物标本的采集及运送指南，还应包括以下内容： 不同部位标本的采集方法。如：明确说明并执行血培养标本采集的消毒技术、合适的标
13、本量。诊断成人不明原因发热、血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套，每套2瓶（需氧、厌氧各一瓶）。 合格的标本类型、送检次数、标本量。如：痰标本直接显微镜检查找结核杆菌或结核杆菌培养，应送检三份痰标本。最好至少连续3日，采集每日清晨第一口痰。 明确规定需要尽快运送的标本； 5.4.3除一般要求外，微生物标本的采集及运送指南，需特别注意以下内容： a) 不同部位标本的采集方法。如：明确说明并执行血培养标本采集的消毒技术、合适的标本量； b) 合格的标本类型、送检次数、标本量。如：粪便常规培养在未向专业人员咨询前，每位患者采集标本不多于2份； c) 需明确规定需要尽快运送的标本，以最大程度地减少延误并
14、尽快处理；,new!,5.5 检验程序,5.5.1 细菌培养和鉴定程序应满足如下要求： 所选择的涂片、染色技术、培养基应能从标本中分离、识别相应的病原菌；鉴定方法应符合要求（如：通过血清学、革兰染色、菌落形态、生长条件、代谢反应、生化和酶活性、抗菌药物耐药性谱等特性鉴定）；应有处理组织标本的能力。 应明确伤口标本培养程序，深部伤口感染应至少包括标本采集、需氧菌及厌氧菌的培养及鉴定。如果不具备厌氧培养条件，则应有程序表明，标本置合格的运送系统迅速送有条件的实验室。应有适当的方法检测苛养菌（如放线菌，快速生长的分枝杆菌等）。(少了一句：最好进行直接涂片革兰染色检查并报告结果。） 厌氧菌培养时间与标
15、本类型、诊断有关，在第一次培养评估之前应有足够的培养时间（至少48小时）。应有合适的液体培养基，有合适的鉴定方法（适用时）。,细菌抗菌药物敏感性试验程序应满足如下要求： (a)应制定常规药敏试验方法（纸片扩散法、琼脂稀释法、微量肉汤稀释法、E试验或其他）的操作程序（含各类病原体和/或标本的检测药物、质控标准、结果解释等）； (b)抗菌药物敏感性试验方法包括纸片扩散法、稀释法（琼脂稀释法、肉汤稀释法）、浓度梯度扩散法（E试验）或自动化仪器检测；实验室应提供与服务相适应的抗菌药物敏感性试验； (c)抗菌药物敏感性试验方法及结果判断至少应遵循上一年的标准。 抗菌药物敏感性试验方法包括纸片扩散法、稀释
16、法（琼脂稀释法、肉汤稀释法）、浓度梯度扩散法（E试验）或自动化仪器检测。实验室需遵循一定的准则，提供与服务相适应的抗菌药物敏感性试验，并能检测苯唑西林耐药葡萄球菌、万古霉素耐药肠球菌、碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌等。,new!,2012年新增指标,2012年卫生部明确要求,7种I类切口手术： 腹股沟疝修补术（包括补片修补术） 甲状腺疾病手术 乳腺疾病手术 关节镜检查手术 颈动脉内膜剥脱术 颅骨肿物切除术 经血管途径介入诊断手术 原则不使用抗菌药物！,2011年上级要求：7项指标,重症医学科41株金葡药敏情况（92.7MRSA）,急诊病房+急诊ICU40株金葡药敏情况(100%MRSA),儿科病房50株金葡药敏情况（8%MRSA）,33,CLSI 2012年药敏试验标准的更新点,34,CLSI 药敏标准 2012年1月,M100-S22 表格 (2012)* M02-A11 纸片扩散法(2012) M07-A9 MIC 法 (2012),* M100 每年更新一次 #
