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1、学校代号：1 0 7 3 1 学号：0 9 2 0 7 7 9 0 5 0 0 9 密级：公开 兰州理工大学硕士学位论文 归芪多糖的提取及药理学研究 l T h eE x t r a c t i o n o fG u i Q iP o l y s a c c h a r i d e a n dS t u d yo nP h a r m a c o l o g y b y L IY a n B E ( L a n z h o uU n i v e r s i t yo fT e c h n o l o g y ) 2 0 0 9 At h e s i ss u b m i t t e di np
2、 a r t i a ls a t i s f a c t i o no ft h e R e q u i r e m e n t sf o rt h ed e g r e eo f M a s t e ro fS c i e n c e M i c r o b i a la n dB i o c h e m i c a lP h a r m a c y i nt h e G r a d u a t eS c h o o l o f L a n z h o u U n i v e r s i t yo fT e c h n o l o g y S u p e r v i s o r P r o
3、 f e s s o rW A N G M i n g g a n g A s s o c i a t eP r o f e s s o rP U X i u y i n g M a y , 2 0 1 2 66jjjjI0岫mml 叭洲以川2洲Y 兰州理工大学学位论文原创性声明和使用授权说明 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其 他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个 人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果 由本人承担。 作者签名：
4、 b 、 孕否 日期：o 乜年g 月6 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学 校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文 被查阅和借阅。本人授权兰州理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容 编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇 编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到中 国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。 作者签名： 奎专 日期：幻2 年占月石日 剔醛轹锄I 师寤飙训州川日 硕，卜学伊沦文 曼I l l ! 一, I I ! I I II 毫!
5、 曼曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼皇曼皇曼曼曼曼曼曼鼍曼曼曼曼曼曼! 曼皇曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼! 曼曼曼曼曼曼曼曼 目录 摘要I A b s t r a c t 。Il I 第一章绪论一1 1 1 当归和黄芪简介一1 一 1 2 多糖的药理作用研究进展一2 一 1 2 1 抗氧化、抗衰老作用一2 1 2 2 抑菌消炎作用一2 1 2 3 免疫调节作用一2 1 2 4 抗肿瘤作用一3 1 2 5 抗病毒作用一4 1 2 6 保肝作用一5 一 1 2 7 降血糖作用一5 一 1 2 8 防治动脉粥样硬化作用一5 1 2 9 其它活性一5 1 3 本课题的研究内容、目的和意义一6 一 第2 章正交试验法优选
6、归芪多糖的提取工艺一7 2 1 实验材料一7 2 1 1 植物材料一7 2 1 2 药品与仪器一7 2 2 实验方法一8 2 2 1 归芪多糖提取工艺流程一8 2 2 2 归芪多糖的提取一9 2 2 3 多糖含量的测定方法一9 2 2 4 单因素试验选取归芪多糖提取工艺的最佳因素水平一9 2 2 5 正交试验优化归芪多糖提取工艺一1 1 2 3 结果与分析一1 2 2 3 1 葡萄糖标准曲线的绘制一1 2 2 3 2 归芪多糖提取工艺的正交试验结果一1 2 2 3 3 最佳工艺验证性试验一1 3 2 4 讨论一1 3 一 第3 章归芪多糖体外药理活性的研究一15 3 1 抗氧化活性的研究一1
7、5 3 1 1 实验材料一1 5 归茛彩糖I ，f 勺提取及药理学研究 3 。1 2 实验方法 3 1 3 结果与分析 3 1 4 讨论 3 2 抑菌活性的研究 3 2 1 实验材料 3 2 2 实验方法 3 2 3 结果与分析 3 2 4 讨论 3 3 抗肿瘤活性的研究 3 3 1 实验材料 3 3 2 实验方法 3 3 3 结果与分析 3 3 4 讨论 3 4 抗病毒活性的研究 3 4 1 实验材料 3 4 2 实验方法 3 4 3 结果与分析 3 4 4 讨论 第4 章归芪多糖体内药效学的研究 4 1 归芪多糖延缓机体衰老作用的研究 4 1 1 实验材料 4 1 2 实验方法 4 1 3
8、 结果与分析 4 1 4 讨论 4 2 归芪多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用 4 2 1 实验材料 4 2 2 实验方法 4 2 3 结果与分析 4 2 4 讨论 4 3 归芪多糖抑制实体瘤生长的研究 4 3 1 实验材料 4 3 2 实验方法 4 3 3 结果与分析 4 3 4 讨论 一1 5 一 一1 7 一 一1 9 一 一2 0 一 一2 0 一2 1 一 一2 2 一 一2 4 一 一2 5 一 一2 5 一 一2 6 一 一2 7 一 一2 9 一 一2 9 一 一2 9 一 一3 0 一 一3 1 一 一3 4 一 一3 6 一 一3 6 一 一3 6 一 一3 7 一 一3 7
9、一 一3 9 一 一4 0 一 4 0 一4 1 一 一4 l 一 一4 4 一 一4 5 一 一4 5 一 4 6 4 6 - 一4 7 硕士。学位沦文 曼曼置量曼曼曼曼曼皇曼鼍曼量曼曼蔓曼皇曼皇曼! 曼! 皇曼曼曼曼舅曼曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼鼍曼曼曼量曼曼皇曼曼曼曼曼鼍! 蔓曼曼曼皇曼曼曼曼|_I I 皇曼曼曼 结论与展望 参考文献 致谢 附录A ( 攻读硕士学位期间所发表的论文及成果) I I I 一4 9 一 一5 1 一 一5 6 一 一5 7 硕+ 。学伊沦文 摘要 当归和黄芪是 j 肃省最常见的两种道地药材。现代药理研究表明，当归通过 激活补体、增强免疫、刺激造血起到抗肿瘤、保肝利
10、胆、清除氧自由基和抗炎等 作用。黄芪具有强心降压、降血糖、抗应激、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药 理功效。多糖是类具有广泛生物活性的生物大分了物质，存在于近百种植物巾， 它作为一类高效低毒的新型药物成分，倍受关注，已成为医药界研究的热门领域。 本研究通过探索当归和黄芪巾复合多糖的提取工艺，制备出含量较高的归芪多糖， 并对其进行了体外药理活性( 包括抗氧化、抑菌、抗肿痛、抗病毒活性) 和体内 药效学( 延缓机体衰老，抑制体内实体瘤和保护小鼠急性肝损伤) 的研究，阐明 归芪多糖药理作用的机制。 以归芪多糖提取率为指标，通过单因素试验选取正交试验因素及水平，采用 正交试验确定了归芪多糖的最佳提取工艺
11、条件为提取温度9 0 ，提取时间为2 h ， 料液比为1 ：1 0 ，当归和黄芪的质量比为l ：5 。依此方法得到的归芪多糖提取率为 9 1 1 。 通过研究归芪多糖、当归多糖、黄芪多糖和维生素C ( V i t C ) 清除羟基自由基、 清除超氧阴离_ 了自由基的能力、还原力和抑制油脂过氧化的能力来评价其体外抗 氧化活性。结果提示，归芪多糖在体外具有较强的综合抗氧化能力，有些方面与 阳性对照V i t C 无显著性差异。 采用杯碟法和微量稀释法研究并比较了归芪多糖对6 种供试菌株( 大肠杆菌、 地衣芽孢杆菌、肺炎球菌、绿脓杆菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌) 的抑制作 用。结果表明：杯碟法与微
12、量稀释法测得归芪多糖对大肠杆菌、肺炎球菌、金黄 色葡萄球菌、地衣芽孢枯草杆菌的抑菌效果基本一致。 采用M T T 法，研究了不同浓度的归芪多糖在体外对人宫颈痛H e l a 细胞、人 肝癌H e p G 2 细胞和人肺腺癌A 5 4 9 细胞增殖的抑制作用。结果显示归芪多糖能不 同程度的抑制H e l a 、H e p G 2 和A 5 4 9 细胞的增殖，其抑制率呈现剂量依赖关系 ( 6 2 5 r t e d n m 1o o o r t g m L ) ，与细胞对照组差异显著。 以细胞存活率和病毒抑制率为指标，采用M T T 法，研究不同作用方式下归芪 多糖抑制人肠道病毒E V 7 1 增殖的作用、对E V 7 1 感染细胞后的阻断作用以及对 E V 7 1 直接灭活的作用。结果显示：归芪多糖对E V 7 1 感染细胞的阻断作用，即先 加入药物对病毒侵染的预防作用效果最好。 在体内延缓衰老实验中，归芪多糖可能通过降低
