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1、* 质粒小量提取试剂盒产品说明：本产品采用经典的硅胶膜及碱裂法技术，硅胶膜柱可以在高盐、低 pH 值情况下高效可逆的结合 DNA, 而蛋白及其它杂质不被结合而被除去,被结合的核酸在低盐、高 pH 值情况下可被洗脱出来.该试剂盒具有高效、快速、方便之特点，全套操作只需半个小时便可完成。使用本试剂盒可从 15 ml 的过夜培养的菌液中纯化得到 140g 的高纯度质粒 DNA(OD260/OD280 = 1.82.0)，此质粒 DNA 可直接用于 DNA 序列分析以及各种酶促反应等。试剂盒组成：产品编号试剂盒组成GS001-1 GS001-2 GS001-3纯化次数 50 次 100 次 200 次
2、RNaseA（10mg/ml） 150l 300l 600l溶液 15ml 30ml 60ml溶液 15ml 30ml 60ml溶液 20ml 40ml 80ml溶液 PB 30ml 50ml 100ml溶液 W 30ml 230ml 340ml溶液 Eluent 5ml 10ml 20mlDNA 纯化柱 50 个 100 个 200 个溶液 W 初次使用前用无水乙醇按 1：1.5 稀释，即含 60%乙醇。用途：提取用于酶切、转化、测序、PCR 等试验用质粒。保存：初次使用本试剂盒时，请将 RNase A 全部加入到溶液中，均匀混合后 4保存。溶液：室温保存，若出现沉淀，请于 37保温溶解，待
3、恢复至室温后使用。其他试剂：室温保存。操作步骤：1. 用 1.5 ml 离心管收集 1.5-5ml 菌液，12000rpm 离心 60 秒，弃上清。(应根据所培养的菌液的浓度确定收集的菌液量)2. 加入 250l 溶液/RNase A 混合液，漩涡振荡使菌液完全重新悬浮。 (菌液重新悬浮对于获得高产量是非常重要的,为使 RNA 被 RNase A 充分降解,让悬浮菌液静置 1-2 分钟3. 250l 溶液，温和反复颠倒混匀 4-10 次,室温放置 1-2 分钟,以获得澄清的裂解液。(不可剧烈混和,否则会使染色体 DNA 断裂.)4. 加入 350l 溶液，反复颠倒混匀 4-6 次, 12000
4、rpm 离心 10 分钟。5. 将上清置于 DNA 纯化柱中，静置 1-2 分钟。6. 12000rpm 离心 60 秒，弃虑液。 (注：此时 DNA 被吸附于 DNA 纯化柱中的硅胶膜上。)7. 加入 500l 溶液 PB,12000rpm 离心 60 秒，弃虑液。注：目的是将硅胶膜上吸附的蛋白、盐等杂质洗脱,得到高质量的 DNA。如果所需的 DNA 质量要求不是很高此步可以省去.8. 加入 500l 溶液 W,12000rpm 离心 60 秒，弃虑液。9. 可选做步骤:重复步骤 8,再用 500ul 溶液 W 洗涤柱子一次.1012000rpm 再次离心 60 秒，甩干剩余液体。主要是去除
5、残余酒精，以利于 DNA 溶解。11. 将 DNA 纯化柱置于新的离心管中，加入适量（50-100l）Eluent（60预热）室温放置 2 分钟12000rpm 离心 60 秒，管底即为质粒 DNA。注：溶液 Eluent 可用无菌双蒸水代替，但其 pH 需为 8.0-8.5,加入体积视质粒拷贝数多少、用户对质粒浓度要求而定。60预热，目的是提高产量，温度不需很准，5065均可。* DNA 凝胶回收试剂盒产品说明：本试剂盒所带 DNA 纯化柱，具有在高盐、低 pH 值情况下吸附 DNA, 低盐、高 pH 值情况下释放 DNA 的性质.该试剂盒能从各个等级的琼脂糖凝胶中很好的回收 50bp-40
6、kb 的 DNA 带,回收率高达 85%.目的 DNA 带从凝胶上切下来后，经特定的溶液 BD 处理，可将含目的带的琼脂糖溶解完全,然后转移到一个 DNA 回收纯化柱上，经过溶液 PE 快速的洗涤步骤后，DNA 便可用去离子水（或低盐缓冲液）洗脱出来，回收产物可用于PCR、连接、测序、限制性酶切等应用。该试剂盒还适用于 PCR 产物纯化、酶切产物回收及基因组 DNA 纯化。试剂盒组成：产品编号试剂盒组成GS002-1 GS002-2 GS002-3纯化次数 50 次 100 次 200 次溶液 BD 20ml 40ml 80ml溶液 PE 15ml 215ml 320ml溶液 Eluent 2
7、.5ml 5.0ml 10mlDNA 纯化柱 50 个 100 个 200 个溶液 PE 初次使用前用无水乙醇按 1：4 稀释，即含 80%乙醇。保存条件：室温保存大于 24 个月。产品特点：快速15min 内从凝胶中回收 DNA可靠最适宜的缓冲液系统保证了高纯度的 DNA安全无有机溶液抽提质量纯净的 DNA 适用于多种下游应用可以高效的回收小片段 DNA.操作步骤：1. 通过把切取含 DNA 片段的琼脂糖凝胶装在 1.5ml 小离心管中，称其重量近似地确定其体积，每 100mg琼脂糖凝胶相当于 100l 体积, 称量每次切取含 DNA 片段的琼脂糖凝胶加入等体积的溶液 BD。PCR 产物纯化
8、、酶切产物回收及基因组 DNA 则加入等体积的溶液 BD 混匀，进入步骤 3.2. 55-65水浴 7-10 分钟，直至胶完全融化，期间振荡 3 次，琼脂糖必须完全融化。如果体积大于 500l，可适当增加融胶时间，若此时溶液变红，可加 10l 3M NaAC (pH5.0)。3. 将溶液置于 DNA 纯化柱中，静置 2 分钟，12,000rpm 离心 60 秒，若一次加不完，可分两次离心,弃虑液。4. 加入 500 l 溶液 PE（初次使用前用无水乙醇按 1：4 稀释）于离心柱中 12,000rpm, 离心 60 秒，弃虑液.5. 用溶液 PE（初次使用前用无水乙醇按 1：4 稀释）500 l
9、 再洗一遍，12,000rpm 离心 60 秒。12,000rpm 再次离心 2 分钟，以甩干剩余液体。（注：此步对获得较好的 DNA 产量十分重要）6. 将离心柱置于新的离心管中，加入 60预热的溶液 Eluent 25-35l 于纯化柱中（硅胶膜中央），静置 2 分钟,12,000rpm 离心 60 秒，管底即为回收的 DNA。7. 将 DNA 贮存于-20。* PCR 产物及 DNA 片段纯化试剂盒产品说明： 本试剂盒所带 DNA 纯化柱，具有在高盐、低 pH 值情况下吸附 DNA, 低盐、高 pH 值情况下释放 DNA 的性质。该试剂盒能很好的回收 50bp-40kb 的 DNA 片段
10、, 回收率高达 85%. PCR 产物或酶切产物经特定的 BD 溶液处理，然后转移到一个 DNA 回收纯化柱上，经过离心吸附, 然后经溶液 PE 快速的洗涤步骤后，DNA 便可用去离子水（或低盐缓冲液）洗脱出来，回收产物可用于 PCR、连接、测序、限制性酶切等应用。该试剂盒可从PCR 扩增体系、酶切和其它水溶液体系中快速回收纯化 DNA,有效去除 PCR 反应体系中的 dNTPs、引物和聚合酶.该试剂盒可以高效的回收小片段 DNA（50bp、100bp）.该试剂盒还可以用于从琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段。试剂盒组成：产品编号试剂盒组成GS010-1GS010-2GS010-3纯化次数 50
11、次 100 次 200 次溶液 BD 20ml 40ml 80ml溶液 PE 15ml 215ml 320ml溶液 Eluent 2.5ml 5.0ml 10mlDNA 纯化柱 50 个 100 个 200 个说明书 1 1 1溶液 PE 初次使用前用无水乙醇按 1：4 稀释，即含 80%乙醇。保存条件：室温保存大于 24 个月。产品特点：快速10min 内从 PCR 产物中回收 DNA可靠最适宜的缓冲液系统保证了高纯度的 DNA安全无有机溶液抽提质量纯净的 DNA 适用于多种下游应用可以高效的回收小片段 DNA（50bp）.注意事项：1. 溶液 PE 初次使用前请用无水乙醇按 1：4 稀释，
12、即含 80%乙醇。2. 溶液 Eluent (10 mM Tris/HCl , pH8.5)可用无菌双蒸水代替，但其 pH 需为 8.0-8.5,加入体积视回收DNA 量的多少及用户对浓度要求而定。60预热，目的是提高产量，温度不需很准，50-65均可。 操作步骤：1. 确定 PCR 反应产物体积，将 PCR 产物转移至一个 1.5ml 离心管中，加入等体积的 BD 溶液, 旋涡混匀, 然后进入步骤 2.(如果用于从琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段则先进行步骤 a 和步骤 b 再进入步骤 2)a. 通过把切取含 DNA 片段的琼脂糖凝胶装在 1.5ml 小离心管中，称其重量近似地确定其体积，每
13、100mg 琼脂糖凝胶相当于 100l 体积, 称量每次切取含 DNA 片段的琼脂糖凝胶加入等体积的溶液 BD。b. 55-65水浴 7-10 分钟，直至胶完全融化，期间振荡 3 次，琼脂糖必须完全融化。如果体积大于 500l，可适当增加融胶时间，若此时溶液变红，可加 10l 3M NaAC (pH5.0)。3. 将溶液置于 DNA 纯化柱中，静置 2 分钟，12,000rpm 离心 60 秒.4. 加入 500 l 溶液 PE（初次使用前用无水乙醇按 1：4 稀释）于离心柱中 12,000rpm, 离心 60 秒，弃虑液.5. 用溶液 PE（初次使用前用无水乙醇按 1：4 稀释）500 l
14、再洗一遍，12,000rpm 离心 60 秒。6. 12,000rpm 再次离心 2 分钟，以甩干剩余液体。（注：此步对获得较好的 DNA 产量十分重要）7. 将离心柱置于一新的离心管中，加入 60预热的 30-100l 溶液 Eluent 于纯化柱中（硅胶膜中央），静置 2 分钟，12,000rpm 离心 60 秒，管底即为回收的 DNA。8. 将 DNA 贮存于-20。 效果图* Gzol Reagent(RNA 提取试剂) CatNo. GS004-1 50ml;CatNo. GS004-2 100ml产品说明TRIzol 是目前最常用的 RNA 提取试剂.采用异硫氰酸胍一步法提取总 R
15、NA 原理，在短时间内提取高质量的总RNA。方便从人、动物、植物和细菌组织提取总 RNA，可同时处理大量样本，提取的 RNA 没有 DNA 和蛋白的污染，可用于 RT-PCR、Northern Blot、Dot blot、Nuclease protection assays、cDNA 合成等下游应用。保存室温下可稳定保存 1 年，为保证试剂质量，建议保存在 2-8的环境下。实验所需试剂但未提供的物品 氯仿 异丙醇 75%乙醇(用 DEPC 处理过的水配制) 无 RNA 酶的水或 0.5% SDS 溶液调配无 RNA 酶的水，将水加入无 RNA 酶的玻璃瓶中，加入 DEPC 至 0.1% (v/
16、v)。放置过夜并高压灭菌。SDS 溶液必须用 DEPC 处理过并经高压灭菌的水配制。预防 RNA 酶污染：在抽提 RNA 过程中任一环节的不正确操作都可能导致 RNA 酶的污染。由于 RNA 酶的活性很难完全抑制，预防其污染是十分必要的。在实际的操作中应遵循以下指南：* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染 RNA 的抽提并成为 RNA 酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。 * 使用灭菌的，一次性的塑料器皿和自动吸管抽提 RNA，避免使用公共仪器所导致的 RNA 酶交叉污染。例如，使用 RNA 探针的实验室可能用 RNA 酶 A 或 T1 来降低滤纸上的背景，因而某些非一次性的物品
