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1、湖北中医药大学 硕士学位论文 茯苓免疫功能性成分研究与质量分析 姓名：徐斌 申请学位级别：硕士 专业：中药学 指导教师：刘焱文 20100519 茯苓免疫功能性成分研究与质量分析 中文摘要 茯苓为多孔菌科真菌茯苓乃，砌C O C O S ( S c h w ) W o l f 的干燥菌核， 寄生于松科植物赤松或马尾松根茎，埋于土壤下2 0 - 3 0 厘米繁衍而成。茯 苓为传统药食两用中药，神农本草经将其列为上品，收载于历版中国 药典。茯苓具有渗湿利尿、和胃健脾、宁心安神的功效；现代药理学研 究表明，茯苓有抗肿瘤、调节免疫功能、抗炎、抗过敏等方面的生物活性。 其主要活性成分为茯苓多糖和三萜类化
2、合物。 为了进一步诠释茯苓免疫调节功能物质基础和建立该药材与国际接 轨的质量评价体系，本论文在前期研究的基础上，对其进行了调节免疫功 能活性成分及质量分析研究。 本实验室前期利用溶剂萃取法将茯苓药材提取物分离成为不同物质 部位，药理实验表明，正丁醇萃取物质部位具有显著调节免疫功能活性。 本论文采用大孔树脂纯化技术，将正丁醇萃取物质部位分离为6 个组分， 从中筛选出4 个免疫调节功能活性组分；采用现代色谱分离技术，从上述 4 个活性组分中分离得到12 个单体成分；通过现代波谱分析方法，鉴定 了其中9 个化合物，分别为( 1 ) 2 - N - 乙酰氨基- O - 葡萄糖 ( N A c e t
3、y l - D g l u c o s a m i n e ) ，( 2 ) L 一脲苷( L - U r i d i n e ) ，( 3 ) D 一吡喃木糖( D - X y l o p y r a n o s e ) ，( 4 ) 6 - 0 一O 【一D 一吡喃甘露糖一D 一葡糖糖( 6 - 0 一O 【D M a n n o p y r a n o s y l D G l u c o s e ) ，( 8 ) 3D ，I 51 3 1 ，I60 【一三羟基一羊毛甾 一7 ，9 ( 1I ) ，2 4 ( 3 1 ) 一三烯一2 1 一酸( 1 5 c 【- h y d r o x y
4、 d e h y d r o t u m u l o s i ca c i d ) ，( 9 ) 3 p 一乙酰氧基- 16O 【一羟基一羊毛甾一8 ，2 4 ( 3 1 ) 一二烯一2 卜酸( P a c h y m i ca c i d ) ， ( 10 ) 3p 一乙酰氧基- 160 【一羟基一羊毛甾- 7 ，9 ( 1 1 ) ，2 4 ( 3 1 ) 一三烯- 2 1 - 酸 ( D e h y d r o p a c h y m i ca c i d ) ，( 11 ) 3B ，1 60 c 一二羟基一羊毛甾一8 ，2 4 ( 3 1 ) 一二烯 - 2 1 - 酸( T u m
5、u l o s i ca c i d ) ，( 12 ) 3D 一羟基羊毛甾- 8 ，2 4 - 二烯- 2 1 - 酸( 3B h y d r o x y L a n o s t a 8 ，2 4 d i e n e 21 o i c a c i d ) 等；药理筛选结果表明，化合物 ( 1 ) 、( 4 ) 等具有免疫增强的生物活性，化合物( 5 ) 、( 6 ) 、( 10 ) 等具有 免疫抑制的生物活性，而化合物( 8 ) ( 9 ) ( 11 ) 和( 12 ) 则表现出免疫双 向调节作用。这对于诠释茯苓的药效物质基础具有重要意义。 湖北中医药大学2 0 10 届硕士学位论丈 采用现
6、代分析方法，建立了茯苓药材规范化的H P L C - E L S D 指纹图谱， 测定了20 批不同产地茯苓药材的图谱，标定了18 个共有峰，对其中10 个指纹峰进行了归属。参照中药指纹图谱评价系统对不同产地茯苓药材进 行了分析，依据相似度大小，将各样品进行了分类，指出了有较大差异的 离散样品，表明该指纹图谱能有效地控制茯苓药材的质量。 采用紫外分光光度法( u V ) 和高效液相色谱法( H P L C ) ，以茯苓多糖、 茯苓酸和总三萜含量为评价指标，对茯苓药材进行了有效物质含量分析研 究；同时以药材色泽、致密度、水分、灰分等理化指标对其质量进行比较， 综合分析结果表明，安徽岳西和霍山，湖
7、北罗田和英山，以及湖南靖州产 茯苓质量较优。 主题词：茯苓；调节免疫功能；化学成分；指纹图谱；含量测定； 茯苓免疫功能性成分研究与质量分析 S t u d yo n im m u n ef u n c tio n aI c o m p o sit io n sa n dq u aIit ya n aIy siSo f S p e cia I it y ：t r a ditio n alO hin e s em e diCiR e A u r t h o r ：X uBin T u t o r tP o r f L iUY a n w e n A b s tr a c t s P o riaC
8、O C O SiSt h ea ridS Cle r o t eo fp o r i aC O C O S ( S c h w ) W o1f w h i c hiSak i n do fm y c e t e sb e l o n g i n gt oP o l y p O r a c e a e Itp a r a siti C S a n dm u lti P li e so nP i n a c e a eP i n eo rP i n er o o t St h a tb u r i e du n d e r 20 - 3 0c mo f S O il P o riaise dib
9、lea n dm e diCin a b lef o rt t a d itio n a1 m e diCi n eC h i n e s em e diCi n e ，a n ditiSa d m itt e dine a c hv e r sio no f C h i n e s eP h a r m a c o p e i a ，S h e n g n o n g Sh e r b a lr e g a r d e di ta sh i g hg r a d e m e diCin e P o riac o c o sc a ne x c r e t ed a m p n e sS ，b
10、 eu s e da sdiu r e tiCt o a 11 e v i a t ed r o p s y ，i n v i g o r a t es p l e e na n dc a l mt h en e r v e s ；M o d e r n p h a r m a c o l o g yS t u d i e sh a v es h o w nt h a tP o r i ah a sa n ti t u m o r ，r e g u l a t e i m m u n ef u n c ti o n ，a n ti i n f I a m m a t o r y ，a n t
11、卜a 11 e r g ya n do t h e ra s p e c t s o fb io - a c ti vit y T h em ainbio lo gic a1lya c tiv ec o m p o n e n tSo fP o ria C O C O Sa r ep o l y s a c c h a r i d e s ，t r it e r p e n o i d s I no r d e rt of u rt h e rin t e r p r e tt h em at e ria1b a siSo fi m m u n e f u n c tio na n dt h
12、ee st a b1 is h o ft h em e diCin eq u a1it ye v a1u a tiO i l s y st e mw i t hin t e r n a tio n alst a n d a r d so fP o ria ，b as e do np r e1i m in ar y S t u d i e s ，t h iSp a p e rc a r r i e do u tt h eS t u d yo ft h ei m m u n ef u n c ti o n r e g u latin ga ctiv e in g r e die n tSa n d
13、q u a1 it ya n al y siS O u r 1 a b o r a t o r ys e p a r a t e d P o ri ae x t r a c ts u b st a n c e si n t o d i f f e r e n tp a r t S p h a r m a c 0 1 0 9 i c a le x p e r i m e n t Ss h o wt h a tt h ep a r t S o fb u t a n o le x tr a c th a v esig nific a n ta c tiv it yinr e g u1a ti n g
14、i m m u n e I I I 湖北中医药大学2 0 1 0 届硕士学位论丈 f u n ctio n I nt hiS p a p e r ，P o ria - b u t a n o l p a r tw asdivid e di n t oSiX c o m p o n e n t Sb yU Si n gt h es o l v e n ta n dc h e m i c a lm e t h o d ，a n df o u ra c ti v e c o m p o n e n t Sw e r es e l e c t e d U si n gav a ri e t yo fm
15、 o d e r nc h r o m a t o g r a p h i c t e c h n i q u e ，1 2c o m p o u n d sw e r e is o l a t e df r o mt h ea b o v ef o u r ，t h e Str u c t u r eo f i n sid ew e r ei d e n tifie dr e s p e c ti v el yW it hN M R ，M Sa n d o t h e rs p e c t r o s c o p i Cm e t h o d s T h e ya r e ( 1 ) 2 -
16、 N a c e t a m i d o D g l u c o s e ； ( 2 ) L U ri d i n e ；( 3 ) D X y l o p y r a n o s e ；( 4 ) 6 - 0 一o 【一D M a n n o p y r a n o s y l 一 D - G l u c o s e ；( 8 ) 3D ，15o 【，16o 【一tri h y d r o x y L a n e st a 一7 ，9 ( 11 ) ， 2 4 ( 3 1 ) 一trie n 一2 1 一Oic - a ci d ；( 9 ) 3D a c e t y l o x y 一160 【一h y d r o x y L a n e s t a 一8 ，2 4 ( 3 1 ) - d i e n 一2 1 一o i c - a c i d ；( 1 0 ) 3D O - a c e t y l 一1 6O 【L a n e s t a - 7 ，9 ( 11 ) ，2 4 (
