猪伪狂犬病实验室检测与控制净化常见问题

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1、80 实践Practice 2011年以来,猪伪狂犬病再次在国内暴发 流行,导致多数猪场损失惨重,成为继“猪无 名高热病(蓝耳病)”和“仔猪流行性腹泻” 之后又一个对养猪业影响较大的疾病。笔者通 过对所在实验室猪伪狂犬病原、抗体检测分 析,并结合临床诊断情况,发现目前猪群伪狂 犬野毒感染率仍呈不断上升趋势,临床发病症 状有所缓和,亚临床感染较多,防控形势依然 严峻。本文就猪场在伪狂犬病检测与防控净化 过程中常见问题简要总结如下,供读者参考。 1 猪伪狂犬病常用的实验室检测方法 猪伪狂犬病实验室检测方法包括血清学检 测和病原学检测,实际工作中,目前最常用的 检测方法包括以下三种。 1.1 gE抗

2、体鉴别诊断方法 由于目前绝大部分猪场使用伪狂犬gE基因 缺失疫苗,采用gE-ELISA方法可以对该病进 行鉴别诊断。对于gE抗体阳性猪,可能为感染 发病猪、感染康复猪或健康仔猪(母源抗体) 三种情况。对于gE抗体阴性猪,可能为健康猪 或刚刚感染野毒抗体尚未转阳的猪。 伪狂犬野毒的情况下,gB抗体检测意义有限。 1.3 PCR病原检测 对于感染带毒猪,脑、肾、扁桃体等组织 PCR(gE片段)检出率相对较高。对于PCR检 测为阴性的猪,可能为健康猪或组织病料含毒 量低、检测方法不敏感等情况。 2 近几年猪伪狂犬病感染情况的血清学 调查 笔者统计了实验室最近10年gE抗体检测 (IDEXX试剂盒)数

3、据,从图1可以看出, 2005-2010年,猪群伪狂犬野毒感染率整体 呈下降趋势,许多猪场已经达到了免疫无感 染状态。2011年之后,随着伪狂犬新毒株在 国内猪群中暴发流行,gE抗体阳性率明显升 高。在2015年上半年的检测中,血清阳性率 为62.8%(1786/2844),猪场阳性率为93% (160/172)。基于当前猪伪狂犬病的感染情 况,目前开展猪伪狂犬病净化工作,与2011年 之前相比,挑战和难度更大。 3 猪伪狂犬病控制与净化常见问题 一些生产管理水平较高的阳性猪场,通 过使用高效价的疫苗,强化免疫,不断补充阴 性后备种猪,完善生物安全体系等综合防控措 施,生产成绩比较稳定,检测统

4、计约3%的阳性 猪场可以扩繁出完全阴性的育肥猪。如图2,对 河南洛阳一家生产管理较好的猪场进行gE抗体 检测,发现仔猪gE抗体(母源抗体)阳性率随 着日龄的增加呈下降趋势,到育肥阶段,gE抗 体全部为阴性,取得了较好的防控效果。 同时,根据笔者临床观察,与图2检测结果 相比,目前大多数猪场伪狂犬控制与净化进展 目前猪群伪狂犬野毒感染率仍呈不断上升趋势,临床发病症状有 所缓和,亚临床感染较多,伪狂犬防控形势依然严峻。 文解伟涛 梁跃 乔松林 郭成留 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 猪伪狂犬病实验室检测与控制净化常见问题 图1 本实验室伪狂犬gE抗体历年 (2005.1-2015.6)检测情

5、况 1.2 gB抗体检测方法 gB抗体为保护性抗体,因无法区分其疫苗 毒和野毒,且不能确定gB抗体水平高低与免疫时 机、临床发病之间的关系,在目前猪群普遍感染 防控 81 PIGS TODAY September 2015 野毒感染的现象。 3.4 操作执行不到位 据 笔 者 观 察 , 多 数猪场还做不到一头猪 换一个针头,一部分猪 场也仅仅做到种猪群一 头猪一针头。针头大小 不合适、打飞针、漏防 等现象时有发生,个别 猪场母猪群颈部脓肿比 例达30%以上。部分猪 场育肥猪(或待售后备 猪)压栏饲养超过200日 龄而未及时进行免疫调 整。全进全出、空舍消 毒、拉猪车辆消毒等生 物安全措施执行

6、不到位 等情况大量存在。 3.5 其他方面漏洞 猪场存在饲养管理 水平落后、饲料霉变严 重、猪群密度大、生物 安全条件差和蓝耳病等 免疫抑制性疾病活跃等 不利因素。 4 小结 随着伪狂犬新毒株在国内猪群中广泛流 行,可以预见在未来几年内,该病是影响我国 生猪产业健康发展的最重要疫病之一。欧美许 多养猪发达国家已经完成了伪狂犬的净化工 作,如果我们继续采取免疫控制而不净化的策 略,不排除数年之后会出现“伪狂犬超强毒” 的情况。我国政府在制定的国家中长期动物 疫病防治规划(2012-2020年)中,明确要求 原种猪场在2015年底达到伪狂犬净化标准,所 有种猪场到2020年底达到净化标准。相信通过

7、 全国上下共同努力,科学规划,正确部署,一 定可以取得较好的净化效果。 基金项目:国家生猪产业技术体系(CARS-36);河南 省生猪产业技术体系创新团队(S2012-06) 图4 某场不同阶段猪群gE抗体阳性率 图5 某场不同阶段猪群gE抗体阳性率 图3 某场不同阶段猪群gE抗体阳性率 图2 某场不同阶段猪群gE抗体阳性率 不太理想,主要原因如下。 3.1 免疫次数不够 在2011年之前,猪场一般采取种猪群跟胎 免疫(产前30天)或者每年普防23次,仔猪 5080日龄只免疫1次,在当时可以较好的防控 伪狂犬。在2011年之后,原来的防控策略已经 不能防控伪狂犬新毒株感染,需要加大免疫频 率,

8、维持猪群较高的中和抗体水平,才能取得 理想的防控效果。根据笔者临床观察统计,对 于伪狂犬阳性猪场,建议使用高效价疫苗,种 猪群每年普防4次,仔猪除出生滴鼻外,在保育 阶段和育成前期分别注射免疫。两针免疫可以 显著减少育肥猪临床症状的发生,但病毒容易 在育肥中大猪阶段活跃,主要表现为亚临床感 染,gE抗体阳性率升高(图3),易继发传染性 胸膜肺炎、链球菌病等细菌病。建议猪场考虑 在育肥中期(100130日龄)进行第3针免疫注 射,这样更有利于开展伪狂犬净化工作。 3.2 疫苗效价偏低 针对伪狂犬新毒株,现有疫苗保护力下 降,需要使用高效价的疫苗强化免疫,提高中 和抗体水平,才能降低感染风险,减少

9、猪群排 毒。对于伪狂犬阳性场,如果全群使用普通疫 苗,血清学检测多表现为猪群gE抗体阳性率居 高不下(图4),仔猪除典型神经症状外,猪副 嗜血杆菌、顽固性黄痢、呼吸道症状等问题相 对突出。部分猪场为了节约成本,种猪群使用 高效疫苗,而仔猪使用普通疫苗,在保育中后 期或育成前期容易出现临床发病,gE抗体阳性 率升高现象(图5)。 3.3 阴性后备种猪转阳 对于伪狂犬阳性猪场,通过不断补充阴 性后备种猪,逐步淘汰阳性种猪(自然淘汰和 检测淘汰相结合),理论上通过23年可完成 伪狂犬的净化工作。现实情况是部分猪场在引 种(或自留)时没有提前检测,补充的就是阳 性带毒后备种猪。一些猪场由于免疫程序不合 理,在引入阴性后备种猪后又感染野毒,抗体 转阳,例如,个别猪场在后备猪进场后未进行有 效隔离和及时免疫接种而感染野毒。或者存在大 日龄后备母猪(250日龄以上)在配种前和配种 后伪狂犬免疫衔接不好,导致疫苗接种间隔时间 过长(超过4个月),从而出现免疫空档,造成

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