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1、苯酚对日本沼虾的急性毒性 王维 娜 王安 利 马向 民 周可 新 王 宏 伟 ( 河北大学生物学系. 河北保定 0 7 1 0 0 2 ) 摘 共研究了笨酚对日 本沼虾的急性致毒作用。 实验结果表明苯酚对日 本沼虾的2 4 小时L C . 为3 0 . 5 m g / L 。当苯酚浓度大于1 5 m g / L时， 上升， 碱性礴酸醉、 总蛋白和葡萄糖含量下降 对其血浆生化影响明显， 血浆酸性礴酸醉含量显著 关触词日 本沼虾笨酚酸性磷酸醉喊性碑酸醉总蛋白 葡萄抢 日 本沼虾 ( M a c r o b r a c h i u m n i p p o n e n s i s ) 又名青虾， 是我
2、国主要的淡水经济虾， 也是华北 地区白洋淀中的主要经济虾。 它食性杂、 繁殖力强、 分布域广、肉味 鲜美。 可是由 于工业和 生活废水的污染， 尤其是有机物污染， 已使白 洋淀水质恶 化， 影响到日 本沼虾的生长繁殖。 苯 酚是一种常见的有机污染物，广泛存在于石油、 化工、 机械加工及印 刷行业中， 属于常见毒 物。在现有文献中研究酚对动物毒性影响以鱼类居多 ( 王国平， 1 9 9 5 ; 姜礼播， 1 9 8 5 ; A j i t , 1 9 8 6 ) ， 但对日 本沼虾的影响未见报道。 本文选用了苯酚作为污染物对白洋淀日 本沼虾进行急 性毒性试验，探讨了日 本沼虾受苯酚污染后所引起的
3、血浆生理生化变化。 1 材料和方法 1 . 1 生物材料 实验用虾于1 9 9 6 年5 月2 0日 取自 河北省白 洋淀， 先在水族箱内 驯养5 夭，然后选出无 病伤的睦壮个体 ( 体长5 . 5 - 5 . 8 c m， 体重4 . 2 - 4 . 6 g ) 进行实验。 1 2 实验条件 ( 1 )容器为直径3 0 0 m m的聚乙烯塑料盆，内盛实验溶液1 O O O m l 供实验用。 ( 2 )实验水温为2 8 士1 C , 1 3 实验方法 1 . 3 . 1 急性致毒实验 实验过程按目 前国内外通用的鱼类急性致毒实验方法进行 ( 王德铭， 1 9 8 1 ) 。 对毒物先分 别进
4、行预实验找出致死浓度范围，然后按等对数间隔设置6 个浓度组。苯酚的浓度分别为 1 5 . 0 , 1 8 . 2 , 2 2 . 1 , 2 6 . 9 , 3 2 . 1 和4 0 . O m g / L ， 另 设一空白 对照组。 每个浓度放虾2 0 尾， 隔 2 小时充气一次 ( 约3 0 分钟) ， 6 小时更换一次实验液。 连续观察受试虾的中毒表现和死亡情 况， 并将所得的数据按直线内插法求出2 4 小时半致死浓度 ( L C s o ) , 所用药品苯酚为分析纯。 1 . 3 . 2 日 本沼虾血浆生化指标的测定 2 4 小时后将空白及受毒各组实验虾分别取6 只， 以。 . 2 5
5、 % 半胧氨酸为抗凝剂， 心脏取血 离心 ( 3 0 0 r / m i n , 5 m i n ) 取其血浆， 用G F - 2 3 4 C型自 动生化超微量分析仪进行生化指标测定 ( 山东高密分析仪器厂) 。 血浆酸性磷酸酶用磷酸察香草酚法测定;血浆碱性磷酸酶用 7 4 4 K i n g 金氏法测定; 血浆蛋白质用双缩脉法测定; 血浆葡萄搪用葡萄塘氧化 法测定 ( 韩明 伦，1 9 8 9 ) , 2 实验结果 2 . 1 苯酚对日 本沼虾的怠性毒性 预实验结 果表明: 在1 0 0 m g / L 实验 液中 虾在4 0 分钟内 全 部死亡， 5 0 m g / L 时1 . 5 小
6、时内 全部死亡， 4 0 m g / L 时1 8 小 时内 全部 死亡。 寻找2 4 小时 半致死浓度时 共设置了7 个浓 度， 结 果 见 表1 。 根 据 表1 的 结 果 算 出 苯 酚 对日 本 沼 虾2 4 小 时 半 致 死 浓 度L C ,。 为3 0 . 5 m g / L . 表 1 苯肠对日 本沼虾的念性致介实验结果 一一 一 种 种 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， 实毅组 123 4 5 6 7 一 苯阶浓度C ( m g / L ) I g C( 对欲浓度) 2 4 小时死亡数 ( 尾) 2 . 2 苯酚对日 本沼虾血桨中生化指标的影响 实验2 4 小时后
7、测定各组沼虾血浆中 酸性磷酸酶、 碱 性磷酸酶、 总蛋白、 葡萄搪含量， 结 果列于表2 。 从表2 中可以看出，日 本沼虾受苯酚作用2 4 小时后血浆中酸性磷酸酶活 性比 空 白组高 ( P 0 . 0 5 ) ， 而碱性磷酸酶活性降低 ( P 0 . 0 5 ) 1蛋白质和葡萄铸含量减少 ( P 0 . 0 5 ) . p H值降低。 襄 2 项目 日本沼虾受苹盼污染后血桨中一些物质变化 笨肠含t ( m g / L ) 酸 性磷酸 醉活 性 ( U / 1 . ) 喊 性瞬酸 醉活 性 ( 金氏单 位) 蛋白质 ( g / L ) 有萄精 ( g / L ) 3 . 0 1 士0 . 1
8、 2 1 . 8 3 士0 . 0 2 5 . 4 3 土0 . 2 3 0 . 8 4 士0 . 1 4 3 6 . 5 2 士5 . 0 7 0 . 1 4 士0 . 0 2 5 . 0 9 土0 . 3 7 0 . 7 6 士0 . 1 2 3 0 . 0 5 土3 . 0 4 0 . 1 2 士0 . 0 1 6 . 0 2 士 1 . 2 8 0 . 7 5 士0 . 1 8 6 2 . 1 6 士2 . 8 ! 0 . 9 3 士0 . 0 2 3 5 . 8 5 士0 . 3 4 0 . 1 1 士0 . 0 0 5 . 9 6 士0 . 8 5 0 . 5 8 士0 . 1 1
9、 3 6 . 3 6 士0 . 8 5 0 . 1 3 士0 . 0 0 P H 8 . 0 0 6 . 8 0 6 . 8 0 6 . 6 0 6 . 6 0 3 讨论 实验表明笨酚对日 本沼虾的毒性是明 显的， 2 4 小时半致死浓度为3 0 . 5 0 m g / L ， 日 本沼虾 比白链的忍耐力稍高。白维2 4 小时L C 、 为2 7 . 2 4 m g / L 姜礼烩， 1 9 8 5 ) , 苯酚对日 本沼虾的 毒性使其血浆酸性磷酸酶活性升高， 碱性磷酸酶活性降 低. 这与O m k a r ( 1 9 8 5 ) 关于敌敌畏 对淡水虾M a c r o c h i u m l
10、 a m a a r r e i 毒 性实验结果一致. 酸 性磷酸酶属于 溶酶体酶， 细胞死亡后， 溶酶体酶使细胞自 溶 ( D e D u v e e t a l . , 1 9 5 5 ) , 当细胞部分开始死亡时， 溶酶体活性增加 ( N o v i k o f f , 1 9 6 1 ) 。 受苯酚污染后日 本沼虾血浆酸 性磷酸酶活性增加。可能是由 于苯酚是细胞原浆毒物， 对各种细胞有直接损坏作用， 使较多 的酸性磷酸酶从损伤或坏死的组织中 释放出来， 从而使其在血浆中的含量增加活性也随之升 高。由于苯酚的作用使日 本沼虾血浆的p H值由8 . 0 降至6 . 8 -6 . 6 。 血
11、浆偏酸抑制碱性磷酸 酶的活性。碱性磷酸酶作为生物体内一种重要的代谢调控酶不仅参与钙与磷代谢， 维持体内 7 4 5 适宜的钙磷比 例， 还参与蛋白质的合成 ( 石安静等， 1 9 8 6 ) . 很明显碱性磷酸酶活 性的改变影 响到动物体各个方面。 苯酚有很强的亲电子基团 ( - O H ) 进攻酶的活性位点而阻断它的作用， 因 而受苯酚作用后日 本沼虾血浆碱性磷酸酶活性降低，影响蛋白质合成，使血浆蛋白质总含 量降低。 由于苯酚影响日 本沼虾血浆酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的活 性， 从而改变了日 本沼虾碳水 化合物的 代 谢 ( O m k a r e t a l . , 1 9 8 5 ) ,
12、实 验中 受 苯酚影响日 本沼 虾血浆菊 萄精含IR 显著降 低 正说明了这一点。 奋考文献 王国平 1 9 9 5 苯姗的毒性对鱼类生理指标的形响. 内陆水产 ( ”: 2 4 . 王娜铭1 9 8 1 中国大百科全书 ( 环境科学版). 北京:中国大百科全书出版社. 3 3 4 . 石安份等 1 9 8 6 背角无齿蚌外套成的组织化学研究. 动物学杂志 ( 4 ) e 1 -3 . 姜礼活 1 9 8 5 在不同水怪条件下姗对鱼类毒性影响的初步探讨. 水产学报 ，( 3 ) , 2 2 3 -2 3 0 . 韩明伦 1 9 8 9 临床生化超徽t A c a d e mic P r e s
13、 s . 4 2 3 . O m k a r a n d G . 5 . S h u k a 1 9 8 5 D ic h l o rvo s i n t o x i c a t i o n i n a f r e s h w a t e r p r a w n Ma c r o b r a c h i v m l a s , a r r e r . E c a o z ; c . E n v i r o n . S . 介r y ， :3 9 2 2 9 6 外 文 摘 要 ( A b s t r a c t ) T HE T OXI C E F F E C T S OF MA C R O
14、B R A C HI UM PHENOL ON S HRI M P WA N G We i- N a WA N G A n - L i M A X ia n g - Min Z H O U K e - X i n WA N G H a n g - We i ( D e p a r t - o f B i o l o g y . He b e r U s i v r r s i r y , B u n d m g 0 7 1 0 0 2 . C h i n a ) Th e s t u d i e d . a c u t e t o x i c i t y o f p h e n o lon a
15、f r e s h w a t e r s h r i mp Ma c r o b r a c h i u m n i p p o n e n s i s T h e r e s u l t s i n d i c a t e d t h a t w h i l e t h e 2 4 h L c s o o f p h e n o l f o r t h e s h r i m pw asw as3 0 . 5 m g / L, p h e n o l ma d e a n o t a b l e i mp a c t a t t h e t y i n c r e a s e d ， a
16、n d t h e a l k a l i n e p h o s p h a t a s e a n d g l u c o s e d e c r e a s e d . a s p e c t o f b i o c h e m i s t r y . A c i d p h o s p h a t a s e a c t i v i - a c t i v i t y d e c r e a s e d . T h e c o n t e n t o f s e r u m p r o t e i n K e y w o r d s Ma c r o b r a c h i u m n i p p o n e n s i s , P h e n o l , A c i d p h o s p h a t a s e , A l k a l i n e p h o s p h a t a s e , P r o t e i n , G l u c o s e 7 4 6
