生物饵料培养doc资料

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1、绪论一.饵料(food,food for fisheries):为诱食性的食物,专指鱼、虾、贝等水产动物的食物。如:鲜活的称为饵料,配合的可称为饲料或饵料 。二.生物饵料(food organisms) :经过筛选的优质饵料生物。能进行人工大量培养后,以活体作为养殖对象食用的专门饵料。或说作为水产经济动物苗种饵料的饵料生物。 三.饵料三个类型微生物饵料:光合细菌和海洋酵母;植物性生物饵料:微藻类; 动物性生物饵料:主要有轮虫、卤虫、双壳贝类的卵和幼虫、枝角类、桡足类、颤蚓、沙蚕等。四.应用情况主要为鱼、甲壳类的虾蟹、贝、海参、海胆等饵料。a、鱼类育苗:目前离不开活饵料。 微藻、双壳贝类的卵和幼

2、虫、轮虫、卤虫、枝角类、桡足类;b、甲壳类:在早期利用微藻,后期利用卤虫幼体; 大多利用人工配合饲料替代;c、贝类:利用微藻中的金藻类和硅藻类;d、海参、海胆:主要利用底栖硅藻类。五.生物饵料筛选的原则 基本原则:环境适应性和抗逆性强;培养的食物来源广;生活史短;生殖力强(具“暴发式”增殖);可高密度培养。 营养物质丰富:不含有毒物质,具有含量高的蛋白质、不饱和脂肪酸、维生素和矿物质; 大小适口:作为开口饵料(几十几um ); 便于摄食:悬浮于水中或运动能力较弱、均匀分布,适于幼体摄食; 嗜食性和易于消化 :幼体均喜食,且易消化吸收。 营养能级低:食物链短,培养成本低。 第一章一.光合细菌(P

3、hoto synthetic bacteria,简写 PSB)是一类光合色素为菌绿素,自养性营养,在厌氧下光合不产氧的原始光能合成体系的原核生物。二.水产养殖上的应用1、净化养殖水质:可利用有机物、硫化物、氨氮;拌泥沙撒于池底,可减少换水量30%。用量1-2ml/m3。2、作为饲料添加剂:蛋白质高及氨基酸齐全,VB 种类和数量多,活性辅酶Q丰富;3、用于培育鱼、虾、贝类幼体:作为饵料,可提高培养幼体的生长率、成活率和变态率,减少换水量;4、用于培养动物性生物饵料:以藻菌混合投喂可节约微藻数量;5、防治鱼病:辅酶Q是具有消炎作用的抗病因子,对致病菌有一定的抑制作用。已发现鲤鱼烂鳃病和瞎眼病、鳗鱼

4、水霉和赤鳍病、黑鲷烂尾病等,利用10倍稀释液泡1015分钟,半月即恢复。第二章一.开发应用价值1、作为植物生理研究的试验材料:繁殖快,世代交替短;2、作为食品及添加剂:富含蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、矿物质、活性多糖类等; 可作为面条、面包、饼干、糕点、糖果以及饮料和果冻等食品;也可提取藻胆素、叶绿素、类胡萝卜素、EPA、DHA和多糖等食品添加剂;3、作为饵料及饲料添加剂:应用于水产动物育苗及添加于配合饲料中,可提高免疫力,增强商品色;添加量0.5-2%;4、提取生物活性物质: 可提取EPA和DHA:其对人类的心脏病、动脉硬化、风湿性关节炎、气喘和糖尿病等有明显疗效。微藻产生的EPA

5、和DHA含量远远高于鱼油且无胆固醇; 可提取色素和甘油;5、能源开发:产生氢气并含有油,如丛粒藻含油量一般为干藻重的30-50%,最高达80%。6、净化水质:放出氧气,吸收氨氮等;7、提高土壤的肥力:固氮作用和促进土壤中放线菌的生长,而被用作化肥。二.在水产养殖上的应用直接作为水产动物幼体的饵料;培养动物性生物饵料;净化养殖水质;作为饲料添加剂;在养殖池内起藻相和菌相的平衡作用,保持水质的稳定,防止疾病发生;起遮阴作用:防止养殖动物因光照太强而产生应激反应。三.培养方式1、纯培养:排除了包括细菌在内的一切生物条件下的培养。纯的,保种。单种培养:在生产性培养中不排除细菌存在, 为了区别纯培养:藻

6、+细菌。 混合培养:几种藻混杂在一起培养,如分离前预培养和池塘水色培养。 2、开放式:散开式,水泥池;封闭式:袋装、桶装、瓶装。四.藻种:指将要被接种到新的培养环境中的高浓度微藻类单种或纯种;五.培养液配制室内小型培养: 母液的配制:配方中各营养盐含量 扩大1000倍 各种母液(3-6种)。 培养液配制:各母液按培养液的1/1000加入; 室外大型培养:直接称取、溶解、泼洒水中。六.接种步骤:放消毒水倒母液倒藻种摇匀或接气管封口。藻种:指将要被接种到新的培养环境中的高浓度微藻类 单种或纯种;藻种质量:为指数生长期最好; 原因:无敌害、生长旺盛期、生命力强;藻种数量 室内:培养液:藻种=2-4:

7、1即2030%,保险1:1; 室外:培养液:藻种=10-20:1即5-20%,保险30-50%;接种时间:选择晴天,上午810点 上午藻类上浮,起到选种作用; 分裂高峰在0-5点,分裂后急需营养和光照。七.分离方法离心法:根据藻类下沉速度不同而分开;趋向运动法:有鞭毛种类会趋光移动而分离;毛细管法:直径5mm玻璃管,拉成微细管,直接吸出;水滴分离法:a、小滴, b、稀释到每小滴12细胞, c、观察正确, d、操作快(易干);稀释法:取5根试管,每管加9ml培养液,在第一根管中加混合藻液1ml,摇匀,从第1管中取1ml混合液移入第2根管中,振荡均匀;同法依次移入第3-5根管中并摇匀稀释,然后各取

8、1ml分别加入5个培养皿中培养;平板分离法:如微生物在培养基上划线或喷雾培养。八.微藻培养的日常管理 1、搅拌或充气 补充CO2:直接充CO2 或充气(含0.03%CO2)防止藻类自阴、沉淀,获取光照;防止产生菌膜(水表面)。2、调节光照 阴天:补充人工光源日光灯;晴天:室内培养防止直射光;室外光照太强,需盖黑网膜。3、调节温度 室内:在夏季注意通风,冬季可利用水、气加温; 室外:无法控温,只能选择适宜不同季节温度的种类;4、注意pH变化: 吸收利用CO2,pH升高,而吸收元素使pH上升或下降,可利用1 mol/L的HCl和NaOH调节;5、养料和水分的补给:根据浓度和繁殖速度补给;6、“四防

9、”:防风、防雨、防灰尘、防昆虫。(可用专用房或池子建高)九.三无四防: “三无”:无离子,无杂质,无细菌;“四防”:防风、防雨、防灰尘、防昆虫。十.预防措施 污染途径 防治对策A、水不净 a、小型培养用水:煮沸, 大量培养用水:漂白粉消毒;B、空气或昆虫携带进 b、专用房或盖塑料薄膜,建高位池;C、容器、工具不洁净 c、专用并彻底消毒,做到“三无”;D、肥料不洁、过量 d、肥料存放好,追肥减半;E、操作不严格 e、手消毒、上池脱鞋等。治理过滤:采用300目过滤网加棉花,过滤掉大型敌害生物。但轮虫卵很难滤掉,等孵化后2-3天的小轮虫还未再产卵前再过滤一次,连续2-3次;使用药物 0.03%氨水:

10、有效地杀死尖鼻虫; 5-10ppm漂白粉:轮虫对漂白粉很敏感, 能抑制或杀死 ; 25-30ppm甲醛:有效地抑制或杀死原生动 物,1-2天后再接种; 青霉素:抑制细菌。改变环境条件 提高比重:轮虫、原生动物在高盐(73.1-78.3)中不能存活,而高盐对微藻影响小一些,经1-2天后再稀释盐度可恢复。 降低pH:利用1mol/L HCl酸化藻液,使pH=3,0.5-1h后即可杀死原生动物。然后,利用1mol/L NaOH中和恢复pH,24小时后藻类可恢复正常生长。十一. 一次性培养中生长繁殖的特征模式曲线:a、延缓期(lag phase)b、指数生长期(exponential phase)c、

11、线性生长期(linear phase)d、相对生长下降期(slowing phase)e、静止期(stationary phase )f、死亡期(autolytic phase )1、延缓期:适应期。原因:藻细胞老化,繁殖酶缺少活力: 接入指数生长期藻种最好,其延缓期为零;缺少藻类自身分泌的某些物质(如羟基乙酸),当其达内外平衡后才具繁殖能力;加入低浓度(1mg/L)羟基乙酸可缩短或消除延缓期;新培养液中某些元素浓度过高,微藻类对新环境不适应。*尽量缩短此期:需要提供指数生长期的藻种和适宜的环境条件。2、指数生长期:快速生长,以几何级数增长;*尽量延长此期:需要提供适宜的光、温、盐、co2 和

12、营养盐。3、相对生长下降期:原因:营养盐耗尽;co2供给不足; pH改变:升高;自荫:浓度高互相遮盖,使光照不足;自体分泌抑制物:有益的和有害的。 如抗生素、溴苯酚、有机酸或有机碱等。 *此期冲气量要加大,并更新培养液。4、静止期:细胞数量不再增加。 (非不生长,而是生长量=死亡量)原因:以上限制因子不断增多。*此期一定要更新培养液。5、死亡期:原因:细胞老化; 繁殖酶无活力;水质恶化(pH升高,自身分泌毒素多等)。 *此期的藻类绝不能利用。12.影响生长繁殖的因子 (填空)光,温度,盐度,营养CO2,pH,生物因子第三章一.轮虫特点:生活力强,繁殖快,营养丰富,大小适宜,易培养。二.轮虫的三

13、大特征(填空)v 轮盘:摄食、运动;v 咀嚼器:磨碎食物;v 原肾管:肾的雏形,内有焰细胞。三.孤雌生殖:某些水生动物在适宜的环境条件下,雌性个体产生的卵无需受精直接发育成雌性小个体,如轮虫、枝角类,卤虫等。 在良好环境下:雌性夏卵(无需受精,挂在足基部)雌性小个体。四.有性生殖混交生殖:不混交雌体产生混交雌体,混交雌体经过减数分裂产生单倍体混交卵(需精卵)。若混交雌体在年轻时不与雄体交配,不论以后有无交配混交卵均不受精,发育为单倍体的雄体;若混交雌体交配了,混交卵受精,精和卵结合为双倍体的受精卵,再形成壳厚的休眠卵。 在不良环境下:饥饿、缺氧、密度过高、种群本身产生有毒物质和生态环境(水温、盐度、PH等)突变等非需精卵混交雌体混交卵 休眠卵(冬卵)。五.种源1、分离:水温15时出现,用250-300目的浮游生物网捞取,用眼或在解剖镜下吸出。2、休眠卵孵化v 产品:300-400元/斤;v 原培养轮虫池排掉旧水(留10-20cm),纳入新水和微藻,池底休眠卵即可孵化。 3、索取或购买。六. 投饵(1)微藻类:v 优点:营养好,水质好;以绿藻为最优,金藻次之;v 缺点:需要培养池,培养密度低(40-60个/ml)。(2)微生物团絮:为人工制成的有机碎屑,是利用葡萄糖为碳源,用尿素、磷酸钾为辅助

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