临床微生物标本的采集和运送课件

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1、临床微生物标本的采集和运送,内 容,微生物标本采集的基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 6.混有正常菌群标本,不可置肉汤培养 7.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂。 8.送检标本应注明来源和检验目的,如何提高细菌阳性检出率?,标本采集时机 标本采集方法 标本的质与量 标本的运送与保存 镜检筛选合格标本(退检制度) 高质量、多种分离培养基 培养环境,血培养标本,对怀疑菌血症、真菌血症的患者,在考虑使用抗菌药物之前,应立即采集血培养标本。 必须同时或间隔短时间内采集套以上血培养

2、标本。,血培养的采集时间,成年患者:推荐同时采集套(不同部位)血培养标本(即双瓶双臂同时采集血培养标本)。 婴幼儿患者:推荐同时采集次(不同部位)血培养标本。,血培养的采集次数,血培养做1套的检出率为65%。 做2套和3套检出率的检出率分别为80%和90%。 单瓶的血培养检出率不高,而且结果很难临床解释。 在采取血培养后的2至5天内,无需重复采取血培养。 两个例外:细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。,血培养的采血量,成年患者:推荐采血量每瓶不少于5ml。 婴幼儿患者:推荐采血量每瓶不少于2ml。(少于病人总血容量的1%),血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。检出率与采血量成比例增长,

3、每增加1ml的血液,病原菌的检出率就会相应增加。儿童患者因为血液中病原菌浓度较高,血培养量无需等同于成人。 采用一对(需氧瓶+厌氧瓶)组合,比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。 采血量不能满足推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶的需要。,推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。 碘町作用1min 碘伏作用1.5-2min 洗必泰作用时间与碘町一样(但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒),血标本采集的注意事项皮肤消毒,推荐从外周静脉采集血液标本。 不推荐动脉血,因其诊断价值没有比静脉血更大。 不推荐静脉留置导管,因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血,也应同时从外周

4、静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。,血标本采集的注意事项采集部位,在采血之前,血培养瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。 严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作,并等待足够的消毒时间。 严格无菌操作,不允许在皮肤消毒后用手接触静脉,除非带有无菌手套。 不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头。,血标本采集的注意事项采集方法,采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。 血培养瓶在采血接种后在室温不超过数小时。 血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。,血标本采集的注意事项标本的运送,痰培养标本,采集与运送,病原体种类繁多而复杂,使下

5、呼吸道感染病原诊断成为难题,细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌) 真菌(包括肺孢子菌) 病毒 支原体、衣原体与立克次体 原虫 寄生虫,咳痰途经口咽部,唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。 研究显示,国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。,不可避免地受到污染,咳痰标本的采集,标本采集方法 医师或护士直视下采集标本。 病人先漱口,去除表面的菌群。 教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液。,关于咳痰标本,在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后12h内必须立即进行实验室处理; 咳痰标本应用最早且广泛,但也是最受争议的标本 ; 取标本前应摘去牙托,清洁口腔如刷牙和漱口; 深咳

6、,采集标本过程中要有专业的医务人员指导; 无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰; 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰;,咳痰标本不合格,退检吗?,如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个,白细胞小于10个,应不做或仅在特殊要求时做培养。 如做培养,报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。,痰培养的送检次数,对于普通细菌性肺炎,痰标本送检每天1次,连续23天。不建议24h内多次采集,除非痰液外观性状出现改变; 怀疑分枝杆菌感染者,应连续收集3天清晨痰液送检;,痰培养,方法的局限性:多数引起肺炎的病原菌不能培养,如病毒,军团菌,衣原体等 影响因素很多:如黏液包裹、定植菌污

7、染 建议:细菌培养同时做血培养和痰涂片镜检,痰培养的运送和保存,尽快(2h)送至实验室。 如不能及时送达,应将标本暂存于4,但放置时间不可超过24h。 厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。 被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。,尿培养标本,采集与运送,尿培养,诊断症状明显的病人(如尿急、尿频、尿痛),一份标本就已足够,治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人,需采集2-3份标本。怀疑肾结核时,应连续3天采集晨尿。 多次收集或24小时尿不能用作培养。 申请单上必须注明病人症状是否明显,这对于定量培养分析非常重要。 室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖,因此若3

8、0min内不能及时培养尿液则必须冷藏,但也不能超过24小时。,清洁中段尿液,尽量取早晨第一次尿液 弃去开始流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿 详细告知病人以下操作步骤 女性病人 收集标本前用清洗液冲洗干净,从前向后仔细擦洗尿道区域 分开阴唇,开始排尿 排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿 男性病人 回缩包皮并清洗龟头 排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿,导尿管尿液,集尿袋内的尿液不能用作培养。 导尿管末端的尿液也不能用于培养,因为很难避免没有尿道菌群污染。 留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集,不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。 采样端口用酒精消毒;必要时,可

9、先夹住导尿管但不能超过30分钟;将注射器针头插入采样端口,抽吸出尿液;注入无菌杯或试管中。,脑脊液标本,采集与运送,脑脊液标本的运送,常温立即送检,实验室收到标本后应立即接种。 脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内,半小时送检是可接受的,如果送检时间超过1小时,则会影响结果,在结果报告时,在备注处注明此情况。 如不能及时送检,可使用血培养瓶(怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染时,请勿使用血培养瓶) 。,手术切口与软组织感染标本,采集与运送,皮肤组织标本,对大多数开放脓肿、伤口,采集前应先去除表面菌群。 干燥、结痂伤口一般不做培养。 闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本。 代表性的标本应采自病灶活动区域或基底部,而不仅仅是脓液。,细菌培养的意义,培养阳性感染 排除污染 排除定植 任何结果都必须结合临床症状及其它相关检查进行综合分析,培养阴性排除感染 标本采集部位和方法 是否在使用抗生素时留取的标本? 标本运送时间和方法是否正确 标本接种、培养基及培养方法的选择是否正确 是否可能是厌氧菌或其它难培养的细菌感染,细菌培养的意义,微生物与药师的意见是十分有参考意义的。 但致病原检测结果的意义应由临床医生来作出最终判断。 我们会不断的改进工作以满足临床需求,小 结,谢 谢 !,

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