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1、子宫内膜异位症组织SRC-1、ER与PR表达及意义 作者：欧阳江华 郭新华 高萍 夏玉芳 【摘要】 目的 探讨类固醇受体辅活化因子-1（SRC-1）、雌激素受体（ER） 、孕激素受体（PR）在卵巢子宫内膜异位症（EMs） 病人在位和异位内膜中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学SABC法,对45例EMs病人在位和异位内膜及42例对照组正常内膜中的SRC-1、ER、PR 进行染色，并利用图像分析系统测定其灰度值。结果SRC-1 在在位内膜中的表达显著高于异位内膜和对照组内膜，差异有显著性（t=8.210、7.260，P<0.05）；SRC-1在在位内膜增殖期和分泌期中的表达强度均显著高于
2、相应期别的异位内膜及对照组内膜（F=58.641、7.650,q=4.16212.052，P<0.01）。ER、PR在异位内膜增殖期的表达均显著低于同期对照组及在位内膜组（F=65.08、59.42，q=11.66114.500，P<0.01）；对照组内膜中SRC-1、ER、PR在增殖期表达显著高于分泌期（t=5.90910.183,P<0.01）。SRC-1、ER、PR 在EMs 的表达与rAFS 分期差异均无显著性（t=1.3521.838,P>0.05）。在位内膜中SRC-1与ER的表达强度呈正相关（r=0.779,P<0.05）。结论 SRC-1、ER、P
3、R 在在位和异位内膜中的表达异常可能与EMs的发生发展有关。 【关键词】 类固醇受体辅活化因子-1；受体,雌激素；受体,孕激素；子宫内膜异位症；免疫组织化学 ABSTRACTObjective To study the expressions and their significance of steroid receptor coactivator -1 （SRC-1）, ER and PR in eutopic and ectopic endometrium in patients with endometriosis （EMs）. MethodsUsing immunohistochem
4、istry SABC method, the expressions of SRC-1, ER and PR in ectopic and eutopic endometrium of 45 EMs cases, and in 42 normal cases were examined and the gray scale detected by image-analysis system.Results The expression of SRC-1 in eutopic endometrium of EMs was significantly higher than that of ect
5、opic endometrium and the normal control, the difference between them was significant （t=8.210,7.260;P<0.05）. The expression of SRC-1 in proliferative and secretory phases of eutopic endometrium was significantly higher than that of the homologous-phase ectopic endometrium and the normal control （
6、F=58.641,7.650;q=4.16212.052;P<0.01）. The expressions of ER and PR in ectopic endometrium during proliferation were lower than that of concurrent control group and eutopic endometrium （F= 65.08,59.42;q=11.66114.500;P<0.01）. The expressions of SRC-1, ER and PR in the control at proliferative ph
7、ase were significantly higher than that in secretory phase （t=5.90910.183,P<0.01）. The differences between the expressions of SRC-1, ER, PR in EMs, and rAFS staging were not significant （t=1.3521.838,P>0.05）. In eutopic endometrium, the expressions of SRC-1 and ER were positively correlated （r
8、=0.779,P>0.05）. ConclusionThe abnormal expressions of SRC-1, ER and PR in ectopic and eutopic endometrium of EMs might be related to pathogenesis and development of EMs. KEY WORDSSteroid receptor coactivator-1; Receptor, estrogen; Receptor, progestin; Endometriosis; Immunohistochemistry 子宫内膜异位症（E
9、Ms）多发生于育龄妇女，近年来发病率有明显增高的趋势，但发病机制至今尚未完全阐明。同时，EMs是一种雌激素依赖性疾病，雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）在EMs中作用的研究趋于成熟。研究显示，类固醇受体辅活化因子-1 （SRC-1） 通过与ER 相互作用, 可以强烈地增强ER 活性, 进而促进染色质重塑和激活靶基因转录的效应1。国内外研究证明，SRC-1与子宫内膜癌、乳癌等雌激素依赖性疾病的发生、发展、复发、转移、治疗、预后等各个方面相关，但关于SRC-1在EMs中的表达的研究尚未见报道。本实验通过免疫组化SABC法检测SRC-1在在位及异位内膜组织的表达情况，以及与ER、PR表达的相关性
10、，以探讨SRC-1、ER、PR在EMs发病机制中的可能作用。现将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 研究对象 实验组：随机选取本院妇科2004年1月2007年9月因EMs行全子宫及双侧附件切除术治疗的病人45例，平均年龄（45.73.0）岁；其中增殖期24例，分泌期21例；采用修订的美国生育协会评分法（rAFS） 进行分期,期20例,期25例。对照组：选择同期因宫颈病变、卵巢良性肿瘤行全子宫切除术或全子宫及双侧附件切除术的病人42例，平均年龄（45.02.0）岁，病理证实为非EMs、子宫内膜正常；增殖期22例, 分泌期20例。 上述病人均经病理证实无子宫肌瘤、子宫内膜增生，术前半年内均未接
11、受性激素及抗EMs药物治疗,无其他内分泌类疾病史。 1.2 方法 采用免疫组织化学SABC法分别检测EMs异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中SRC-1蛋白、ER以及PR的表达情况。SRC-1鼠抗人单克隆抗体IgG1购自美国Santa Cruz 公司，ER和PR单克隆抗体IgG及即用型SABC免疫组化染色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。操作步骤按说明书进行。SRC-1及ER、PR的阳性对照分别采用已知阳性的乳癌、子宫内膜癌组织，以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。 1.3 结果判断 免疫组化染色结果利用德国Sample PCI图像分析系统进行灰度测量分析，将免疫组化染色结果转化为灰度值进行
12、定量分析。切片阳性区表达的强弱与灰度值呈反比。 1.4 统计学方法 本文结果采用SPSS 11.0及PPMS 1.52统计软件包进行t检验和方差分析。相关性比较采用Spearman 相关分析。 2 结 果 2.1 SRC-1、ER、PR在在位、异位和对照组子宫内膜中的表达 SRC-1、ER、PR主要表达于腺上皮的细胞核内，阳性细胞为细胞核中出现棕黄色颗粒。SRC-1在在位内膜中的表达显著高于异位内膜及对照组内膜,差异均有显著性（t=8.210、7.260，P<0.05），后两者比较差异无显著性（t=0.539,P>0.05）。异位内膜中ER、PR的表达显著低于在位内膜及对照组内膜，
13、差异均有显著性（t=4.1756.580，P<0.05），后两者比较差异均无显著意义（t=0.444、0.984，P>0.05）。见表1。表1 SRC、ER、PR 在3组内膜中表达比较（略） 2.2 SRC-1、ER、PR在月经周期不同时相子宫内膜中的表达 SRC-1在在位内膜增殖期和分泌期组织表达强度均显著高于相应期别的异位内膜及对照组内膜（F=58.64、7.65,q=4.16212.052，P<0.01），后两组同期比较差异均无显著性（q=1.775、0.998，P>0.05）；ER、PR在异位内膜增殖期组织的表达均显著低于同期对照组及在位内膜组（F=65.08、
14、59.42，q=11.66114.500，P<0.01），后两组同期比较差异无显著性（q=0.763、2.520，P>0.05）；ER、PR在分泌期组织表达差异均无显著意义（F=1.17、0.46，P>0.05）。同组中比较，仅对照组内膜组织SRC-1、ER、PR在增殖期表达显著高于分泌期（t=5.90910.183,P<0.01）,其他组比较差异无显著性（t=0.0391.962,P>0.05）。见表2。表2 SRC-1、ER、PR在月经周期不同时相子宫内膜中的表达比较（略） 2.3 SRC-1、ER、PR在不同期别EMs异位内膜中的表达 SRC-1在rAFS期
15、和期的表达结果分别为114.310.56、114.070.60,两者比较差异无显著性（t=1.352，P>0.05）；ER在期和期的表达结果分别为102.700.48、102.980.52，两者比较差异无显著性（t=1.838，P>0.05）；PR在期和期的表达结果分别为106.910.25、107.020.29，两者比较差异无显著性（t=1.404，P>0.05）。 2.4 SRC-1在3组子宫内膜中与ER、PR相关性 SRC-1在在位内膜中表达与ER 呈正相关（r=0.779,P<0.05）,而在其他内膜中表达与ER、PR 均无相关性（r=0.467、0.514，P
16、>0.05）。 3 讨论 3.1 SRC-1在EMs中的表达及意义 SRC-1是SRC/p160家族中的一员, ONATE等3最早分离出人SRC-1，该基因定位于人类2号染色体上。进一步研究显示，其与PR、ER等均可结合,从而提高这些受体的转录活性,对机体的生长、发育以及生殖产生重要影响1。 本实验应用免疫组化SABC法检测了SRC-1在EMs中的表达，结果显示,SRC-1在在位内膜中的表达显著高于异位内膜及对照组内膜,提示SRC-1蛋白的过表达可能在EMs的发生发展中起重要作用。JANKNECHT等1研究显示，SRC-1能增强ER介导的体内转录, 可增强转录水平10倍,SRC-1在在位内膜组织过表达可能通过增强ER的活性,进而调控靶基因的转录，引发内膜
