考点1：微生物的实验室培养1

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1、Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 1 一、学习目标：一、学习目标：了解有关培养基和无菌技术的基础知识 二、学习导航二、学习导航：自主学习自主学习 （一）（一） 、微生物类群：、微生物类群：微生物是指自然界那些形态微小，结构简单，通常要用光学显微 镜或电子显微镜才能看清楚的生物。包括没有细胞结构的_、原核生物界、 真菌界和原生生物界。 （二）（二） 、微生物培养基：、微生物培养基：1、概念：培养基是指人们按照微生物对_的不同需求， 配制出供其_的营养基质。 2、成分：在配制培养基时，一般都含有_、_、碳源（提供碳元素

2、的物质， 可分为无机碳源，如_和有机碳源，如_、花生粉饼、石油等）和氮源 （提供氮元素的物质,如 N2、氨、铵盐、硝酸盐等、尿素、牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨、氨基酸 等） ，此外，培养基还需要满足微生物对_、特殊营养物质以及_的需 求。 3、种类： 分类 依据 分类特点作用 _ _培养基 加大量琼脂，呈固态微生物的分离和计数等 半固体培养基加少量琼脂，容器放倒不致 流出，剧烈震荡则破散 观察微生物的运动，鉴定菌 种等 物理 性质 _ _培养基不加琼脂，呈液体常用于_ _ _培养基在一般培养基中加入某种化 学物质，以抑制不需要的微 生物生长，促进所需微生物 的生长 _菌种,如青霉素分离出 酵母

3、菌和霉菌；高浓度食盐 可选择出金黄色葡萄球菌 用途 鉴别培养基在一般培养基中加入某种 _或化学药品，以鉴 别不同种类的微生物 _菌种，如伊红和美蓝 遇大肠杆菌呈深紫色，略带 金属光泽 合成培养基化学成分_分类和鉴定等化学 成分天然培养基由_配制而成， 化学成分不明确 用于工业生产 （三）（三） 、无菌技术、无菌技术 1 1、概念：、概念：指在培养微生物的操作中，所有_ _ 的方法。 2、获得纯净培养物的关键是 。 3、 分类：在操作中需要进行消毒和灭菌处理，消毒是指使用温和的物理或化学方法仅 杀死物体表面或内部_对人体有害的微生物（不包括_和_） 。 常用的消毒方法有：煮沸消毒法 _ _、 和

4、_ _。 灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外_微生物（包括_和 _）常用的灭菌方法有 _ _、 和_ _。 合作探究合作探究 Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 2 1、 培养基中一般都含有哪些成分，结合细胞中元素组成的知识，讨论为什么大多数培 养基中都含有这四类物质？ 2、 消毒和灭菌的区别（阅读教材填充表格） 项 目 概念常用方法应用范围 煮沸消毒法：在 100下煮沸 _min。 一般物品 _：70-75煮 30min 或在 80下煮 15min。 一些不耐高温的液体， 如_ 化学药剂消毒法如用_擦拭双手、

5、用_消毒水源等。 消消 毒毒 消毒是指使用温和 的物理或化学方法 仅杀死物体表面或 内部_对人 体有害的微生物 （不包括_ 和_） 。 _：30W 紫外 线灯照射 30min。 _ _：用酒精灯火焰 _：160-170 下灭菌 1-2h。 玻璃器皿、金属工具的 灭菌灭灭 菌菌 灭菌则是使用强烈 的理化因素杀死物 体内外_微生 物（包括_ 和_） _:121下灭 菌 15-30min。 三、典型例题：三、典型例题： 例例 1 1：对硝化细菌的叙述正确的是（ ） 含有核糖体不含叶绿体 含有 DNA 和 RNA，且 DNA 位于染色体上 因为它是 需氧型生物所以含有线粒体 遗传不遵循基因的分离定律和

6、自由组合定律 遗传中会发生基因突变 A. B. C. D. 变式变式 1-11-1：下列关于不同生物各自特征的叙述，正确的是（ ） 酵母菌 乳酸菌 硝化细菌 衣藻 金鱼藻 烟草花叶病毒 A都是原核生物，且都能发生突变 B都不含叶绿素，且都是分解 者 C都是异养生物，且都能进行有氧呼吸 D都具有细胞结构，且都有细胞壁 例例 2 2：右表是为培养某类微生物而配制的培养基的成分 组 成，有关叙述正确的是（ ） A运用上述培养基可培养自养型微生物 B该培养基从物理性质来看，属于固体培养基 C运用此培养基也可以成功地进行病毒的培养 D该培养基中 NH4HCO3只提供氮源 变式变式 2-12-1：下列关于

7、微生物营养的说法，正确的是（ ） 编号成分含量 NH4HCO30.4g KH2PO44.0g FeSO40.5g CaCl20.5g H2O100mL 维生素少量 Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 3 A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量 C除水以外的无机物仅提供无机盐 D无机氮源也能提供能量 变式变式 2-22-2：下表是有关 4 种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的概述。其中正确的是 （ ） A根瘤菌、乳酸菌 B硝化细菌、酵母菌 C酵母菌、乳酸菌 D硝化细菌、根瘤 菌 例例 3 3：获得纯

8、净培养物的关键是（ ） A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B接种纯种细菌 C适宜环境条件下培养 D防止外来杂菌的入侵 变式变式 3-1：细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理， 这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 ( ) A接种针、手、培养基 B高压锅、手、接种针 C培养基、手、接种针 D接种针、手、高压锅 变式变式 3-2：（14 丰台期末）下列操作属于灭菌的方法的是： A、接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面 B、接种中试管口等易被污染的部位通过火焰 C、牛奶在 80下煮 15min 以杀死其中的微生物 D、氯化汞溶液浸泡外植体 1-2min

9、 后无菌水冲洗 四、反馈拓展：四、反馈拓展： 1下列叙述错误的是 A酵母菌有核膜，而固氮菌没有B酵母菌有细胞膜，而固氮菌没有 C黑藻细胞有线粒体，蓝细菌则没有 D黑藻细胞有内质网，蓝细菌则没 有 2下列关于病毒的描述，正确的是 A噬菌体通常在植物细胞中增殖 B病毒可作为基因工程的运载体 C青霉素可有效抑制流感病毒增殖 D癌症的发生于病毒感染完全无关 3. 不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以 CO2为唯一碳源的自养 微生物营养的描述中，不正确的是（ ） A氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B碳源物质也是该微生物的能源物质 C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D水是该微生物的营

10、养要素之一 4. 下列物质中，不能作为异养型微生物碳源的是（ ） A蛋白胨 B含碳有机物 C含碳无机物 D石油、花生粉饼 5、有关培养基配制原则的表述正确的是 A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、水和无机盐 生物硝化细菌根瘤菌酵母菌乳酸菌 能源氧化 NH3N2的固定分解糖类等有机物光能 碳源 C02 糖类糖类糖类 氮源 NH3N2 NH4+、NO3-尿素 代谢类型自养需氧型异养需氧型异养兼性厌氧型自养需氧型 Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 4 B.碳源和氮源必须有一定比例，碳元素的含量最多，其次是氮元素 C.微生

11、物的生长除受营养因素影响外，还受到 PH、氧和渗透压的影响 D.营养物质的浓度越高越好 6、甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培 养微生物的三种培养基。甲、 乙、丙都能在种正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙 能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ） A.甲、乙、丙都是异养微生物 B.甲、乙、丙都是自养微生物、丙是异养微生物 C.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物 D.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物 7. 下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ） A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而

12、促进细菌生长 C.向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长 D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动 8、下列常用的无菌操作中，错误的是 A用酒精擦拭双手 B用氯气消毒水源 C实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭 9、牛奶、吸管、接种环、培养基、空气灭菌的方式依次是 灼烧灭菌 巴氏消毒 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌 A B C D 10、 下列是与微生物培养有关的问题，请回答：某细菌固体培养基的组成成分是 KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是_， 碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的细菌才能在

13、该培 养基上生长，故该培养基属于_培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 _培养基。从同化作用类 型上看，用该培养基培养的细菌属于_。 11、请回答下列与大肠杆菌有关的问题： （1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于 ； 它 的同化作用类型是 。 （2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL 根据用途划 分该培养基属于 培养基(选择、鉴别)。该培养基中 的碳源是 。 （3）培养大肠杆菌时，为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进 行 。 （4）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明 显不同的是，用于

14、组织培养的培养基中还需要加入 。 12 有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土 壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题： 成分含量 蛋白胨10.0 g 乳糖5.0 g 蔗糖5.0 g K2HPO42.0 g 显色剂0.2 g 琼脂12.0 g Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 5 （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为惟一碳源的固 体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基 （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。 （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的 降解能力 。 （4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌