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1、专题讨论会 2 0 0 0 二海科技论坛 = j = = = = = = = = = = = = = = = = = = ；= = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = ；= = = = 一 螺旋藻清除活性氧及对 D N A 保护作用的发光法研 究 来振勤詹选浩翟万银陈季武 华东师范大学生物学系 螺旋藻届( S p i m l i n a ) 诸种类为多丝 状蓝藻，具有营养丰富、均衡且易被消化 吸收等特点。螺旋藻蛋白质含量高达
2、5 0 一7 0 ，并含r 多糖、多种维生索和y 一 亚麻酸等几十种生理活性物质。其中又以 钝顶螺旋藻( S p l a t e n s i s ) 和极大螺旋藻 ( S m a x i m a ) 最J 开发前景。目前其保健和 药用功效不断破发现，已有学者报道了螺 旋藻对移植性熵细胞的抑制作用，以及在 增强免疫力、机辐射和提高D N A 修复功 能方面的效用。本研究采用三种化学发光 体系和种荧光探针技术，研究了螺旋藻 清除活性氧及对D N A 的保护作用。 结果显示，螺旋藻能明显抑制三个化 学发光体系的化学发光，对邻苯三酚自氧 化产生0 2 的化学发光体系的半抑制浓度 ( I C ) 为11
3、 5 0p m l ，对C u S 0 4 一V i t c Y e a s t H 2 0 2 产生O H 的化学发光体系的 I 为l2 8 0 g n d ，提示螺旋藻能有效地 清除0 2 。和0 0 “，显示了其显著的抗氧化 功能；C u S 0 4 一V i t C p h e n D N A H 2 0 2 产生的O H 氧化损伤D N A 的化学发光实验 结果显示，主鞋旋藻能明显抑制o O H 对D N A 的直接和间提损伤，即不但能通过清除 D N A 损伤链反应的启动因子。O H ，而且能 通过清除D N ，t 损伤链反应中的链延伸自 由基来抑制D N A 的氧化损伤；D N
4、A E B 国 ( 溴乙锭) 荧光探针技术笑验结果表明， 螺旋藻能明显减弱体系的发光强度，提示 螺旋藻有干扰澳乙链与D N ，A 结合的功效， 具有保护D N A 的作用。 生物体内的活性氧是一种化学活性非 常活泼的含氧物质，主要有氧自由基0 ，一 和o O H ，以及它们的衍宝物屿q 、10 2 、 R O 、R o 以及R O O H 等。摩生理情况下， 它们维持有利无害而稳定平衡的浓度。在 病理情况下，该平衡被打破，导致活性氧 过量积累，从而破坏生物太分子、损害生 物结构，使机体发生病变乃至死亡。若 D N A 受到氧化损伤可导敛机体癌变， 而。O H 则是公认的引起D N A 损伤的主
5、要 因素。本研究的上述结果提示，螺旋藻是 一种有效的抗氧化剂，也足一种有效的 D N A 保护剂，并具有一定舶肪癌、抗癌作 用。 白藜芦醇抑制离体H e L a 细 胞肿瘤活性研究 朱振勤张小轶翟万银夏晶 华东师范走学生物学系 白藜芦醇是种植物扰 嚣索，化学名 为芪三酚( 3 ，4 ，5 一t r i h y d r o x r y s t i l b e n e ) ， 属多元酚类。研究表明白藜芦醇不但具有 良好的抗血栓、抗炎症及州帝免疫功能的 活性，对自由基代谢失衡引发的许多疾 病，如动脉粥样硬化、帕金霖氏综合症等 具有显著的防治功效，而且，白藜芦醇还 具有显著的抗癌活陛。 对白藜芦醇抗癌
6、活性的探讨也是近年 JIll-I， 2 0 0 0 上海科技论坛专题讨论会 国际上白藜芦醇药理活性研究的一个热 点。以各种离体癌细胞为材料的细胞学研 究显示，在浓度范围为l O 一l O “M 时， 白藜芦醇对多种癌细胞的增殖均有显著抑 制作用；同时，对自藜芦醇主要抗癌途径 也已作了许多探讨。然而已知的有关抗癌 途径的研究均未能从自由基生物学角度 来阐明白藜芦抑制肿瘤活性的机理。本研 究首次以离体H e L a 细胞为材料，利用细 胞培养法研究了白藜芦醇抗肿瘤活性的功 效，并从对H e L a 细胞自分泌总活性氧 ( R O S ) 及超氧阴离子( 0 2 ) 的调控角度 研究了白藜芦醇抑制H
7、 e L a 细胞肿瘤活性 的机制，旨在从自由基生物学角度进一步 探讨白藜芦醇抗肿瘤活性的机理。 噻唑蓝( r 丌) 法实验结果表明，白 藜芦醇对H e L a 细胞的增殖有强烈的抑制 作用；流式细胞仪( F C M ) 检测结果显 示，白藜芦醇能阻止H e L a 细胞由s 期向 G 2 期转变，从而抑制细胞分裂。 白藜芦醇对H e L a 细胞内源性R o S ( 包括0 2 一和琏0 2 等) 及对H e L a 细胞内部 氧化还原态影响的实验结果表明，白黎芦 醇对H e L a 细胞自分泌的总R O S 有明显的 抑制作用；白藜芦醇对H e L a 细胞自分泌 q 一的抑制与白藜芦醇对
8、H e L a 细胞增殖的 抑制之间呈明显的相关关系；同时，白藜 芦醇可明显提高H e I a 细胞内源S O D 的活 性以及G S H 的含量，但可使C A T 的活性 明显下降。这些指标的变化表明自藜芦醇 能显著改变H e L a 细胞内部的氧化还原态。 以上结果首次显示：自藜芦醇能明显 抑制H e L a 细胞肿瘤活性；抑制H e L a 细胞 自分泌的0 2 可能是自藜芦醇抑制H e b 细胞增殖的一个重要途径；白藜芦醇可能 会通过改变H e L a 细胞内部的氧化还原态 而引发细胞分化。本工作为白藜芦醇抗癌 功效及机理的研究增添了自由基生物学方 面的资料，为白藜芦醇药用价值的进步
9、开发提供了新的实验依据。 八种天然黄酮类化合物的抗 氧化构效关系 陈季武杭凯华东师范大学生物系 黄酮类化台物是泛指两个芳环( A 与 B ) 通过三碳链相互连接而构成的一系列 化合物。大多数阻植物为原料的中药都含 有黄酮类化合物。现已发现黄酮类化合物 具有众多生理功能和药用价值，如保护心 瞄血管、保肝、抗菌消炎、抗辐射和抗肿 瘤等，其中引人注目的是其抗氧化作用， 使该研究成为热门课题之一。由于极高纯 度的黄酮类化合物来源和技术方法等限 制，对黄酮类化合物的抗氧化的研究主要 集中于效用上，对其构效关系进行研究甚 少。鉴于黄酮类化台物在药学、保健品、 食品和化妆品等方面已有的和潜在的应用 前景，有必要对其构效关系进行研究。为 此，采用H 2 嘎一C T M A B I ，u m J n o l 发光体 系和F f + 诱发的脂蛋白P L I F A 过氧化的比 邑体系，研究了8 种纯度高达9 8 的天然 黄酮类化台物清除H 2 0 2 ，L O 。和L O O 。的构 效关系。 一、对H 2 0 2 的清除作用 槲受素、茶多酚、泽漆新甙、芦丁、 金丝桃甙、山奈素、橙皮甙和黄芩甙清除 H 2 0 2 的J C 5 。分别为0 ，6 5 , l g 瑚、0 8 2 u g m 、
