白沙蒿种子多糖的结构及活性研究

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1、内蒙古大学 硕士学位论文 白沙蒿种子多糖的结构及活性研究 姓名：阿荣 申请学位级别：硕士 专业：有机化学 指导教师：博格日勒图 20040520 白沙蒿种子多糖的结构及活性研究 白沙蒿种子多糖的结构及活性研究 摘要 白沙蒿( A r t e m i s i as p h a e r o c e p h a l aK r a s c h ) 又名黄蒿、籽蒿或黄毛菜 籽，蒙名查干一西巴嘎，广泛分布在内蒙古西部、宁夏、甘肃、蒙古南部地区。 为优良的固沙植物之一，其枝叶可作饲料，瘦果可食用、药用，且分布广、数量 大，具有重要的资源价值和环境功能。所以，对白沙蒿的化学组成、结构及生 物活性的研究是非常有

2、实用价值的。 本文以白沙蒿种子为原料，经热水提取，酶法和S e v e g 法脱蛋白，乙醇分 级沉淀，得到两种组成和结构完全不同的酸性杂多糖A S P l 和A S P 3 。用完全酸 水解、高碘酸氧化、S m i t h 降解、I R 、H P L C 、1 H N M R 、”C N M R 等方法分析了它们 的组成和结构。结果表明，A S P l 数均分子量M n = 2 8 4 1 0 5 ，主要以木糖组成， 含有少量葡萄糖和阿拉伯糖。A S P 3 数均分子量M n = 3 5 0 1 0 4 ，由葡萄糖、半 乳糖、阿拉伯糖和甘露糖组成，摩尔比为2 1 ：1 3 ：1 0 ：1 4

3、。A S P l 、A S P 3 中均含有糖醛酸。A S P l 中糖苷键以l 一3 连接为主，A S P 3 中糖苷键以1 4 连 接为主，A S P l ，A S P 3 中均含有和B 两种构型。 以大鼠为实验对象，辛伐他汀为阳性对照组，另设高脂饲料对照组，研 究白沙蓠种子粗多糖C A S P 和白沙蒿种子多糖A S P 对大鼠血脂水平的影响。结 果表明，C A S P 和A P S 均可降低血清中总胆固醇( T c ) ，且A S P 的效果比降脂药 辛伐他汀好，C A S P 和A S P 对血清甘油三酯( T G ) 均有显著降低作用( P O 0 5 。 C A S P 和A S

4、 P 对大鼠血清胆固醇的影响( 表3 4 ) 结果显示，阳性对照、C A S P 、A S P 三组与对照组比较都有一定的降低总胆固醇作用，但没有显著差异。阳性对照组与对照组 5 l 一一 一 旦鲨蔓壁王墨塑塑竺塑墨耍丝望塞 比较P 值大于A S P 组与对照组比较P 值，表明A S P 的降总胆固醇作用E E 阳性对照药( 幸伐 他汀) 要好，但没有显著差异。 表3 - 5 给药后第1 5 天大鼠血清甘油三酯含量测定结果( 单位m m o l L ) t a br e 3 5T GL e v e lo fr e tStr e a t e df o r 15 d a y s 对照阳性对照C A

5、 S pA S P 1 号1 0 6O ，5 3O 6 5O 7 7 2 号1 2 30 9 40 9 80 6 9 3 号 1 0 80 9 31 2 6O 8 8 4 号 1 2 51 0 60 7 90 9 5 5 号O 6 60 80 9 l1 0 1 6 号 O 9 8l 1 6I 0 2l _ 0 5 7 号1 3 6O 8 60 8 71 3 4 8 号 1 2 30 60 9O 8 8 9 号 1 4 11 0 4O 9 70 9 3 1 0 号1 2 8 O 。7 41 0 7O 8 1 平均值 1 1 5 40 8 6 60 9 4 20 9 3 1 标准差 O 2 1 9

6、 4 0 0 2 0 2 1 60 1 6 4 0 3 3O 1 8 0 0 8 9 袁3 - 6C A S P 和A S P 对大自鼠血清甘油三酯的影响( n = 1 0 ，i S ) t a b l e 3 - 6I n f l u e n c 8o fC A S Pa n dA S PO i lT Go fi a ts + 阳性对照组与对照组比较：P O 0 1 ，* * C A S P 和A S P 组与对照组比较：P O 0 5 一一一旦鲨苎登三兰楚箜笙垫丝塑堡塑塞 C A S P 和A S P 对大鼠血清甘油三酯的影响( 表3 6 ) 结果显示，阳性对照、C A S P 、 A S

7、 P 三组与对照组比较都有一定的降甘油三酯的作用，均有显著差异( P 0 0 5 ) 。阳 性对照组与对照组比较P 值小于C A S P 组和A S P 组与对照组比较P 值，表明E A S P 和A S P 的降甘油三酯作用不如阳性对照药( 幸伐他汀) 好。 3 3 白沙蒿种子多糖的抗凝血活性实验 33 1 试剂与材料 受试药：自沙蒿种子多糖A S P I ；白沙蒿种子多糖A S P 3 动物：昆明种小白鼠( 内蒙古大学动物研究中心提供) 表3 7 凝血时间测定结果 t a b l e 3 7R e s u l t so f c o a g u l a t i o nt i m eo f r

8、 a t8 组别生理盐水 A S P lA S P l A S P 3A S P SA S P 3 给药量 1 0 m g K g2 0 m g K g1 0 m g K g2 0 m g K g4 0 m g K g 8 91 0 61 1 71 2 61 2 71 2 1 9 01 l l1 3 71 2 C1 0 C1 1 4 8 71 0 21 4 41 2 51 2 01 3 9 凝 6 19 91 2 81 4 81 9 61 3 3 血 8 08 61 1 21 2 69 71 2 l 时 间 8 C1 1 31 2 41 2 31 1 91 1 0 ，、 一 7 61 0 31

9、 2 81 2 91 1 81 4 0 9 l1 0 01 2 11 1 51 6 91 2 5 9 01 1 51 4 51 2 91 0 51 2 0 7 41 2 51 1 51 5 91 1 91 3 5 平均值8 1 81 0 6 1 2 7 11 3 01 2 71 2 5 8 标准偏差 9 6 1l O 6 71 1 6 81 3 3 23 1 4 31 0 4 4 白沙篙种子多耱的结构及活性研究 332 实验方法 按毛细管法 7 ( 1 测定凝血时间。取小白鼠6 0 只，体重1 8 2 0 9 ，雌雄兼用，均分6 组， 每组1 0 只，1 组为生理盐水组；2 组为l O m g

10、 K gA S P l 组；3 组为2 0 m g K gA S P l 组；4 组 为1 0 m g K gA S P 3 ：5 组2 0 m g K gA S P 3 组；6 组为4 0 m g K gA S P 3 组，按O i m l 2 0 9 尾静脉 注射，于静注后l O m i n 作眼眶后静脉丛取血，测定凝血时间。 333 结果与讨论 凝血时间测定结果见表37 。 袁3 8A S P l 和A S P 3 对小鼠凝血时间的影响( n = l0 ，X S ) t a m e 3 8I n f l u e n c eo fA Ca n dA S P O I lc o a g u l

11、 a t i o nt i m eo f f a ts ( m g K g ) S P 组别剂量 凝血时I 司( )值 生理盐水818+96 A S P l 1 0 A S P l 2 0 A S P 3 1 0 A S P 3 2 0 1 0 6 0 1 0 7 O 0 0 0 0 0 1 + 1 2 7 1 1 1 70 0 0 0 0 0 0 0 2 。 1 3 0 0 1 3 3 0 0 0 0 0 0 0 0 3 4 + 1 2 7 0 3 1 40 0 0 0 3 8 8 + + A S P 3 4 0 1 2 5 8 1 0 40 0 0 0 0 0 0 0 1 + + 10 ，

12、2 0 m g K gA S P l 组与对照纽比较：P O 。O l ， IO ，20 ，4 0 m g K gA S P 3 组与对照纽比较：P O - 0 1 A S P I 和A S P 3 对小鼠凝血时间的影响( 表3 - 8 ) 结果显示，1 0 ，2 0 m g K gA S P l 组与生 理盐水组比较都能够显著延长小鼠凝血时间( P O 0 1 ) ，且随浓度增大，凝血时间显著延 长，有量效关系；1 0 ，2 0 ，4 0 m g K gA S P 3 组与生理盐水组比较也能够显著延长小鼠凝血时 间( P O 0 5 ) 和甘油三酯( P O 0 5 ) 的作用。 5 抗凝血

13、活性研究表明，A S P I 和A S P 3 都有极显著地延长小鼠凝血时间( P 0 0 1 ) 的作用。 白沙蒿种子多耱的结构及活性研究 参考文献 】 周世文，徐传福，多糖的免疫药理作用 J ，中国生化药学杂志，1 9 9 4 ，1 5 ( 2 ) ：1 4 3 1 4 7 【2 金城，张树政，糖生物学与糖工程的兴起与前景，生物工程进展，1 9 9 5 ， - 5 ( 3 ) ：1 2 - i 7 3 王克荑，作为信息分子的糖类，化学进展，1 9 9 6 ( 8 ) 2 ：9 8 1 0 8 4 郭忠武等，糖化学研究进展，化学进展，1 9 9 5 ；l ( 7 ) ：1 0 2 9 5 杨

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15、l y s a c c h a r i d e s 。N e w y o r k ：A c a d e m i cP r e s s 19 6 5 5 1 0 方积年，多糖研究的现状，药学学报，1 9 8 6 ，2 1 ( 1 2 ) ：9 4 4 9 5 0 1 l j 梁忠岩，张冀伸斜顶菌中水溶性多糖的研究( I ) 分离、纯化与结构确定高等学校 化学学报，1 9 8 3 ，4 ( 3 ) ：3 6 3 2 6 9 1 2 苏拔贤，生物化学制备技术， 伽，科学出版社，1 9 8 6 13 周鹏、谢明咏，傅博强，多糖的结构研究，南昌大学学报，2 0 0 1 ( 2 5 ) 2 ，1 9 7 2 0 4 1 4 吴东儒，糖类的生物化学 M 北京：高等教育出版社，1 9 8 7 i 1 5 来鲁华，杨昱婷寡糖的构象分析 J 生物化学与生物物理进 展，1 9 9 5 ，2 2 ( 4 ) ：2 9 0 2 9 4 1 6 张剑波，田庚元寡糖分离和结构分析进展 J 生物化学与生物物理进 展1 9 9 8 ，2 5 ( 2 ) ：1 1 4 一1 1 8 1 7 马立四，王式箴HP LC 法测定低热量仪器中的Gle 、Fru 、Svc 的研究 J 食品与发酵工业，1 9 9 9 ，2 4 ( 4 ) ：1