甘蓝型油菜自交不亲和性的初步研究(1)

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1、分类号：密级：l 3SS56 华中农业大学博士学位论文 甘蓝型油菜自交不亲和性的初步研究 P r e l i m i n a r yS t u d yo nS e l f - i n c o m p a t i b i l i t y o fR a p e s e e d ( B r a s s i c a n a p u sL ) 研究 指导教 指导小组： 张幸果 傅廷栋 马朝芝 傅廷栋 马朝芝 涂金星 沈金雄 院士 副教授 院士 副教授 教授 副教授 专业：作物遗传育种研究方向：油菜遗传育种 获得学位名称：农学博士获得学位时间： 华中农业大学植物科学与技术学院 C o l l e g e

2、o fP l a n tS c i e n c ea n d T e c h n o l o g y ，H u a z h o n gA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y 作物遗传改良国家重点实验室中国武汉4 3 0 0 7 0 N a t i o n a lK e yL a b o r a t o r yo fC r o pG e n e t i cI m p r o v e m e n t W u h a n ，P R C h i n a4 3 0 0 7 0 Z O O 七年十二月 D e c ，2 0 0 7 - 生师 1 I I I I

3、 II II II I 1 1 1 1I L I I I I I IIllI Il 华中农业大学学位论文独创性声明及使用投爱轷1 2 6 7 3 学位论文 是如需保密，解密时间 2 0 10 年1 月lO 日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：券本果时间

4、：如。宴年，月- 7 日 学位论文使用授权书 本人完全了解“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定”，即学生必须按 照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电 子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇 编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论 文的全部或部分内容 注：保密学位论文在解密后适用于本授权书 学位黼槲：瓣果锄始群 签名日期：如。P 年月7 日 签名日期：矿年月7 日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 华中农业人学| 尊十学位论文2 0 0 7 目录 摘要I A B S

5、T R A C T I I I 缩略语表。V 1 文献综述1 1 1 油菜杂种优势利用的途径1 1 1 1 细胞质雄性不育。2 1 1 2 细胞核雄性不育2 1 1 3 自交不亲和性3 1 1 4 化学杀雄3 1 1 5 其它途径3 1 2 甘蓝型油菜自交不亲和性的利用。3 1 2 1 甘蓝型油菜自交不亲和系的选育4 1 2 1 1 自交分离4 1 2 1 2 种间杂交4 1 2 2 甘蓝型油菜自交不亲和系的繁殖4 1 2 2 1 剥蕾授粉法5 1 2 2 2 喷施赫水5 1 2 2 3 利用保持系5 1 2 2 4C 0 2 处理法6 1 2 3 甘蓝型油菜自交不亲和系杂种6 1 2 3 1

6、 单交杂种6 1 2 3 2 三系杂种6 1 2 3 3 双交杂种7 1 3 油菜自交不亲和性的分子研究8 1 3 1S L G 基因9 1 3 2S R K 基因10 1 3 3 柱头决定因子。1 1 1 3 4S C R S P ll 基因1 2 1 3 5S 单元型之I 日J 的显隐性关系1 3 1 3 6S L G 、S R K 和S P l l 之间的物理距离1 3 1 3 7S R K 与S P I1 的相互作用1 5 1 3 8S S I 的信号因子l5 1 3 8 1A R C l 1 5 1 3 8 2T H L l 2 1 6 1 3 8 3M L P K 1 6 1 3

7、9S S I 自交不亲和反应l7 1 4 分子标记在油菜育种中的应用1 8 1 4 1D N A 分子标记的种类和特点1 8 1 4 2 油菜遗传图谱的构建2 1 1 4 3 油菜重要性状的分子标汜2 1 华中农业人学博十学位论文2 0 0 7 1 4 4 分子标记辅助选择2 2 1 4 5 分子标记的其他应用2 3 2 本研究的目的、意义和研究内容2 4 3 材料和方法2 5 3 1 材料2 5 3 2 田间试验。2 5 3 3 亲和指数法2 5 3 4D N A 提：取2 6 3 5P C R 扩增2 6 3 6P A G E 分析2 6 3 7C A P S 分析2 7 3 8 引物设计

8、2 7 3 9 片段克隆、测序2 7 3 9 1 片段回收2 7 3 9 2 连接反应2 8 3 9 3 大肠杆菌感受念细胞的制备及转化2 8 3 9 4 重组子筛选、鉴定2 8 3 9 5 克隆片段的测序及序列分析2 9 3 1 0 数据分析2 9 3 1 0 1 适合性测验2 9 3 1 0 2S 位点作图2 9 3 1 0 3 序列分析2 9 4 结果与分析3 0 4 1 甘蓝型油菜自交不亲和性的遗传3 0 4 1 1S 1 3 0 0 的自交不亲和性3 0 4 1 2F l 植株的亲和性3 0 4 1 3 分离群体的亲和性调查3 0 4 1 4 株系的亲和性调查3 1 4 2 甘蓝型油

9、菜自交不亲和性的分子标记3 5 4 2 1 文献引物发展的标记一3 5 4 2 2 标记片段序列分析4 0 4 2 3S C A R 引物设计一4 1 4 2 4S C A R 引物筛选。4 4 4 2 5 显性的S C A R 标记4 5 4 2 6 多重P C R 标记4 8 4 2 7 标记辅助选择5 0 4 2 8S 位点定位5 l 4 3 甘蓝型油菜自交不亲和基因的克隆5 2 4 3 1 引物扩增的区域5 2 4 3 2 扩增片段序列分析5 3 4 3 3 基因结构和序列分析5 6 4 3 4 芸薹属自交不亲和基因的进化5 9 华中农业人学l 尊十学何论文2 0 0 7 4 4 甘蓝型油菜S 位点的分布与自交不亲和系的恢保关系6 3 4 4 1F l 的自交不亲和性6 3 4 4 2 引物扩增结果