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1、动物急性毒性实验动物急性毒性实验 食品毒理学实验 (一)实验目的 掌握静式急性经呼吸道染毒的方法 掌握半数致死浓度(LC50)的测定方 法和结果评定 (二)试验材料 试验动物:每组10只健康成年小鼠(雌、 雄各半),分五组。 材料:静式吸入染毒装置1套;二硫化碳; (三)实习内容 实验动物的选择和性别鉴定 实验动物的称重、编号以及随机分组方法 小鼠动式或静式呼吸道染毒的方法 急性毒性反应观察和LC50计算 实验动物的选择和性别鉴定实验动物的选择和性别鉴定 健康健康 对受试物最敏感动物对受试物最敏感动物 种属品系、年龄种属品系、年龄 、体重、体重 性别选择和鉴定性别选择和鉴定 continue
2、健康动物检查健康动物检查 外观体形丰满外观体形丰满 背毛浓密有光泽,紧贴体表背毛浓密有光泽,紧贴体表 眼睛明亮眼睛明亮 行动迅速行动迅速 反应灵活反应灵活 食欲及营养状况良好食欲及营养状况良好 back 实验动物性别选择 动物性别不同对毒物的敏感性也不同 需根据实验要求选择性别 一般实验如对性别无特殊要求者,宜选用 雌雄动物各半 back 实验动物的称重、编号、分组 称重 编号:记号笔 分组:完全随机分组 back 称重 秤的感应量需在0.1g以下 体重要求: (1)同一组内、同性别动物体重差异应小 于平均体重的10 (2)不同组间同性别动物体重均值差异应 小于5 back 小鼠动式或静式呼吸
3、道染毒 动式吸入染毒 动式染毒柜 特点 进出气体动态平衡 可调节毒气的浓度 可调节气流速度 动物不会发生窒息 保证染毒浓度相对恒定 温湿度易于控制 小鼠静式呼吸道染毒 小鼠静式呼吸道染毒 CS2静式吸入染毒 CS2毒性资料:致死剂量范围 2338g/m3 剂量组剂量差为1.6倍 小鼠静式呼吸道染毒 1.分五组,每组10只健康成年小鼠(雌雄各半、分别编号), 染毒浓度按等比级数分组 剂量组1 :12.0 mg/L 剂量组2 :19.2 mg/L 剂量组3 :30.7 mg/L 剂量组4 :49.1 mg/L 剂量组5 :78.5mg/L 小鼠动式或静式呼吸道染毒 CS2静式吸入染毒 加入CS2量
4、计算公式: C*L d*1000 a a加入CS2量(ml) dCS2比重(1.26631.2663g/g/mLmL) C试验设计的染毒浓度(mg/L) L染毒柜容积(300L) 急性毒性反应观察和LC50计算 实验记录(综合各组实验数据) 观察1小时、观察终点为死亡 受试物名称:CS2 试验日期: 试验动物种系: 结构式:S=C=S 室温:25oC 组别 剂量( mg/L ) 动物编号 性别 体重(g) 症状及出 现时间 死亡时间 back 观察非致死性指标:书P10 蔻氏法 利用剂量对数与死亡率呈S型曲线而设计的 该法计算简便、准确率高 要求:每个染毒剂量组动物数相同 各剂量组组距呈等比关
5、系 死亡率呈正态分布 最低剂量组死亡率80% 急性毒性反应观察和LC50计算 LC50计算蔻氏法 mXk-i(P-0.5) mlog LC50 Smm的标准差 P各组死亡率总和 p 各组死亡率 q1-p i 相邻两组剂量对数值之差 n每组动物数 Xk最大剂量的对数值 i pq Sm n 注意:注意:m 和和 Sm 都是对数值,实际值要计算反对数,都是对数值,实际值要计算反对数, 结果以半数致死结果以半数致死浓度浓度标准偏差表示,单位是:标准偏差表示,单位是: (三)注意事项 CS2可经皮肤吸收,应防止沾染皮肤和溅入 眼内 防止受试物滴入染毒瓶底部,以免小鼠舔 舐,经口进入体内 染毒结束后在通风处开启染毒瓶,人处于 下风向 实验后用自来水洗染毒柜 (四)试验报告 动物试验基本操作只需写试验体会和收获 急性呼吸中毒试验需写完整的试验报告 各小组选择某种食物中的毒物,根据查阅 资料中其半数致死剂量,设计经口急性中 毒试验方案,通过网络平台上的学生笔记 提交 提交时间:十五周周二晚上10点前