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1、E命怀医仪u二E“招掘观察与鉴别X染色质的简易方法,识别其形态特征及所在部位;“鉴定个体的性别,为进一步研究人类染色体畸变与疾病的关系提供基础方法、为遗传病临床诊断提供参考。伟T发现1949年,Barr等人在雄猫的神经元细胞核中首次发现一种染色较深的浓缩小体,而在雄猫则没有这种结构。进一步研究发现,其他雕性哺乳动物(包括人类)也同样有这种显示性别差异的结构。而日不仅是神经元细胞,在其他细胞的间期核中也可以见到这一结构。一般认为这种小体是两个X染色体中的一个在间期发生异固缩形成的,故而将其称为X小俪,%琴色质,Barr小佛(巴历小体)戟征染色质小体。Barr小体出现在哺乳动物雌性个体细胞的细厕核
2、膛边缘,这主要是因为这条染色体处在失活状态所致,Morishima等利用放射性标记的方法证实了失活状态的性染色体与其他异染色质(heterochromatin)一样,在DNA复制时总落后于其他常染色质,日大多出现在核膜边缘。性染色质的数目是X染色体数减1。故可以根据X小体的有无、数目来鉴定胎儿的性别和性别畸形。E刹“表性染色体组成与X小佛数目的关系“性染色体组成性别X小体的数目“XY男0“XO女0“XX女1“XXY男1“XXX女2“XXXX女3两么汝提绍胞中,两条X粘仪体中只有一条,公染色体一经失活,其后代细传上毗。的。无沽件期馀狄札坤L一超业口史。刨所-g一亘根雷红忍梁棠因振出动罡宇仪唐牧关
3、趁奕树林|K今西莲河哨命标姑社长吴一医|沥国不讨厂河驿河水沥吊许一吴灵命坤道耗运4世椋艾化诊答沥口补惧H汀Hh邵憎万一一公一程人沥%刹故仪吊志5一圩riei挂口丶-暨当勺秽五n友劭烙匹品视一为蛭E刹“3、剂量补偿:。细胞内的X染色体数目超过丽条时,仍只有一条保持活性,其余的都形成异固缩的X染色质。正常男性只有一条X染色体,所以X染色质的数目为0。45,XO性腺发育不全的患者虽然是女性,但是因为叶有一条X染色体,所以细胞内无X标色质。一个细胞中所含的X染色质的数目等于X染色体数目减一。“剂量补偿:由于雍性组胞中的两个X染色体中的一个发生异固缩(也称为Lyon化弦夜),失去活性,巡样保证了雌建两性
4、细胞中都只有一条X染色体保持转录活性,俭两性X连锁基因产物的量保持在相同水平上。这种效应称为X染色体的剂量补偿。“需要指出的是,失活的X染色体上基因并非都失去了活性,有一部分基因仍保持一定活性,因此X染色体数目异常的个体在表型上有别于正常个体,出现多种异常的临床证状。如47,XXY的个体不同于46,XY的个体;47,XXX的个体不同于46,XX的个体,而且X染色体越多时,表型的异常更严重。如氓发玖。工材料口腔粘膜(男、女、发根细胞(女)。2.器具显微镜、牙签、染色缸、盖玻片、载玻片、擦镜纸、记号笔3.试剂固定液(95?8江祺;冰酬酸3:五圣在染色缸中门燕馋水、709%、95%酒精、无水酒精、4
5、5?6醋酸、5moLHCL、二甲苦、香柏油、卡宝品红染液。“1获取实验材料“A.口腔黏膜细胞“取一干洗的载玻片,用记号笔在即将涂细胞的一面作个标记。先用水将口漱浑,尽可能除去口中的杂物。然后用牙签钝头在口腔一侧用力刮取,弃去第一次得到的刮取物,在同一部位继缓刮取(这样就可取得深层的表皮细胞),将刮得的细胞涂抹在干洗载玻片上,反复儿将从,使玻片上的材料尽量座些;“勿令玻片上的材料干燥;迅速将坦片插入装固定液的梁色缸中固定30分钟以上。如果让材料在空气中干燥,会使细胞变形。拿刚涂抹的玲片直接插入固定波中,当然会使许多材料丢失,但粘在玻片面性上的细胞足够观察之需。固定后将载玻片在空气中陶干,这样,细
6、胞就可以紧贴在玻片的表面。E刹。B.毛嫁细胞(Hairfolliclecel1)“拔取一根毛根比较大的毛发(头发或其他部位,如手臂上的毛发均可;如可能,尽量选用白色或浅颂色的毛发,这样在制片中就可减少色素的干扰。在一张干净的载玻片中央滴一滴45%的醋酸,将毛根浸溃其中。静置约5分钟,待毛根稍软后用镊子尖或解剖针尖将外层毛斐的组织细胆转轻制下用力太大;败史能将毛发上的色素细胞一起刮下,影响制片效果)。弈去毛干。用解剖针将载玻片上的组织细胞均匀掌平。掌平的材料在空气中陶干。E刑2,染色。刀.在陶干的玻片上直接滴上染料,梁色10分钟。“2).在95%的酒精中分色1-3分钟。“3).在无水酒精中继续分色两次,每次1分钟。)用二甲苯透明两次,每次约3分钟,直接加盖玻片封片(或用树胶封片咋观察“3观察“观察X染色质要用油镜。
