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1、,临床实验室生物安全,陆家海 教授 公共卫生学院 2011-10 jiahailu,Pike对3921例报告的实验室感染分析表明，59%源自研究性实验室，17%发生在临床诊断性实验室,outline,一、总论,凡是为预防、诊断、治疗任何人类疾病或损伤、或者评价人类健康而对人体的物质进行生物、微生物、血清化学、血液、生物物理、细胞或者其他类型检验的部门，统称为临床实验室,香港淘大花园SARS的感染，就是通过下水道传播引起的，说明了实验室工作人员对医疗废物处理的知识贫乏或意识淡薄,351感染,35人死亡,实验室每天要处理来自临床的标本，如血液、穿刺液、分泌物等，对这些“未知疾病标本”无法得知其危险
2、程度，因此，每个临床实验室每天都面临生物安全隐患,真菌,病毒,细菌,临床实验室危害源,寄生虫,易燃性、 腐蚀性、 有毒性、 强酸性化学品等,电器设备、 辐射、 噪声等,生物源危害,来源： 临床实验室中处理的病人标本（细菌、病毒、真菌、寄生虫）,细菌（bacteria）,结核杆菌 Mycobacterium tuberculosis. Rod-shaped Bacterium,白喉杆菌 Corynebacterium diphtheriae. Rod,clubed-shaped Bacterium (causes diphtheria),病毒 （viruses）,狂犬病病毒 Rabies,DNA
3、肿瘤病毒 DNA tumor viruses,脊髓灰质炎病毒 polio,Harrington和Shannon在1976年的调查中发现，结核分枝杆菌、乙型肝炎病毒与志贺菌已成为英国临床实验室工作人员最为常见的职业性感染原因,临床实验室生物污染的原因及种类,空气污染 水的污染 人体污染 物体表面的污染,空气污染,内： 平面布局、气流方向 合理 死角区域 缩小 外： 直接外排或扩散 高效过滤 密闭或压力差,水、人体、物体表面污染,实验过程中产生的大量污水 特殊处理后排放 工作人员实验室感染（接触、吸入） 专门防护规程 物体表面污染（溅出、溢出、穿用错误等） 正确操作,化学源危害,含义： 临床实验室
4、内的部分化学品具有易燃、可燃、刺激、腐蚀性或剧毒性等危害,物理源危害,来源： 噪音 辐射 紫外线 电磁场 其他,实验室工作人员在实验过程中受到实验室生物污染而发生的感染,实验室感染,东北农大师生因动物实验感染严重传染病,2010年12月，东北农业大学30名学生在实验室进行“羊活体解剖学实验”，因实验动物购买未按黑龙江省实验动物管理条例，未要求养殖场出具有关检疫合格证明， 使28人被感染布鲁氏菌病 布病 结核,2003年9月9日，新加坡一名患者被确诊感染了非典病毒。 这名27岁的男子是新加坡国立大学专门研究西尼罗病毒的微生物实验室的一名研究生。由11名专家组成的国际调查小组认为，不恰当的实验程序
5、、以及西尼罗病毒样本与非典冠状病毒在实验室里的交叉感染，可能是这名患者感染非典病毒的原因,新加坡的实验室SARS感染事件,实验室感染的途径,空气传播：接种环、吸管、注射器使用时 经口传播 直接接种：针刺、划伤等 黏膜接触：如HIV能通过眼结膜进入人体 节肢动物媒介（叮咬等）,消化道摄入传播,实验室感染的发生率(Britain) 志贺菌临床实验室感染 0.322 沙门菌临床实验室感染 0.137 其他肠道致病菌如弧菌属细菌、弯曲菌属细菌及大肠埃希菌等的实验室感染率极低,职业HIV感染,Occupationally acquired AIDS cases or HIV infections rep
6、orted ti CDC through 1992 Occupation No. (%) of occupational transmissions Laboratory technician 25(24.8) Nurse 26(25.7) Physician 13(12.8) Medical technician/paramedic 7(6.9) Dentist/dental technician 6(5.9) Health aide/attendant 6(5.9) Housekeeper/maintenance worker 6(5.9) Morgue technician 3(3.0)
7、 Technician/therapist 3(3.0) Respiratory therapist 2(2.0) Surgical technician 2(2.0) Other HCW 2(2.0) Total 101 Adapted from D.L. Sewell, Clinical microbiology reviews,1995,389-405,临床实验室安全管理,硬件管理,实验室设备,个人防护设备,生物安全防护（biosafety containment）指在实验室环境下处理和保存感染性物质的过程中采用的一系列的防护措施，包括一级防防和二级防护,一级防护与二级防护,一级防护：
8、包括规范操作技术与规程，配置适当的安全设备，保护操作人员和室内直接环境免遭感染性物质的污染 二级防护： 包括合理的实验室设施设计和严格规范的操作流程，用以保护实验室外环境免受感染性物质污染,个体防护装备,个体防护装备,装备 避免的危害 安全性特征 实验服、隔离衣、连体衣 污染衣服 背面开口 罩在日常服装外 鞋袜 碰撞和喷溅 不露脚趾 护目镜 碰撞和喷溅 防碰撞镜片 侧面有护罩 安全眼镜 碰撞 防碰撞镜片 侧面有护罩 面罩 碰撞和喷溅 罩住整个面部 发生意外时易于取下,个体防护装备,装备 避免的危害 安全性特征 防毒面具 吸入气溶胶 在设计上包括一次性使用的、整 个面部或一半面部空气净化 的、整
9、个面部或加罩的动力空 气净化的以及供气的防毒面具 手套 直接接触微生物 得到微生物学认可的一次性乳 划破 胶、乙烯树脂或聚腈类材料 保护手 网孔结构,洁净台/生物安全柜,洁净工作台生物安全柜,洁净工作台,环境空气工作台过滤样本直接吹向操作者排入室内 保护样品，不保护操作人员及操作环境,生物安全柜,环境空气进入工作台过滤样本高效过滤排入室内或室外 采用负压装置，形成气幕防护屏障，保护操作人员安全,生物安全柜的分型,CLASS级生物安全柜 CLASS级生物安全柜 CLASS级生物安全柜,实验室分区,清洁区：包括办公室、休息室、培养基室等 半污染区：包括缓冲间、更衣室和卫生通道等 污染区：包括样本收
10、集区、处理区、培养区和废弃物处理区等,实验室的出口和通道必须保持畅通无 阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备,出口通路,组织机构 管理制度 操作规程 人员素质,软件管理,管理责任,实验室管理层对所有员工和实验室来访者的安全负责，实验室负责人应制定规定和程序，以确保实验室符合国家有关安全要求，并定期检查、维护、更新,实验室主入口应设门禁系统 控制非实验人员进入,实验室人员培训制度,持证上岗 新工作人员经过培训通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作1个月，才能获得上岗证 所有人员每年至少要接受一次新的培训 建立并保存人员培训和考核记录档案,建立实验人员健康档案,定期体检 实验人员血清保存,实验室
11、标准操作程序（SOP）,根据实验对象、生物危害程度评估、研究内容和设备设施等特点，对涉及的任何危险以及如何在风险最小的情况下开展工作的详细作业指导书,安全记录,职业性疾病、伤害和不利事件记录,危害评估记录,危险标识,危险废弃物记录,事件、伤害、事故和职业性疾病的报告,实验室设施设备监测、检测和维护制度,特别关注高效过滤器的检查、维护和更新 生物安全柜检测,高压蒸汽灭菌效果检测: 每使用一次有物理和化学监测,每周一次生物监测 高压蒸汽灭菌器按期检查和验证,作好记录,确保消毒效果和使用安全,临床实验室工作人员安全的一般要求,食物不能存放在血液或其他有潜在传染性的材料存放处,应禁止在实验室工作区内吸
12、烟 工作区内应禁止化妆（手霜除外）和处理隐形眼镜,怎样处理利器,实验室使用的利器应盛放在专用的容器内 一次性注射器针头、安培瓶、微量管使用后及时放入利器盒,Lynda Anold 1992年5月以外科护理学士毕业，当年9月的一天，在为急诊病人用套管针进行静脉输液时，拔出针芯时意外刺伤了手指，93年4月确诊感染了HIV。由她倡导的在全美国掀起了自觉使用安全锐器的运动已经有十余年,应鼓励所有实验室工作人员接受免疫以预防其可能被接触的生物体感染,所有离心机应该有封闭的盖子，旋转时不能掀开,禁止使用口吸吸液 所有样本使用完后应假定含有活性病原体，应在实验室同一建筑内消毒灭菌,达到生物安全后再按感染性废
13、弃物收集处理,标本试管帽子怎样开启,实验室标本离心时,应使用密封的离心机转子、安全的离心杯或管,并只允许在生物安全柜中开启、装载 凝血、生化、免疫等监测标本离心后,试管帽应在生物安全柜中除去,标本应以确保承运人员、公众和接收实验室的安全的方式运送，并遵守法规要求（危险物品运输法规）,实验室内如何消毒,空气用紫外灯或移动的紫外线车 操作台表面用84或含氯消毒液消毒,二、临床实验室生物安全管理措施,临床实验室理化安全准则,临床实验室生物安全防护,临床实验室废物处理通则,2006年09月25日,西安交大电气绝缘教学楼内的实验室突然发生爆炸并起火，正在实验室的兄弟俩不幸被烧伤，其中一人为西安交大在校博士生,2008年3月13日晚上，南京东南大学四牌楼校区动力楼发生特大火灾，过火面积达1000多平方米，有30多个房间被烧毁，包括约10个实验室，多年收藏的学术资料也遭到毁坏,台湾大学地质研究所一间实验室2010年8月因紧急照明灯电源线短路，引发火灾，所幸无人伤亡,电气设备安全准则,连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护 套线，严禁私拉乱扯 接地：仪器应有良好的接地，提高仪器的稳定性 及安全系数,检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换 触电：断电或绝缘脱离 急救,用
