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1、实验一 实验动物的抓取与固定及性别鉴定,一、 实验目的和要求 通过本实验学习和掌握实验动物的抓取固定方法和性别年龄判定方法。 二、 实验材料和用具 实验动物（小鼠）、镊子、酒精棉球、电子天平等,三、实验内容 （一）实验动物的抓取与固定方法 实验人员在进行动物实验时，必须正确抓取动物，以免被动物抓咬伤，或造成动物的伤亡和应激反应。 抓取固定动物必须对各种动物的一般习性有所了解，抓取动物应大胆、准确、迅速、熟练、不可恐吓动物。,1 小鼠的抓取与固定 （1）抓取方法 小鼠性情较温顺，一般不会主动咬人，但抓取不当也易被其咬伤。 习惯用右手者，首先用右手从笼盒内将小鼠尾中部或基部抓住（不可抓尾尖），并提
2、起或放在左手上。,（2）固定方法 徒手固定：右手抓取小鼠尾，将小鼠放在笼盖（或表面粗糙的物体）上，轻轻向后拉鼠尾；然后在小鼠向前挣脱时，用左手拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部，并调整好动物在手中的姿势。 此法常用于灌胃以及肌肉、腹腔和皮下注射等实验。,固定板固定：小鼠麻醉后置小鼠固定板上，取仰卧位，用胶布缠粘四肢，再用针透过胶布扎在板上，从而将小鼠固定在小鼠固定板上。 此法常用作心脏采血、解剖、外科手术等实验。,固定架固定：让小鼠直接钻入固定架里，封好固定架的封口，露出尾巴。 此装置特别适用于小鼠尾静脉注射等。,小鼠固定盒固定,简易固定：进行尾静脉注射或抽血
3、时，如果没有这些固定装置，也可采用一种简易的方法。即倒放一个烧杯或其它容器，把小鼠扣在里面，只露出尾巴，然后用酒精擦拭，暴露血管，注射或采样。 这种烧杯或容器的大小和重量是适当，既能压住尾巴不让其活动，同时起到压迫血管的作用。,2 大鼠的抓取与固定 （1）抓取方法 大鼠不像小鼠那样性情温顺，大鼠牙齿很尖锐，在抓取时要小心被咬，操作者最好戴上防护手套。 张开左手虎口，迅速将拇、食指插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身体中段，并将其保持仰卧位，然后调整左手拇指位置，紧抵在下颌骨上（不可过紧，否则造成窒息），即可进行实验操作。,另一种方法：由助手用左手将动物按住抓起，将食指放在颈背部，
4、拇指及其余三指放在肋部，食指和中指夹住左前肢，分开两前肢举起来，右手按住后肢。 注意：抓取大鼠时，不能捉其尾尖，因为尾尖皮肤易于拉脱，也不能让大鼠悬在空中时间过长，否则会激怒大鼠翻转咬人。,（2）固定方法 徒手固定：用拇指、食指捏住大鼠耳朵颈部皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心，调整好大鼠在手中的姿势即可。 此种固定方法常用做体重小的大鼠灌胃、腹腔注射、肌肉注射和皮下注射的实验操作。,固定板固定：用于手术的大鼠用固定板固定的方法与小鼠相同，但应选择更大些的固定板。 为防治大鼠苏醒时咬伤人或便于颈、胸部等实验操作，应用棉线牵引大鼠两上门齿，固定头部；也可用不同长短的圆柱形玻璃管将大鼠套住，用
5、拧弯的回形针钩在门齿上以固定。 此法多用于心脏采血、解剖、外科手术等实验。,固定架固定：将大鼠固定在固定架内。 此装置特别适用于大鼠尾静脉注射等。,3 豚鼠的抓取与固定法 （1）抓取方法 豚鼠性情温和、胆小，一般不伤人，抓取时不能用大力抓其腰腹，容易造成肝破裂而引起死亡。,依据不同的生理阶段选择抓取方法 抓取幼年的豚鼠时，可用两手捧起来。 抓取较大的豚鼠时，先用手掌迅速扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，以拇指、食指捏住颈部，其余手指握持住躯干，即可轻轻提起。 对怀孕或体重较大的豚鼠，应以左手托其臀部。,豚鼠的抓取方法,（2）固定方法 徒手固定：由助手用左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧，拇指和无名
6、指放在肋部，分别用手指挟住左右前肢，抓起来；然后反转左手，用右手的拇指和食指挟住右后肢，用中指和无名指挟住左后肢，使鼠体伸成一直线；也可坐下来用大腿夹住豚鼠的后肢，右手进行实验操作。,固定板固定：用固定板固定豚鼠，和大鼠、小鼠基本相同，用木制或泡沫固定板和线绳固定。,4 家兔的抓取与固定法 （1）抓取方法 抓取时，轻轻打开兔笼门，不要使兔受惊，然后用右手伸入笼内，从兔头前部把两耳轻轻压于手掌内，兔便卧伏不动，此时将颈背部被毛和皮肤一起抓住提起，并用左手托住兔腹部，使其体重主要落在这只手上。,兔一般不咬人，但其爪锐利，挣扎时极易抓伤操作人员，因此，必须防备其四肢的活动。 特别注意不能只提兔双耳或
7、双后腿，也不能仅抓腰或提背部皮毛，以避免造成耳、肾、腰椎的损伤或皮下出血。,（2）固定方法 徒手固定：由助手用一只手抓住兔颈背部皮肤，另一只手抓住兔的两后肢，牢牢地固定在实验台上。此法适用于腹腔、肌肉等注射。 另一种方法是由助手坐在椅子上用一只手抓住兔颈背部皮肤，同时捏住两个耳朵，不让其头部活动，大腿夹住兔的下半身，用另一只手抓住两前肢将兔固定，此法适用经口给药。,盒式固定：未麻醉的兔可采用盒式固定。这种固定方法常用作采血、注射、观察兔耳血管变化、兔脑内接种等实验操作。,台式固定：将家兔麻醉后置于固定台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔固定台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根
8、粗棉绳牵引兔门齿系在固定台铁柱上。 此法常用于兔静脉采血、注射、测量血压、呼吸等手术操作。,5 犬的抓取与固定法 （1）抓取方法 犬的抓取方法较多。 对未经驯服和调教的圈养犬抓取时，用特制的长柄犬钳夹住犬的颈部，或用长柄铁勾勾住犬颈部项圈，由助手将其嘴缚住。,对经驯服的犬，可从侧面靠近，轻轻抚摸其颈背部皮毛，用手将其抱住，由另一人用布带缚其嘴；或用皮革、金属丝或棉麻制成的口网，套在犬口部，并将其附带结于而后颈部，防治脱落。,扎犬嘴的方法 用长1m左右的绷带兜住犬的下颌，绕到上颌打一个结，再绕回下颌打第二个结，然后将布带引至头后颈项部打第三个结，并多系一个活结。,（2）固定方法 慢性试验中犬的固
9、定方法：将已驯服的犬拉上固定架上，将犬头和四肢绑住，再用粗棉带吊起犬的胸部和下腹部，固定在架的横梁上，即可进行体检、灌胃、取血、注射等试验操作。,急性试验中犬的固定方法：将已麻醉的犬嘴上的绷带解绷，把犬放在实验台上，先固定头部后固定四肢。,头部固定：用特制的犬头固定器。犬头固定器为一圆铁圈，圈的中央横有两根铁条，上面的一根略弯曲，与棒螺丝相连，下面一根平直。固定时先将犬舌拉出，将犬嘴伸入铁圈，再将平直铁条横贯在上、下颌间，然后向下旋转棒螺丝，使弯形铁条压在犬的鼻梁上，将铁柄固定在试验台的铁柱上。,四肢固定：先用粗棉带的一端缚扎于腕关节以上部位，如采用仰卧，可将两后肢左右分开，分别固定于手术台两
10、侧的木钩上。将左右前肢的两条棉带从犬背后交叉经过，分别固定于两侧木钩上。缚扎四肢的结扣方法是在活扣外再打一个活结，便于实验结束后的松解。 固定的姿势一般采用仰卧位和腹卧位，仰卧位常用于颈、胸、腹、股等部位的实验，腹卧位常用于背、脑脊髓的实验。,6 猴的抓取与固定 （1）抓取方法 从笼内抓取猴时，饲养人员应以右手持短柄网罩，左臂紧靠门侧，以防笼门敞开时猴逃出笼外。右手将网罩塞入笼内，由上而下罩捕。在猴被罩到后，应立即将网罩翻转取出笼外，罩猴在地，由罩外抓住猴的颈部，轻掀网罩，再提取猴的手臂反背握住，此时猴便无法脱逃。,（2）固定方法 徒手固定：将猴两前肢反背在其背后，操作者用一只手握着，用另一只
11、手将猴两后肢捉住，即可将猴子固定。,固定架固定：一般是采用“猴限制椅”或者称“猴固定架”进行固定。,（二）实验动物性别的鉴定,1 哺乳类 一般情况下，哺乳类动物性别依据动物的肛门与外生殖器（阴茎或阴道）之间的距离加以区分。 雄性要比雌性的距离更长。,（1）啮齿目 观察生殖器与肛门之间的距离，雌性较雄性近具沟； 观察生殖突起，雄性较大、较圆，雌性较小具裂缝； 仰卧观察乳头，雄性不明显，雌性明显。,（2）兔形目 初生仔兔及开眼仔兔，观察阴部孔洞形状和距离肛门远近 孔洞扁形、大小与肛门相同，距肛门近者为雌性； 孔洞圆形而略小于肛门，距肛门远者为雄性 。,对幼兔可用右手抓住兔的颈背部皮肤，左手以食、中
12、指夹住尾巴，大拇指轻轻向上推开生殖器，局部呈“O”形，下为圆柱体者是公兔； 局部成“V”形，下端裂缝延至肛门者为母兔。 对成年兔可看有无阴囊进行区分公母。,（3）食肉目 新生食肉目动物可用肛门一生殖器距离加以区分。 成年公犬睾丸下降于阴囊中，悬于会阴部下方，阴茎由耻骨下缘朝腹部方向延伸，至后腹壁开口。 母犬的尿生殖道开口于肛门下方，较易观察识别。,（4）灵长目 区分灵长类动物雌雄较为困难。 首先应检查其尿道开口，许多雌性动物有较大的阴蒂，其腹侧形成沟状通向尿道口，而雄性动物的尿道开口在阴茎头上。 触摸阴囊内是否有睾丸是确定其雌雄的最可靠方法。,2 鸟类 禽鸟类在第二性征（肉冠、羽毛、发声）出现
13、前，区分性别极为困难，但可通过孵出时24小时内进行外翻泄殖腔鉴别。 雄性中可观察到微小而能勃起的孔突上有输精管开口，但此法不仅要有丰富的经验，而且准确性常难以保证。 对于有羽色伴性遗传的家禽可通过其孵出时的羽色加以区分。,3 爬行动物 （1）龟类 排泄孔位置及形状可分辨出雌雄：公龟的位置接近尾端，孔形长形。母龟的位置接近腹甲，孔形圆形。 尾部的粗细大小，公龟尾较粗大，母龟较细短。 腹甲是否凹陷，公龟有明显的凹陷， 母龟平坦。,（2）蜥蜴类 色斑、股孔、半阴茎,（3）蛇 公蛇的尾巴较细长，母蛇较粗短。 轻压尾巴基部，公蛇的半生殖器會跑出來。,4 两栖动物,5 鱼类 许多鱼从外形上不易区分其雌雄，
14、但可通过繁殖期的颜色不同及第二性征加以区分。 如麦穗鱼平时体侧呈灰黄色，到了生殖期雄性变成暗黑。 雄性马口鱼一到生殖季节，体色变为红蓝条子相间。,鱼类的第二性征是珠星（又称追星），是一种灰白色结节状的皮肤衍生物，用手抚摸感觉粗糙。一般在繁殖季节出现，雌性机体上出现较多且粗壮，雄鱼少而小。 珠星大多分布在头部吻端或胸鳍上。四大家鱼（草鱼、青鱼、鲢鱼、鳙鱼）的珠星分布在胸鳍上。,（三）年龄的大致判断 1 小鼠 （1）根据形态鉴定日龄 小鼠初生后不同日龄的外观形态特征不一样。,（2） 根据体重鉴定日龄 根据体重鉴定日龄的规律为一般的发育情况。发育的程度是固定的，但时间的长短往往与体格、营养而异，各个
15、品种、品系之间也有一定的差异。 KM小鼠为例,2 大鼠 18日龄以前大鼠的形态特征与小鼠基本一致，可根据形态特征来判断年龄。在无可靠记录资料的情况下，可根据体重来判断大致日龄。 普通级SD大鼠不同数日龄体重见下表,需要指出的是，同一品系大鼠的生长发育受窝产仔、雌鼠哺乳能力、饲料营养水平、管理水平以及个体差异等多种因素的制约，年龄与体重的关系不是绝对的。,3 豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。 年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。,同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须
16、由卡片记录提供准确年龄。,4 家兔 家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。 青年兔门齿洁白，短小，排列整齐； 老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。,白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。 一岁家兔红色与白色长度相等； 一岁以下，红多于白； 一岁以上，白多于红。,还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。 青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。 另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔； 皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。,5 犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。 成年犬42颗牙齿，齿式：2（I3/3C1/1Pm4/4M2/3）=42。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，两个月以后开始由门齿 一犬齿一臼齿顺序逐渐更换为恒齿，810个月齿换齐，但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。,饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。,作 业,（1）简述小鼠的抓取固定方法； （2）简
