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1、第二节 出血性疾病实验诊断临床意义Laboratory Diagnosis and ClinicalSignificance of the Haemorrhage Disease出血、血栓性疾病的检查Examination of Haemorrhage and Thrombosis Diseases一、血管壁检测毛细血管抵抗试验( CRT，90-100mmHg M5 F10)血管壁结构和/功能缺陷：遗传性出血性毛细血管扩张症、过敏性/单纯性/其它血管性紫癜血小板量和/质异常：原发性/继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性/获得性血小板功能缺陷血管性血友病 （v WD)vWF：Ag测定(94.
2、1%32.5%)减低：vWD增高：血栓性疾病 心梗 心绞痛 脑血管病 糖尿病 妊高征 肾小球病6-keto-PGF1a减低：同上 肿瘤转移 周围血管血栓形成 TTPThrombomoduline antigen TM:AgEndothelin-1, ET-1二、血小板数量和功能1、血小板计数 （platelet count, PCT)2、血小板粘附功能（platelet adhesiveness test PAdT)3、血小板聚集功能（platelet aggregation test PAgT)4、血块退缩试验（clot retraction test,CRT)5、血小板相关免疫球蛋白测定6
3、、血小板第三因子测定1.Platelet count参考值:100300x109/L临床意义:减少400x109/L原发性:骨髓增生性疾病：CML 真性红细胞增多症原发性血小板增多症 骨髓纤维化早期 反应性增多:急性感染 急性溶血 某些癌症2. Platelet adhesion test PAdT (黏附率%)原理增高:血栓前状态/血栓性疾病：心梗 心绞痛 糖尿病 脑血管病 妊高征 肾小球肾炎 动脉粥样硬化 肺栓塞 深静脉血栓形成 避孕药减低:vWD 巨大血小板综合征 血小板无力症 尿毒症 AL 肝硬化 MDS 低/无纤维蛋白血症 异常蛋白血症3. Platelet Aggregation
4、Test (PAgT)方法:利用切变力或诱导剂诱导血小板聚集，检测自发性血小板聚集和循环血小板聚集。常用的血小板聚集诱导剂ADP:引起血小板外形改变，GPIIb/IIIa上纤维蛋白原受体暴露，结合纤维蛋白原聚集。血小板表面有三种ADP受体。Col:引起血小板活化、粘附、颗粒释放、聚集。低剂量聚集由释放引起。对ASA敏感。受体有GPIa/IIa、GPVI。胶原粘附需vWF和GPIb。AA:激活血小板，促释放而聚集，通过环氧化酶形成TXA2，对ASA敏感。 Adr:通过TXA2形成而活化磷脂酶c,故可被ASA抑制。不完全抑制GPIIb/IIIa活化和与纤维蛋白原结合。其他诱导剂:凝血酶、TXA2类
5、似物、 PAF、5-HT 以及A23187等。 另外:抗原抗体复合物、纤溶酶、蛋白溶酶、某些病毒、细菌及其产物、血管紧张素、某些肿瘤细胞和颗粒材料也可引起血小板聚集成为诱发血栓形成的病理机制。诱导剂种类选择与血小板先天性/获得性缺陷遗传性或获得性缺陷 ADP Adr Ris血小板无力症（GT） 无反应 无反应 正常巨大血小板综合症(BSS) 正常 正常 无反应血管性血友病 (vWD) 正常 正常 无反应诱导剂种类和浓度选择与抗血小板药物监测抗血小板药物ASAAA 、Col 、ADP抵克力得ADP自发性血小板聚集（SPA）在急性心梗预后判断中的意义方法:全血或PRP在不加诱导剂条件下于370C1
6、000rpm连续搅拌20min。判断:重度 10min内聚集率 20%轻度 20min内聚集率 20%阴性 20min内聚集率95% CD62P CD633%凝血酶活化血小板:糖尿病伴微血管病变、高血压病、冠心病、高脂血症、脑血栓形成短暂性脑缺血发作、脑动脉硬化 CD42a CD42b CD62p CD63 血小板相关疾病巨血小板:综合征（BSS）血小板巨大 CD42a CD42b CD61血小板无力症:（GT）CD41 CD61CD42aCD42b / 血小板群异三、凝血系统检查1、凝血时间内源途径（cloting time,CT)2.部分凝血活酶时间内源途径（active partial
7、thromboplastin,APTT)3.血浆凝血酶原时间测定外源途径（plasmaprothrombin time, PT)4、纤维蛋白原测定（fibrinogen test)5、凝血酶时间测定共同途径（thrombin time )6.复钙交叉试验(cross recalcification test, CRT ) 四. 抗凝血物质检测血浆抗凝血酶活性测定;血浆抗凝血酶抗原测定;血浆蛋白C测定;血浆蛋白S测定等五.纤溶活性与降解产物检测血浆组织型纤溶酶激活物测定;血浆纤溶酶原活性测定;血浆纤溶酶原活化抑制物测定;血浆纤溶酶抗纤溶酶复合物测定;血浆D二聚体检测;血浆纤维蛋白相关肽检测;第三
8、节 一级筛选试试验1、出血时间（bleeding time BT）测定。原理：血流停止时间主要受血小板及毛细血管的影响。方法：出血时间测定器法参考值：6.9 +/- 2.1min 2、凝血时间（Coagulation time,CT）测定原理：血液接触带阴电荷表面（如玻璃、白陶土）激活XIIa，最后使fibrinogen转化为Fibrin.（检查内源性途径）。方法：试管法，3只内径相同的小试管（内径8cm）抽血液入针筒时计时。每管注入血液1ml,37水箱，4分钟后每30s观察一次，血液不动为止（管），以二管凝血时间为准，第三管可做为血块收缩用。参考值：412min3. 血小板计数4、血块凝缩试
9、验（CRT） 原理:血液凝固 血小板收缩酶 血块收缩、血清析出血块凝缩影响因素:) 血小板量和质) FI 浓度3）FXIII的水平4）红血球的比积方法：静脉采用1ml，置于内径8mm，干试管内，加塞静止37水浴箱中, 于1/2h、1h及24h分别观察血块凝 缩情况正常于1/21h开始，24h凝缩完全。结果判断（1）完全凝缩:血块与管壁分离，血清析出1/21/3 （2）部分凝缩:血块大部分凝缩，血清析出1/3 （3） 凝缩不良:血块略有凝缩，少量血清析出（4） 不凝缩:血块维持原样，无血清析出5毛细血管脆性试验（Capillary resistance test）一级筛选试验临床意义及应用参考范
10、围 实验名称 可能原因1出血器法4.8-9 BT 血管2试管法412min CT 凝血因子3100300109/L PC 血小板4完全收缩/24h CRT 抗凝物质510个出血点以内 Capillary Resist Test6比服药前延长2以内 Aspirin耐量必要时测血小板粘附试验或聚集试验 第四节 二级筛选试试验1、凝血酶原时间测定（Prothrombin time, PT）原理：血浆组织凝血活酶（III）+ 钙 凝血时间 外源途径方法：Quik氏法（现已用仪器取代）。每次做正常对照。参考值：1214s或大于正常对照3s以上为异常;PTR 1.0+/- 0.5;INRISI 1.0+/- 0.12、部分凝血活酶时间（Active partial thromboplastin time, APTT)。原理：血浆脑磷脂白陶土激活XIIXIIa此试验主要测定内源系统第一阶段有无凝血障碍。参考值：35s45s，患者结果较正常对照延长10s有意义 3、凝
