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1、T100 Thermal Cycler 中文操作手册T100 Thermal Cycler中文操作手册手册内容1 工作环境2 T100 Thermal Cycler的介绍3 T100 Thermal Cycler 创建、编辑和储存程序4 运行程序5 管理文件夹和反应程序文件6 工具7 仪器日常维护1 工作环境1.1 工作温度 15-311.2 工作和存储湿度20-80%1.3 工作电源 100240 VAC (10%), 5060HZ.1.4 PCR许可证有2 T100 Thermal Cycler的介绍2.1 T100 Thermal Cycler 各部分简介 T100 Thermal Cy
2、cler具有96孔的反应模块，可以使用标准96孔板、联管或单管等多种耗材。仪器支持的样品反应体积为1-100ul, 推荐的反应体积为15-50ul。仪器主要包括以下几个部分：n 加热模块：放置装有样品的标准96孔板、联管或单管n 热盖：加热样品管的顶部，防止样品蒸发和冷凝n 触屏：用于反应程序的编辑、修改和运行，实时显示运行程序n USB接口：外接USB，导出数据n LED指示灯：仪器正常运行时，指示灯亮n 散热口：提供通风，用于仪器的快速升温和降温2.2 触屏仪器开机后，显示触屏界面，界面提供仪器的名字，日期和时间，触屏上的四个按键分别代表的意义如下：n New Protocol：创建一个新
3、的反应程序n Saved Protocols：查看、编辑、运行储存的程序n Incubate：可长时间运行一个恒定的温度，与水浴锅功能相似n Tools：设置、仪器自检、仪器信息、软件升级2.3 放置样品 向上打开仪器热盖，将样品管放到相应的位置，合上热盖。热盖的主要功能是在程序运行时，加热样品管的顶部，防止样品蒸发和冷凝。放置样品管时，要确保管子与反应模块完全接触，且反应模块必须完全干净。3 T100 Thermal Cycler 创建、编辑和储存程序3.1 创建新的程序，点击触屏界面的“New Protocol”按钮，进入编辑界面。3.2 也可选择编辑储存的程序，点击触屏界面的“Saved
4、 Protocols”按钮，选择一个程序，点击“Edite”，进入编辑界面。3.3 新的程序编辑界面打开，如图所示3.4 按照需要的实验程序，首先设置反应体积，在Volume 中输入体积数，可输入范围为1-100ul, 推荐反应体积为15-50ul。其次设置热盖的温度，在Lid中输入温度，可输入范围为40-110，推荐温度为105。最后，点击反应程序的每一步时，显示为绿色，分别设置该步反应的温度和时间。点击温度按钮，如95，出现数字键盘，输入需要的温度，点击“OK”，确认。同样的操作编辑时间。“GOTO”可以设置反应的循环数，如“34X”，即共35个循环，也可设置循环的起始反应步骤，如“Ste
5、p2”,即循环反应从第2步开始至第4步结束，箭头指示的过程。3.5 插入新的反应步骤，点击一个步骤，显示为绿色，点击“Insert”将在该步骤后面插入新的反应步骤。在“Insert Step”界面选择需要插入反应步骤的类型，“Temperature”即可插入温度反应, “Gradient”即可插入温度梯度反应, “GOTO”即可插入PCR循环反应。 点击“Delete”,即可删除选择的步骤。3.6 添加或删除温度梯度。选择一个反应步骤，点击“Options”, 进入步骤优化窗口。选择“Gradient”,在“Back row”输入温度梯度的最高温度，在“Front row”输入温度梯度的最低温
6、度，右边会显示从A到H每一行的温度值。注意：该仪器温度梯度跨度范围为1-25。点击“OK”，返回程序主界面，最低和最高温度的温度梯度显示在反应步骤中，可以点击温度，直接修改温度梯度，不用再进入“Option”。3.7 温度的递增、时间的延伸和改变升温速率。选择一个反应步骤，点击“Options”, 进入步骤优化窗口。每一个实验步骤都包括“Increment”、“Extend”、“Ramp Rate”,“Increment”输入X，即每个循环后温度增加X，“ Extend”输入Y，即每个循环后时间延长Y秒，“Ramp Rate”输入Z，即升温速率为Z。点击“OK”，确认。3.8 改变“GOTO”
7、参数。“GOTO Step”表示多个步骤的重复循环反应。选择一个“GOTO Step”，点击“Step”按钮，进入数字键盘，修改数字为X，即可决定循环反应的起始步骤为X，如“Step2”,即循环反应从第2步开始至第4步结束，箭头指示的过程。点击“X”按钮，进入数字键盘，修改数字为Y，即表示再重复Y个循环，总循环数为Y+1, 如“34X”，即共35个循环。3.9点击“Run”，无需储存，直接运行编辑好的反应程序。也可点击“Save”按钮, 进入储存界面，在Folder后输入或选择储存程序的文件，在Name后输入反应程序命称，点击“Save”，返回程序主界面。然后点击 “Run”，运行程序。 4
8、运行程序4.1 开始运行程序，有如下方法：l 创建新的程序，点击“Run”l 从“Saved Protocols”中选择程序，点击“Run”l 从“Saved Protocols”中选择程序，点击“Edite”,修改后，点击“Run”前面已经详细介绍了创建和编辑新的反应程序，下面介绍从“Saved Protocols”中选择程序，运行。首先从开机界面中，点击“Saved Protocols”，进入选择界面。其次从“Folders”文件夹中选择文件，如“MAIN”。再次选择“Files”文件中的反应程序，如“ISCRIPT”，“Preview”中会显示所选程序的详细设置，包括每一步的反应温度和时
9、间等信息。选择好程序后，点击“Run”，出现对话框，询问是否修改反应体积，点击“OK”直接运行程序，或者点击“Volume”修改体积后，再运行程序。 程序运行后，运行进程可以通过两种状态显示，分别是“Status”和“Clock”。“Status”状态显示整个实验程序的每个步骤，以及正在进行的步骤。“Clock”状态显示整个实验程序的剩余时间。点击“View Status”和“View Clock”，可在二者之间进行自由切换。4.2 暂停和恢复程序运行一个PCR反应程序允许暂停的，暂停时，加热模块会维持在当前实验步骤的反应温度，热盖也维持原本的温度，直到反应程序恢复继续运行。当正在升温或降温时
10、，程序暂停，仪器会继续升温或降温，直到到达设定的温度，才会保持不变。在“Status”状态时，点击“Pause”按钮，反应程序暂停。点击“Resume”按钮，反应程序继续运行。4.3 跳过反应程序中的某一步，可以缩短反应时间。在在“Status”状态时，点击“Skip Step”按钮，即可跳过当前步骤，多次点击“Skip Step”按钮，即可跳过多个步骤。4.4 取消反应程序。当程序取消时，加热模块立刻停止温度加热。不要立即关闭仪器电源，仪器需要时间使加热模块降温。在在“Status”状态时，点击“Cancel”按钮, 选择“Yes”确认。4.5 孵育功能。开机主界面，点击“Incubate”
11、按钮，进入孵育功能界面。编辑“Block temperature”，输入温度值，即设置孵育温度。编辑“Hold time”，输入时间，即设置孵育时间，也可设为无穷时间。编辑“Lid temperature”，输入温度值，推荐105保持热该温度，防止样品蒸发或冷凝。点击“Run”，运行孵育程序。结束孵育功能时，点击“Cancel”。5 管理文件夹和反应程序文件 开机进入主界面，点击“Saved Protocols”，进入选择界面，包括以下文件夹：l MAIN folder：仪器自带的一些标准反应程序，可以编辑、删除和重命名l RECENT folder: 储存的是最近使用过的20个程序l CUS
12、TOM folder：可以设置为实验室成员的个人文件夹l USB folder：外接SUB里的反应程序5.1 新建文件夹，从“Saved Protocols”选择界面，点击“Folder Options”，选择“New”，输入8个字节的名称，点击“OK”，完成。5.2 复制文件夹或文件，从“Saved Protocols”选择界面，选择文件夹或文件，点击“Folder Options”或“File Option”，选择“Copy”，最后选择文件或文件夹新的储存位置，点击“Save”，即可完成。5.3 删除文件夹或文件，从“Saved Protocols”选择界面，选择文件夹或文件，点击“Fol
13、der Options”或“File Option”，选择“Delete”，即可完成完整的文件夹或单个文件的删除。5.4 重命名文件夹或文件，从“Saved Protocols”选择界面，选择文件夹或文件，点击“Folder Options”或“File Option”，选择“Rename”，输入新的名称，点击“OK”，确认。6 工具开机进入主界面，点击“Tools”，进入选择界面，包括以下文件夹：l Settings: 仪器的系统设置l Self-Test：仪器自检设置，检测各部件的功能l Logs：观察反应运行程序界面，可以被拷贝到USBl About：观察软件的版本和仪器的机身号l Up
14、date Firmware：升级仪器的版本l Service Login：可以从Bio-Rad厂家获得帮助服务6.1 仪器的系统设置，从“Tools”界面，选择“Settings”，进入界面，会看到仪器的系统设置，包括“Cycler name”设置仪器的名称，“Date”设置日期年月日等信息，“Time”设置详细时间信息，“Display brightness”设置显示屏亮度，“sample volume”设置默认的样反应体积，“Standby delay”设置一段时间后，为了节约电资源，仪器会进入待机状态，“End of run beep”设置运行结束后，仪器会发出声音，提醒用户。6.2 仪
15、器自检功能，从“Tools”界面，选择“Self-Test”，点击“Start”，仪器运行自检程序，检测仪器各部件的性能。6.3 升级仪器版本，从“Tools”界面，选择“Update Firmware”，点击“Start”，仪器运行升级程序，可升级到最新版本。6.4 观察软件的版本和仪器的机身号，从“Tools”界面，选择“About”，即可看到仪器版本，机身号和仪器运行的总时间。7 仪器日常维护l 本机适用于实验室任何部位使用，应远离易燃易爆物品，远离水源和离心机等，避免将液体渗入仪器内部，保持仪器工作环境的稳定性l 由于本机采用半导体双向控温技术，由机器内风机散热，故不得堵塞仪器两侧及底部的通风口，并应远离热源，保持良好的通风。l 正确的使用环境温度 432，相对湿度 20%80%，尽量避免使用 4过夜，以免影响仪器的寿命。l 本机采用开关电源，适用电压范围宽，交流电压100240V之 间均可正常工作，频
