黄曲霉检验方法标准

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1、黄曲霉检验方法标准 黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香 豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus) 寄生 曲霉 (a.parasiticus) 产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中 出现黄曲霉毒素的机率最高。B1 是最危险的致癌物，经常在玉米， 花生，棉花种子，一些干果中常能检测到。它们在紫外线照射下能产 生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为 B 族和 G 族两大类及其衍生 物。AFT 目前已发现 20 余种。AFT 主要污染粮油食品、动植物食品 等；如花生、玉米，大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、 水产品等均有黄

2、曲霉毒素污染。 其中以花生和玉米污染最严重。 家庭 自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素， 尤其是高温高湿地区的粮油及制 品种捡出率更高。 常用检测方法对比： 1免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-HPLC 法 黄曲霉毒素免疫亲和柱-高效液相色谱法比传统的 HPLC 法更加 安全,可靠,灵敏度和准确度高.它采用单克隆抗体免疫技术,可以特效 性地将黄曲霉毒素或其他真菌毒素分离出来,分离效率和回收率高， 是一种准确定性定量的首选方法。 分析原理试样中的黄曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液经过 过滤,稀释后,用免疫亲和柱净化,以甲醇将亲和柱上的黄曲霉毒素淋 洗下来,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高测定

3、灵敏度,然后将甲醇- 黄曲霉毒素淋洗液的一部分注入HPLC中,对黄曲霉毒素B1,B2,G1,B2 分别进行定量分析.免疫亲和柱是用大剂量的黄曲霉毒素单克隆抗体 固化在水不溶性的载体上,然后装柱而成.该方法的测定范围 0-300ug/kg. 2酶联免疫吸附法（ELISA 法） 原理:将已知抗原吸附在固态载体表面,洗除末吸附抗原,加入一 定量抗体与待测样品(含有抗原)提取液的混合液,竞争培养后,在固相 载体表面形成抗原抗体复合物.洗除多余抗体成分,然后加入酶标记的 抗球蛋白的第二抗体结合物,与吸附在固体表面的抗原抗体结合物相 结合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物发生降解反应,产生有色 物质,

4、通过酶标检测仪测出酶底物的降解量,从而推知被测样品中的抗 原量. ELISA 方法通常用于大规模的筛选，由于其高同量的特点，是一 种性价比很高的测试方法。 同科研究所提供部分标准：同科研究所提供部分标准： GB-T 18980-2003 乳和乳粉中黄曲霉毒素 M1 的测定 免疫亲和层析 净化高效液相色谱法和荧光光度法 GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效 液相色谱法和荧光光度法 GB/T 23212-2008 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、 M2 的测定 液相色谱-荧光检测法 SN/T 1664-2005 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M1

5、、B1、B2、G1、G2 含 量的测定 NY/T 1664-2008 牛乳中黄曲霉毒素M1的快速检测 双流向酶联免疫 法 GB 5413.37-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定 ISO 17375-2006 动物饲料.黄曲霉毒素 B测定 BSENISO 17375-2006 动物饲料.黄曲霉毒素 B测定 DINENISO 17375-2006 动物饲料.黄曲霉毒素 B1 测定 NF V18-200-1980 饲料.黄曲霉素 B1 含量的测定 BS 5766-7-1988 动物饲料分析方法第 7 部分:黄曲霉毒素 B1 测定 ISO 14675-2003 牛奶和牛奶

6、制品.竞争酵素免疫分析的标准化描述指 南.黄曲霉毒素含量的测定 ISO 6651-2001 动物饲料 黄曲霉素 B1 的半定量测定 薄层色谱法 DINENISO 14501-2008 乳和乳粉 黄曲霉素M1含量的测量 免疫亲 和层析净化高效液相色谱法 BSENISO 14675-2003 牛奶和牛奶制品.竞争酵素免疫分析的标准化 描述指南.黄曲霉毒素M$1 含量的测定 ISO 14501-2007 牛奶和奶粉.黄曲霉毒素 M含量的测定.用免 疫亲和色谱法提纯并用高效液相色谱法测定 ISO 14674-2005 牛奶和奶粉.黄曲霉毒素 M1 含量的测定.免疫亲和色 谱法清洁和薄层色谱法测定 BS

7、 ISO 14674-2005 奶和奶粉.黄曲霉毒素 M1 含量的测定.免疫亲和 色谱法清洁和薄层色谱法测定 ENISO 14501-1998 奶和 奶粉.黄曲 霉毒素 m1 含量 的测定.用 immunoaffinitiy 色谱法提炼和用高效液体色谱分析法测定 ISO 14501-1998 牛奶和奶粉-黄曲霉毒素M1含量测定-通过免疫相似 性色谱分离法进行清除和通过高性能液体色谱分离法进行测定 BSENISO 14501-1999 奶和奶粉.黄曲霉毒素 m1 含量的测定.用免疫 亲和色谱法提炼和用高效液体色谱分析法测定 DINENISO 14501-1999 奶和奶粉.黄曲霉毒素 m1 含量的测定.用 immunoaffinitiy 色谱法提炼和用高效液体色谱分析法测定 BSEN14123-2007 食品.榛子、花生、阿月浑子、无花果和辣椒粉中 黄曲霉毒素B1、B2、G1 和 G2 的总数以及黄曲霉毒素 B1 的测定.带 支柱衍生和免疫亲和柱层净化的高效液相色谱法 DB37/T 930-2007 花生防黄曲霉毒素污染操作技术规程 DB 37 T1457-2009 花生黄曲霉毒素污染田间检测技术规程 同科研究所