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1、实验诊断学内容,临床血液学检验 临床检验 临床生化检验 临床免疫检验 临床微生物检验,临床生化检验概述,临床生物化学检验的定义 临床生物化学检验学习目的和方法 临床生物化学检验检测应用 临床生物化学检验的影响因素,通过测定组织、体液相关代谢物质与量的改变,疾病状态下,生物化学病理性变化的基础理论,1,2,3,4,为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。,揭示疾病变化和药物治疗对机体生物化学过程和组织、体液成分的影响,临床生物化学检验定义,人体 正常 的生 物化 学代 谢基 础上,5,学习目的及方法,目的 开申请单 看检验报告 综合分析,诊
2、断及鉴别诊断,方法 what? how? when?,监测疾病的病情好转、恶化、缓解或复发等,为某些疾病的早期诊断提供筛选试验,诊断特异性疾病,根据发病机制,建议合理的治疗,揭示疾病基本原因和机制,临床生物化学检验 实验数据的作用,治疗药物监测,辅助评价治疗效果,遗传病产前诊断,降低出生缺陷病的发病率,临床生物化学检验应用,病理性因素 生物学因素 方法学因素 误差(随机误差、系统误差) 方法的局限性,标本因素 血清/血浆 静脉/动脉/末梢血 离体后标本质量 (时间、部位、抗凝剂、放置时间、溶血、脂血等),影响检测结果的因素,年龄、 性别、体型、种族、采血时间、季节变化、海拔、情绪、运动、妊娠、
3、生活方式、采血体位改变等,生物学因素,饮食、药物,影响检验结果的因素,某些物质在红细胞内外液中的浓度 (单位:酶用U/L,其他为mmol/L或mmol/L),第六章 肝脏病常用实验室检测,本章主要内容,概述(了解) 肝脏病常用的实验室检查项目(掌握) 常见肝脏病检测指标变化特点(熟悉) 常见肝脏病检查项目的合理选择与应用(熟悉),肝脏的基本功能,物质代谢功能 生物转化功能 排泄分泌功能,第一节 肝脏病常用的实验室检查项目,蛋白质代谢检测 胆红素代谢检测 胆汁酸代谢检测 血清酶检测,本节内容,血清总蛋白 清蛋白、球蛋白及其比值 前清蛋白 血清蛋白电泳,蛋白质代谢功能检测,一、血清蛋白测定,总蛋白
4、 (serum total protein,STP)是血清所含各种蛋白质的总和,包括清蛋白(白蛋白) (albumin,Alb)和球蛋白 (globulin,G) 常用双缩脲法检测血清总蛋白,用溴甲酚绿法测定血清清蛋白,总蛋白减去清蛋白即为球蛋白,再计算出A /G 比值,肝脏合成,总蛋白,清蛋白,球蛋白,其他球蛋白,B淋巴细胞、浆细胞 单核-吞噬细胞产生, 球蛋白,STP 6080g/L Alb 4055g/L G 2030g/L A/G 1.52.5: 1 影响因素 a. 年龄 b. 剧烈运动 c.体位 d.溶血 e. 脂血,参考值范围,1. 高蛋白血症:G所致,STP80g/L,G35g/
5、L 慢性肝病 M蛋白血症 自身免疫性疾病 慢性感染 2.STPAlb 各种原因引起的血液浓缩,临床意义,3.低蛋白血症:Alb所致 ,STP60g/L,Alb 25g/L 合成减少、摄入不足、丢失过多 消耗增加、血液稀释 临床上出现水肿、胸水、腹水 4血清球蛋白浓度降低 5A/G减低或倒置,二、血清蛋白电泳,原理:蛋白质在碱性溶液中带负电荷,依据所带电荷多少及分子量不同,在电场中可分为 Alb、1、2、 、至少五条区带(醋膜) 。,正常图谱 肾病综合征,肝硬化,肝硬化(-桥) 肝硬化(不典型-桥),血清电泳图型,多发性骨髓瘤,多发性骨髓瘤IgG型 多发性骨髓瘤IgA型,血清电泳图型,1慢性肝病
6、:A 、1、2、 2M蛋白血症:A, 3肾病:A、2、 4炎症型:1、 2 、 ,临床意义,肝细胞合成,电泳中在清蛋白前方而得名 是载体蛋白,与甲状腺素结合,运输维生素A,半衰期短,是肝损早期灵敏指标 参考值:280360mg/L(免疫比浊法),前清蛋白(prealbumin, PA),1. 降低:肝炎、肝硬化、肝癌、梗阻性黄疸、 慢性感染、恶性肿瘤晚期、营养不良 2. 增高:Hodgkin病,临床意义,急性时相反应蛋白,急性时相反应蛋白(acute phase reaction protein, APRP) 在急性炎症时,血浆蛋白质如1-抗胰蛋白酶、 1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、C
7、4、 C3、纤维蛋白原和C-反应蛋白显著升高或升高 而前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度出现相应 下降,这些血浆蛋白质统称急性时相反应蛋白,APRP的机制 对炎症的一般反应,非特异性的反应 损伤部位释放的细胞因子,引发肝细胞中上述蛋白 质合成量的改变 正性APRP是机体防御机制的一个部分 负性APRP此时合成减少,可为合成正性APRP提供更 多的氨基酸原料,APRP的时相 C-反应蛋白首先升高 12小时内1-酸性糖蛋白也升高 然后1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白 原升高 最后是C3和铜蓝蛋白升高 通常在25天内这些APRP达到最高值,APR的临床应用 监测炎症发生过程以及观察治疗效果,胆红
8、素检测,定义:是血红蛋白及其他血红素蛋白中的血红素在巨噬细胞或其他网织内皮细胞及肝细胞中的代谢产物。 意义:是临床上判定黄疸的重要依据,也是肝功能的重要指标。,1.胆红素在单核吞噬细胞中的生成 2.胆红素在血液中的转运 3.肝对胆红素的摄取和转化 4.胆红素的排泄,胆红素的正常代谢通路,(1020%),5%,胆红素正常代谢过程,95%,1. 非结合胆红素 (unconjugated bilirubin,UCB) 2. 结合胆红素 (conjugated bilirubin,CB),胆红素类型,非结合胆红素:未经肝细胞转化处理的胆红素,包括:游离胆红素、血中与蛋白质结合的胆红素、-胆红素;具亲脂
9、疏水的性质。 结合胆红素:在肝细胞内经过生物转化与葡萄糖醛酸、硫酸结合而形成的胆红素;具亲水疏脂的性质。,结合胆红素与未结合胆红素,Indirect bilirubin(IBIL):与重氮试剂反应缓慢,必须加入乙醇后才表现出紫红色反应的胆红素,包括:除-胆红素以外的未结合胆红素。 Direct bilirubin(DBIL):与重氮试剂呈现快速直接的化学反应的胆红素,包括:结合胆红素, -胆红素。,间接胆红素与直接胆红素,高胆红素血症 胆红素生成过多 肝细胞对胆红素的摄取、转化和排泄障碍 肝外胆红素排泄障碍,(二)胆红素代谢紊乱与黄疸,黄疸的类型,根据肉眼可否见到黄染现象分为: -显性黄疸和隐
10、性黄疸 根据发病原因可分为: -溶血性、肝细胞性和梗阻性黄疸 根据病变部位可分为: -肝前性、肝性和肝后性黄疸 根据血中升高的胆红素的类型分为: -高未结合胆红素性黄疸及高结合胆红素性黄疸,1. 胆红素形成过多-溶血性黄疸 代谢特点: 血中TB升高, UCB含量增高。 UCB不能由肾小球滤过,尿中无胆红素排出。 粪便排出的胆素原增多,粪便颜色加深。 尿中排出的胆素原相应增加。 -高未结合胆红素血症,2. 肝细胞处理能力下降-肝细胞性黄疸 代谢特点: 血中两种胆红素含量都增高。 尿中出现胆红素。 CB在肝内生成减少,粪便颜色变浅。 尿中胆素原含量正常或轻度增加。 -高未结合和结合胆红素血症,3.
11、 胆红素排泄障碍-阻塞性黄疸 代谢特点: 血中TB、CB含量增高,CB占TB的50%以上。 尿中出现胆红素。 粪便颜色变浅或呈灰白色。 尿中胆素原变少。 -高结合胆红素血症,新生儿生理性黄疸的成因,红细胞破坏过多。 肝细胞内YZ蛋白少,肝细胞摄取UCB的能力不足。 肝细胞内胆红素葡萄糖醛酸基转移酶生成不足,CB生成少。 肝细胞胆汁分泌器发育不完善,对肝胆汁分泌的潜力不大。 母乳中含有孕二醇,对葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作用。,参考值范围,STB:3.417.1mol/L CB: 06.8mol/L UCB:1.710.2mol/L CB/STB20%,1.判断有无黄疸及其程度:隐性黄疸:1734
12、 mol/L 轻度黄疸:34170 mol/L 中度黄疸:170340 mol/L 重度黄疸:340 mol/L,2判断黄疸类型: 阻塞性黄疸:342mol/L, STB CB,CB/STB0.50 肝细胞性黄疸:17.1171mol/L, CB UCB, CB/STB 0.20.5 溶血性黄疸:85.5mol/L, STB UCB, CB/STB0.20,正常人及三种黄疸胆红素检查结果,血清胆红素 尿二胆 CB UCB CB/STB 尿胆原 胆红素 正常人 06.8 1.710.2 20% () (-) 溶血性黄疸 50% (+),胆汁酸(bile acid, BA)是胆汁的主要成分,肝脏以
13、胆固醇为原料合成BA。 BA能促进脂类的消化吸收,调节胆固醇的代谢,肝脏合成胆汁酸是胆固醇从体内清除的重要途径。,胆汁酸代谢检查,2. 胆汁酸代谢,牛磺酸,3. 临床意义,(1) TBA(酶法) : 0-10umol/L (2)TBA增高: 肝细胞损害 胆道梗阻、门脉分流 生理性增高,血清酶检查,肝脏含有丰富的酶类,酶蛋白约占肝脏总蛋白的2/3。 有些酶具有器官特异性,测定血清中的酶活性或含量可用于诊断肝胆疾病。,肝脏疾病血浆酶异常,反映肝脏合成的酶:胆碱酯酶(cholinesterase,ChE) 反映肝细胞损伤的酶 丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT
14、) 门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST) 谷氨酸脱氢酶(glutamine dehydrogenase,GLDH或GDH) 反映阻塞性疾病的酶 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP) -谷氨酰基转肽酶(- glutamyl transferase,GGT) 反映肝纤维化的酶 单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO) -脯氨酰羟化酶( - Proline hydroxylase),丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT) 主要分布于肝脏,其次是骨骼肌、肾脏、心肌等组织。存在于
15、肝细胞浆。 天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST) 主要分布在心肌,其次是肝脏、骨骼肌和肾脏等组织。存在于肝细胞线粒体。 参考值范围:040U/L,血清氨基转移酶(aminotransferase),1.急性病毒性肝炎:ALT与AST均升高,DeRitis1 2.慢性病毒性肝炎:ALT与AST正常或轻度升高,DeRitis1 。若DeRitis1,提示慢性肝炎转为活动期。 3.非病毒性肝炎:ALT与AST正常或轻度升高,DeRitis1,其中肝癌DeRitis3。 4.胆汁淤滞:ALT与AST正常或轻度升高 5.其他 :皮肌炎、进行性肌萎缩、胰腺炎等轻度增高,临床意义,酶胆分离 现象,急性重症肝炎时,肝细胞破坏严重, 酶先升高(ALT、AST)后降低,而胆红 素进行性升高,提示预后不佳,存在肝、骨、肠、肾、胎盘等,随胆汁排出体外 血中大部分来源于肝脏和骨骼,常作为胆汁淤积和肝脏疾病和骨骼疾病的酶学指标。 生理情况下,ALP活性与骨生长、妊娠、成长、