骨炎痛定方对实验性兔膝骨关节病血清中no和sod含量的影响

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1、湖北中医学院 硕士学位论文 骨炎痛定方对实验性兔膝骨关节病血清中NO和SOD含量的影响 姓名:梁平 申请学位级别:硕士 专业:中医骨伤科学 指导教师:陈建锋 20061020 郑重声明 本人的学位论文是在导师指导下独立撰写并完成的,学位论文没 有剽窃、抄袭、造假等违反学术道德、学术规范和侵权行为,本人愿 意承担由此而产生的法律责任和法律后果,特此郑重声明。 笑钟 日梁蚴 者 1 临 年 、又 论 加 位学 中文摘要 【目的】 本文通过对实验性兔膝骨关节病模型给予不同剂量的骨炎痛定方进行治疗, 并以疗效肯定的芬必得作为阳性对照组,检测兔血清相关指标,同时对关节软骨 作免疫组化的病理切片分析,初步

2、明确该方对膝关节病的作用机理,为该方治疗 膝骨关节病临床合理用药提供科学的理论依据。我们本着中医的补肾柔肝,活血 止痛,舒风通络的治疗原则,用骨炎痛定方中药治疗。检测相关指标来探讨骨炎 消痛方对膝骨关节病的作用机理,为深入研究提供实验依据。 【方法】 采用随机、平行对照的方法将3 0 只4 - 1 0 月龄健康新西兰大白兔分为五个组, 每组6 只,正常生理盐水组( A ) ,模型生理盐水组( B ) 、模型中药中剂量组( C ) 、 模型中药高剂量组( D ) 、阳性对照组( E ) ,按照日本康彦等标准造模方法,在 兔膝骨关节腔内注射1 6 木瓜蛋白酶0 5 m l ,分别于实验的第1 、4

3、 、7 日注入兔 膝关节中,连续注射3 次。建立膝骨关节病模型,于末次注射后3 天灌胃,A 、 B 组给予灌服生理盐水1 5 m l k g 。1 d ,C 、D 分别给予中药灌胃,按人兔折算后给 予中剂量组5 9 9 k g - l d 、高剂量组1 1 8 9 k 9 1 d ,E 组给予以纯蒸馏水制 成4 m g m l 。浓度的芬必得混悬液1 5 m l k g 1 d 1 。给药6 周后用5 0 m l 注射器一I i , 脏 采血,离心后取动物血清,取血后处死动物取膝关节软骨及滑膜。检测血清中一 氧化氮( N O ) 的含量,超氧化物歧化酶( S O D ) 的活性。 【结果】 1

4、 骨炎痛定方中高剂量组均能较显著改善实验性兔膝骨关节病的膝关节功 能活动,芬必得组也能较明显的改善实验性兔膝骨关节病的膝关节功能活动。 2 模型生理盐水组血清N O 含量高于正常生理盐水组,骨炎痛定方可降低 血清中N O 含量水平,中药中高剂量组及阳性组与模型生理盐水组有显著性差异 ( P 0 0 5 ) 3 模型生理盐水组血清S O D 活性显著降低,骨炎痛定方能提高实验性兔膝 骨关节病血清中S O D 活性,中药中剂逞组作用优于阳性组( P 0 0 5 ) 。 4 骨炎痛定方可使实验件兔膝骨关节炎病软骨组织病理形态及超微结构发 生明显改善。 【结论】 骨炎痛定方能明显地降低实验性兔膝骨关节

5、病血清中N O 含量及提高S O D 活性,且其调节作用明显优于阳性对照组,其对膝关节病的作用机制可能是通过 调节血管舒张因子,减轻自由基损伤、降低血清透明质酸、增强关节软骨及滑膜 中转化生长因子的表达而达到治疗膝骨关节病的作用。 【主题词】 骨关节病机制中医药治疗 动物实验疗效 A b s t r a c t 【o b j e c t i v e T oc l a d f yt h em e c h a n i s m so f “G uY a nT o n g D i n gF a n g ”a n dp r o v i d et h e o r a t i c e v i d e n c

6、 e sf o rc l i n i c a Ju s et ot h eo s t e o a n h r o p a I h yo fk n j o i n t ,t h i sa r t i c l eu s e sd i f f e r e n ta m o u n t o f G ut ot r e a lr a b b i t sw i t he x p e r i m e n t a lo s t e o a r t h r o p a t h yo fk n e ej o i n t A n o t h e rg r o u po f r a b b i t sw i t ho

7、 s t e o a r t h r o p a t h yo fk n e ej o i n tt r e a t e db yF e n b i ds e i v ea sp o s i t i v ec o n t r 0 1 I tw i l l c h e c kt h er e l a t e di n d e x e so fr a b b i ts e n J ma n du s et h ei m m u n o h i s t o c h e m i s t r ym e t h o dt op e r f o r m p a t h o l o g ya n a l y

8、s i st ot h ec a r t i l a g eo ft h ek n e ej o i n t M e t h o d s T h i r t yh e a l t h y4 - 1 0m o n t h so l dN e wZ e a l a n dr a b b i t sa t ed i v i d e di n t of i v eg r o u p s w i t he a c hg r o u ps i xr a b b i t su s i n gr a n d o ma n dp a r a l l e lc o n t r o lm e t h o d s T

9、 h e ya r en o r m a l s a l i n eg r o u p ( A ) 、n o r m a ls a l i n em o d e lg r o u p ( B ) 、m e d i u ma m o u n tC h i n e s et r a d i t i o n a l m e d i c i n em o d e lg r o u p ( C ) 、h i g ha m o u n tC h i n e s et r a d i t i o n a lm e d i c i n em o d e lg r o u p ( O ) 、 a n dp o

10、s i t i v ec o n t r o lg r o u p ( E ) T h eo s t e o a r t h r o p a t h yo fk n e ej o i n tm o d e li sb u i I t a c c o r d i n gt ot h eJ a p a n e s eK a n g Y a ns t a n d a r d :0 5 m l1 6 P a p a i ni si n j e c t e dt ot h e k n e ej o i n tc a v i t yo fr a b b it sa tf i r s t 、4 “a n d

11、7 “d a yo ft h ee x p e r i m e n tr e s p e c t i v e l y w h i c hi sp e r f o r m e dt h r e et i m e sc o n t i n u o u s l y T h r e ed a y sa f t e rt h ef i n a li n j e c t i o n , s t o m a c hp e r f u s i o ni sc a r r i e do u t :g r o u p ( A ) a n d ( B ) u s e l 5 m l - k g “d n o r m

12、 a ls a l i n e w h i l eg r o u p ( C ) a n d ( D ) u s eC h i n e s et r a d i t i o n a lm e d i c i n e A f t e rc o n v e r t i n gt h ea m o u n t b e t w e e nh u m a na n dr a b b i t 。5 9 9 k g dC h i n e s et r a d i t i o n a lm e d i c i n ei sg i y e nt og r o u p ( C ) w h i l e1 1 8 9

13、 k g dC h i n e s et r a d i t i o n a lm e d i c i n ei sg i v e nt og r o u p ( D ) 1 5 m l k g 1 d 。1o f4 m g m lF e n b i ds u s p e n s i o nm i x e dw i t hd i s t i l l e dw a t e ri sg i v a nt og r o u p ( E ) 6 w e e k sa f t e rt h ea p p l i c a t i o no fd r u g s 。5 0 m l b l o o di sc

14、 r a m p e do u tb ya5 0 m ls y r i n g e T h e nt h eb l o o di st r e a t e di nc e n t r i f u g et og e tt h es e r u ma n d t h e nt e s tt h ea m o u n t o fN O a n d t h ea c t i v i t yo fS o Di nt h es e r u m B yt h ee n d ,t h ea n i m a li sk i l l e dt o g e tt h ec a r t i l a g ea n d

15、s y n o v i a lm e m b r a n eo fk n e ej o i n t 【l h s u l t s l 1 T h em o v e m e n to ft h ek n e ej o i n to ft h e G u h i g ha m o u n tg r o u p ( D ) i si m p r o v e d s i g n i f i c a n t l ya n ds oi so ft h ep o s i t i r ec o n t r o lg r o u p ( E ) 2 T h ea m o u n to fN Oi ns e r

16、u mi ng r o u p ( B ) i sh i g h e rt h a nt h eg r o u po fn o r m a ls a l i n e ( A ) 。G u ”c a nd e c r e a s et h el e v e l o fN Oi ns e r u mb e c a u s et h el e v e l so fN Ob e t w e e n g r o u p ( C ) 、( D ) a n d ( B ) h a v es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( P 0 0 5 ) 3 T h ea c t i v i t yo fS O Di ng r o u p ( B ) d e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y ,h o w e v e r ,“G u ”c a n i n c r e

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