糖尿病常用实验检测技巧及意义

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1、糖尿病常用实验检测方法及意义糖尿病(DM)的实验检查是DM诊断和治疗监测中必不可少的,现就这方面的内容作简要介绍。一、血液检查1、血糖(1)空腹血糖:过夜空腹早晨68点抽血检测。早期和轻型DM患者的空腹血糖往往轻度升高或正常。对DM的诊断敏感性低于餐后2h血糖。因此,1999年WHO已把诊断DM的空腹血糖值从140mg/dL降到126mg/dL。110126mg/dL为空腹血糖受损(IFG)。空腹血糖大于200mg/DL.表示患者的胰岛储备功能较差。(2)餐前血糖:中餐和晚餐前测定,主要用于治疗中病情监测。(3)餐后2h血糖:从进食开始计时,2h后准时采血。如检查目的为确定无糖耐量异常,应给予

2、标准餐负荷,进食100g馒头或米饭;如目的为观察DM治疗效果,了解DM控制程度,检查日应按平时进食和治疗用药,不要改变原有治疗方法。(4)夜间3点血糖:在DCCT研究中,常规做3AM血糖。对1型DM来说,3AM血糖不应70mg/dL,若低于该值,表示夜间可能出现过低血糖。(5)随机血糖:1d中任何时候检查,在怀疑在低血糖或明显高血糖时随时检查。(6)自我监测血糖(SMBG):每天测定多次,常用的测定时点有:早晨空腹,早餐后2h,中、晚餐前,中、晚餐后2h,晚10点,3AM。有时夜间还要增加监测频率。多次监测血糖适用于作强化治疗者、胰岛素治疗且病情不稳定者,为调整胰岛素用量提供数据。病情稳定患者

3、,单纯饮食控制或用口服降糖药者,至少每周监测血糖一次(至少包括空腹和餐后2h血溏)病情稳定后延长间隔时间。(7)24h动态血糖监测,现已有24h动态血糖监测仪,每5ml自动检测一次,储存在电脑中,可用于分析病情,指导治疗。2、馒头餐试验100g面粉(含碳水化合物7578g,蛋白质710g,脂肪12g)制作的馒头,相当于75g葡萄糖,从吃第一口馒头起计时,12h后准时采血测血糖,用于糖尿病的诊断。不习惯吃馒头者可吃米饭,大米重量与面粉相等,也为100g。3、75g葡萄糖耐量试验要求标准化,即试验前3d至少每天进食150g碳水化合物。试验前过夜空腹1016h,上午68点做试验。75g纯葡萄糖粉(如

4、含1水分子的葡萄糖粉则为82.5g)溶于300ml左右温水中,5min内喝完,从吃第一口糖水计时,空腹和服糖后1和2h准时采血。其中2h血糖采血时点要求前后误差不超过3min。血糖标本预先要加氟化钠和草酸钾,以防在放置过程中血糖明显下降。血糖用葡萄糖氧化酶法或已糖激酶法侧定。4、100g葡萄糖耐量试验部分2型DM患者早期,可出现反应性低血糖,多发生在餐后35h,这时可作100g葡萄耐量试验,抽血时点为空腹、1、2、3、4、5h。妊娠DM的诊断也作100g糖耐量试验。采备时点为0、1、2、3h。若0时血糖95mg/dL,1h180ng/dL,2h155ng/dL,3h140ng/dL,其中有2个

5、点超过即可诊断为妊娠DM。5、常用血糖侧定方法比较理论上讲静脉血浆葡萄糖水平毛血管全血静脉全血。目前生化科普遍采用已糖激酶法或葡萄糖氧化酶法。血糖标本要加氟化钠6mg/mL,加少量草酸钾可使抗凝充分。初次使用简易血糖仪侧定的毛细血管血糖值要与静脉血浆血糖进行校正,理论上毛细血管全血血糖含量静脉全血血糖含量,但在实际中,由于检测仪器和方法的不同,简易血糖侧定的血糖值与静脉血相比常不一致。有的需要校正系数修正。6、糖化血红蛋白(HbAlc)可反映采血前23个月的平均血糖水平,是目前反映长期控制好坏最可靠的指标。一般认为6.57.5为一般,7.5为控制不良。每34个月侧定一次即可,1型DM可缩短检测

6、间隔时间,但也不要少于2个月。检测中要特别注意测定方法、仪器的准确性和稳定性。进口侧定仪器有BidRad公司的系列产品:如Variant,DiaMAT 为高压液相方法,其结果比较可靠和稳定。DiaSTAT 为低压液相。Bid-Rad HbAic药盒采用微柱比色法,准确性较前几种差一些。还有德国拜耳公司的DC2000仪器、以及其他产品可侧HbA1c。7、糖化血清蛋白(果糖胺)其中90为糖化白蛋白,可反映采血前2周(13周)平均血糖,观察短期血糖控制效果。静脉血比色法侧定的正常范围为205285mol/L。目前有一种简易血糖仪,同时也能侧糖化血清蛋白。8、胰岛素,胰岛素原,裂解胰岛素原胰岛素测定可

7、大致反映胰岛功能状况。在1型DM患者,空腹和餐后胰岛素水平均极低。但在2型DM患者,尤其是在早期及肥胖者,空腹胰岛素水平经常高于正常人。并且早期2型DM患者胰岛素分泌第一时相就已经消失,胰岛素分泌的高峰延后且高于正常人。晚期2型DM胰岛功能衰竭,胰岛素水平降低。2型DM患者血液中胰岛素原浓度高于正常人。在转化过程中裂解32.33胰岛素原途径占转化总量的95%以上。所以血液中的胰岛素原主要是胰岛素原和裂解32.33胰岛素原,裂解65.66胰岛素原可以忽略不计。现在能测定胰岛素原和裂解32.33胰岛素原。有人用敏感的方法分别测定了非肥胖、肥胖正常人和糖尿病患者血液中这几种胰岛素的浓度,结果见表1表

8、1 DM与非DM,肥胖、非肥胖的胰岛素、胰岛素原水平 非肥胖 肥胖 对照 DM 对照DM 基础胰岛素(pmol/L)2832745610403兴奋后胰岛素136297118313717823119(75g)OGTT30min基础胰岛素原(pmol/L)2.40.47.11.25.91.914.42.2基础裂解32.33胰岛素原8.71.519.24.5153.65415胰岛素原的百分比()24350282495从表中可以看出,基础胰岛素在DM与非DM差别不大,但胰岛素原的水平在DM明显高于非DM,所占的百分比也明显高于正常人。因此DM患者总胰岛素浓度不低的重要原因是胰岛素原成分的升高,而胰岛素

9、原的生物活性很低,只有胰岛素的5。因此我们现在测定的胰岛素结果不能真实反映有活性胰岛素的分泌情况。但对总体胰岛素均低的患者(1型DM)有价值。8、胰岛素释放试验口服100g葡萄糖,于0、30、60、120和180min采血测胰岛素,正常人空腹胰岛素水平为520mu/L,服葡萄糖后增加520培,高峰在3060min。早期2型DM患者空腹胰岛素正常或高于正常,服糖后胰岛素增加量可与正常人相近,其主要异常为高峰延迟。随着病程的延长和空腹血糖水平的升高,2型DM患者胰岛储备功能逐渐变差。9、C肽检查(1)C肽释放试验:口服100g葡萄糖,采血时点同胰岛释放试验。正常人空腹C肽水平为1.20.6ug/L

10、。服糖后高5倍左右。高峰在60min 。糖尿病已用胰岛素治疗者要观察胰岛功能应做本试验。(2)胰高糖素兴奋C肽试验:采空腹血后,静注胰高糖素1ml,6min后采血,侧C肽水平,大于1.5ug/L表示有一定的胰岛素分泌储备功能。(3)尿C肽测定:可以反映胰岛素功能。10、血脂、肝、肾功能血脂测定应包括部胆固醇(CH)、甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-ch)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-ch)、并可选作脂蛋白(a)Lp(a)。DM患者常有血脂异常,表现为LDL-ch、CH和TG升高,HDL-ch降低。初诊DM患者常规检查血脂异常者不急于降血脂药,因为血脂异常与高血糖有一定关系,DM控

11、制后,少部分患者血脂异常可恢复。如仍不正常者,宜加用调血脂药。肝、肾功能检查包括GPT、GOT、血浆蛋白、尿素氮、肌酐。可选做肾小球滤过率(GFR),内生肌酐清除率,肾血浆流量检查等。11、免疫指标测定(1)胰岛细胞抗体(ICA):是针对胰岛细胞内多种抗原的一组抗体。1974年首次发现1型DM患者血流中存在ICA。新发症的儿童DM血液ICA的阳性率为70左右,以后逐年下降,5年后降至20,1020年后降到510。在1型DM的一级亲属中阳性率为58,可作为预测1型DM发病的一项指标。(2)ICA512/LA2ab:(蛋白酪氨磷酸酶样蛋白protion tyrosine phosphatase-l

12、ike protein)ICA512/IA2ab及其相关物质phogrin、LA-2是近年来用分子生物学技术得到的重组蛋白,已证实是1型糖尿病的重要自身抗原。Phogrin和ICA512/IA2的关系与GAD65和GAD67的关系相似,ICA512/IA2是40000的前体。具有40000抗体的大多数患者为1型糖尿病。研究表明,37 000、40 000抗体可能是一个更为特异的预测指标。ICA512/IA2ab将逐步取代ICAs的测定。有资料表明联合测定血清胰岛素抗体、GAD-Ab、IA2Ab中两个或两个以上的抗体滴度可获得更高的阳性率,敏感性约66.74,特异性可达100。ICA512抗体与

13、GAD抗体一样,是ICA抗体家族中一个成员,大多数研究认为两者联合检测可反应ICA的大部分活性。新诊断的I型糖尿病患者血清与正常人对照研究发现ICA512是患者的主要胰岛细胞抗原,应用ICA512的裂解产物70 000检测更为敏感。有助于糖尿病的分型。(3)谷氨酸脱酸酶(GAD)抗体:这项指标与细胞功能进行性损害的相关性较好。1982年首先发现1型糖尿病患者血液中有GAD抗体。GAD分子存在两种形式(65 000和70 000),分别称为GAD65和GAD70。GAD是神经递质-氨基丁酸的生物合成酶,此酶存在于大脑、胰腺、肝、肾、垂体、甲状腺、肾上腺、睾丸及卵巢等组织,但只有大脑和胰腺中提取的

14、GAD才能与1型糖尿病患者的血清起反应,具有独特的免疫化学特性。这种抗体在I型糖尿病患者血液中存在持续时间较长。在新发1型DM人中,GAD抗体的阳性率为74,病程长者为67,而ICA的阳性率分别为64和14,在先证者的非1型DM亲属中ICA阳性率为1-5,在2型DM中为57。国内一组1型DM患者GAD抗体的阳性率为56,高于ICA和IAA。因此对I型DM的诊断价值较大。1型DM前期,以及有些所谓成年晚发型自家免疫性糖尿病(LADA)可单独出现GAD抗体阳性,而ICA和IAA此时均阴性,因此GAD抗体是目前认为诊断和预测1型DM的一项较好指标。但也可见于正常人,T2DM,妊娠DM,Graves病

15、,甲减和类风湿关节炎。(4)胰岛素自身抗体(IAA)1963年首次报道1型DM患者IAA的阳性率为34,非DM人仅为4。新诊断的1型DM患者中的IAA的阳性率可达4050。IAA也是预测1型DM的一项指标。但注射外源性胰岛素的患者均可出现阳性反应,所以诊断价值较小。二、尿液检查1、尿常规观察有无大量蛋白尿(0.5g/24h),有无泌尿系感染和其他肾病等。2、尿酮体糖尿病初诊时,血糖明显增高时(20mmol/L),屡发低血糖时,怀疑Somogi反应时,应查尿酮体。3、尿糖分次尿糖(空腹、餐后2h),段尿糖(分4段),24h尿糖定量。尿糖测定结果受肾糖阈增高或降低的影响,应予注意。目前糖尿病控制标准已不用该指标。控制良好者,尿糖一定应阴性,阳性者应与肾性糖尿区别。4、尿白蛋排出量(UAE)有8h、12h、24h时间段留尿方法,也可清晨留尿,测白蛋白/肌酐比值。如增高(20g/min),在6个月内重复2次。用放射免疫酶联方法测定

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