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1、国坂buv儿及时画尿基劣升助于提外学牧描司素其,杜招目振口持玟单元主平知识,系纳全面二传述团顾商故理解,仪迪事年办传之目的35奶割方式:GAAlrrc、GAArrcroglcrrlAsgcnGaG(teolyc之闵钊蓉)助性木蛐之闻钊醛中铁缘训的N分二财吊的茹范示(帚央秉示鹄的蒙余置结果:经限制酶切割产生的DNA片段未端通常有两积形式.即黏性末端和平未端.2.“分子缝合针“一DNA连接酶()分类,E,coliDNA连接酶和TDNA连接酶。(2)作用:缝合两个DNA片段之间的磷酸二酪键。(3)作用示意图:5RKNTTCJ|DkA挂精川6AATTCCa&r刃日一“口lcrraaG(结果:将两个DN
2、A片段连接起来。3.“分二运输车“一一载体CD作为载体的必备条件:D有一个或多个限制酮切割位点,供外源DNA片段E具备自我复制能力,且能在受体细胞中复制些稳定保存;带有标记基囚,供重组DNA的鉴定和选择;必顺宏的才受佛细胞有*大小适中的DNA分子。(2)作用;D作为运载工具将日的基因转移到宿主细胞中。G)利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。(3)常用的载体是质粒、喜菌体的衍生物和动植物病考剧符(不质粒的本质:质狐是细萧拟核DNA外的能自我复制的小型双链环状DNA分子。二基因工程的基本操作程序1目的基因的获取(目的基团:人们所需要的编码特定蛋白质的基因。直接分离法(2)荻取日的基回的方法A
3、wskf反转录法|CJC成气化学合成法2.莲图表达狒体的构建G目的余目的传绘下一f园画-体目的埕C2组,政:复待历人对一国典体解淑如下:原核生物只有一个复制原点颗点1真指生牧市多个复制原点肢动子:位于燕因首端一段有特殊结构的DNA片段,是RNA程合醒泉赉和结合的部位,作用是驱动基团转祖nRNA,线止二:位于基图尾端一段有特殉结构的DNA短片殿.作用是能终EmRNA的轲录。标记基国:用李检测载体是否进人了受体细胞-35过程图解。网制性林朋内砺觊体厂粘DNA分二5A芸院英颊纺D办于(逸绍颊祖3.将目的基因导人受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法|农杆荣钧化法显徽注射技术感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞将目的基因插将吴有目的基人到Ti质粒的国的表达载体一感受怀DNA上一农|提纯一取卵窒董墓呈蜚一重组表达f菜一导人植|(受精卵)一晏转化过程|杆莉一导人楠|(发精卵)一显|持体与感受态物细胞-个藩司|征注射言受精-|afjg深名一庵到爱余组胜的|邹宇育一戚得|双态细胞吸收染色体DNA上|具有新性状的二目DNA分子一表达动物Ca处理细
