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1、曾经一度为配制利福平 rif 十分困扰。在本站检索，发现大家的方法很多，如 NaOH、氯仿、甲醛、二甲基甲酰胺，但是没人提供过详细的 配制过程，于是我只有自己摸索。shaomin7899 于 2004-09-11 19:37 提过， “我从经科买的 250 毫克，250 元，用 NaOH 配的，5M 加 1 毫升就够了，加水搅拌就行，我也不知道哪便宜，可能便宜也就不一定好用 ”，于是我照办，用 5M NaOH 来溶 125mg（rif 来自鼎国） ，加热搅拌什么招都试了，无法溶解。氯仿甲醛没敢尝试。在其他网站上看到用二 甲基亚砜（二甲基甲酰胺）溶解的方法，大致是说先用二甲基亚砜来溶解，再加入水
2、定容，于是我尝试，将 125mg rif（又是 125mg！奉劝大家千万别这样，浪费啊）装入三角瓶，开始一滴一滴的加入 DMF。这是一个由希望到绝望的过程，到后来我干脆往里倒了，眼 看要加到目的体积了，我终于住手了，没办法，只好放到磁力搅拌器上让它自生自灭。若干小时以后，貌似终于溶了，也舒了口气。最后也没敢加水定容，直接用滤 器灭菌。噩梦还在后面。我们用的滤器，怎么说，是那种很原始的，起直接作用的是一小片滤纸。用注射器抽取了红得发暗的液体，插上滤器.不说过程了， 有点离题，总之最后的结果是针管无法推动，千辛万苦滤得的 rif 溶液比原溶液淡得多，捏开滤器内部一片狼藉，rif 的颗粒堵住了各个小
3、孔没有溶 开。这种溶液，我还是勉强用了一阵（但愿别被老板看到） 。我终于学聪明了，50mg rif 装入一个 1.5ml 的炮弹管中，另备一个同样的炮弹管，取 50mg rif 中的很少的量弹入其中，然后加入了 1ml 的二甲基甲酰胺，溶了，然后继续少量的加入rif，用枪头反复的吹打溶解，都溶了。于是，我又陆续加入了 50mg，溶解得困难，十分粘稠，我继续加入了 50ml 的二甲基甲酰胺，情况有所好转。终于到最后我用 1.5ml 的二甲基甲酰胺溶解了 100mg 的 rif。该用水定容了。初恋的雪在下 于 2005-05-06 18:12 提过“.二甲基甲酰胺.与水和通常有机溶剂混溶”。于是，
4、我吸取了约 30ul 装入炮弹管里（看，我终于学聪明了！）加入一滴 水，原本暗红色的溶液马上出现了沉淀，并且颜色变浅，无法溶解！于是，我就干脆不加入水，用二甲基甲酰胺将溶液最终定容为 50mg/ml。过 滤灭菌的时候十分顺利，可以说是毫无阻隔，因为二甲基甲酰胺将滤纸顺时腐蚀了，打开滤器，里面的滤纸消失的很干净。为此，我抱着怀疑的精神共灭了 3 次，前 两次我都以为是忘记加滤纸了，还因此对手下的小妹发了火，羞愧啊！总结：1、二甲基甲酰胺2、逐渐溶解3、工作浓度可设定在 50mg/ml（我们所需终浓度为 25mg/L&50mg/L， 依菌种而定）4、二甲基甲酰胺腐蚀性虽强，但终浓度很低，我已实 验
5、，菌种生长良好，但还应尽量将rif 的工作浓度设定高些，尽量降低二甲基甲酰胺对菌种的伤害。100mg/ml？也许大家可以试一下，到时交流：）除 了用 NaOH 溶解过夜的方法外，你还可以考虑用甲醇来配制。我们一直都用甲醇配的呀，挺好的！为此我们实验室还有一个笑话，当我们 说谁装青春的时候，就会问一句：请问知道 Rif 是用什么配的吗？ 答曰：“假纯”（甲醇也） 。用/2 DMSO （二甲亚砜）溶解后 再加/2 甲醇，不用灭菌了直接分装就行。十分感谢 wjatree、Atbeijing &wency受益匪浅！我 用甲醇溶的，与搂主有相同的经历，浪费了不少，想起来就好笑，我本人感觉是利福平的原因，
6、不同公司的可能有差异，我曾经问过一位前辈，她说很好溶。我 想问Atbeijing 你们用的是利福平，还是利福霉素？大家好！我想问利福平和利福霉素还有利福霉素钠是同一种抗生素吗？那种 更容易溶解？我用 DMSO 溶的利福平，没问题吧？配的是 50mg/mL 的我的农杆菌 LBA4404 加了利福 平（50mg/mL in DMSO）摇不出来，另外，转了 kana 抗性基因的 EHA105 加卡那长得很好，加了利福平就不长了，请问为什么 啊，我用的 YEP 培养基，15 g/liter Agar5 g/liter NaCl10 g/liter Yeast Extract10 g/liter Pep
7、tonepH7.0是 pH 不对吗，还是利福平的问题？谢谢 LBA4404 不能加利福平，它和其它的农杆菌不一样，我是加链霉素，l 浓度为100mg/l，而庆大 25mg/L（可选） 。用 YEP 和 YEB 都能长的很好。挑单菌落摇 过夜，就能摇的很浓。搂主，你做百脉根吗？有空交流一下啊？你做什么方面的 研究啊？DMSO万能溶剂，有 机物我差不多都用它溶解。一点水都不要加，完全用 DMSO。为啥要用甲醇溶？我用乙醇溶的，甲醇多毒阿！原来使用浓度 20-50mg/ml 阿，害得我加了 150mg/ml张不出来。二甲基甲酰胺是 DMF 二甲基亚砜是 DMSO 好像有不同,我们是用 DMSO 直接溶解,不用灭菌,DMSO 本身有灭菌效果,利福平也是真核细胞抑制剂
