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1、 临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察1、 实验目的 1、 掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法 2、 了解植物细胞结构。 二、 实验材料 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、0.9%的NaCl溶液;洋葱、马铃薯、芹菜、番茄 三、 实验内容和实验方法 (1) 临时装片的制作 1、 擦净载玻片和盖玻片 (1) 擦载玻片 用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘,右手 用纱布将载玻片上下两面包住,然后反复擦拭,擦好后放在干净处备用。 (2) 擦盖玻片 先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角, 再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住,然后从上下
2、两面隔着纱布慢慢地进行擦试。 2、 取样 用滴管滴一点水或其他溶液(根据需要)于载玻片的中央,把观察物放于载玻片上的液滴中,展开或摇匀。 3、 盖盖玻片 右手持镊子,轻轻夹住盖玻片的一角,使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触,然后慢慢倾斜下落,最后平放于载玻片上,避免气泡的产生。如盖玻片下的液体过多,可用吸水纸将多余的液体吸掉。 (二) 徒手切片法 徒手切片法不需要任何的机械设备,只需要一把锋利的刀片就可以完成切片的制作,方法简单,也容易保持物的生活状态,有很大的实用价值。 1、 选材 选择软适度的材料,先截成适当的段块。一般直径大小以35mm、长度以2030mm为宜。若材料太软,如幼叶等,不能直接
3、拿在手中进行切片,可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物,将材料夹入其中,一起切片。 2、 切片 用左手拇指、食品指和中指夹住材料,使其稍突出在手指之上,拇指略低于食指,以免刀口损伤手指。材料和刀刃上蘸水,使其湿润。右手拇指和食指横向平握刀片,刀片要与材料断面平行,刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置,以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。切片时要用臂力而不用腕力,手腕不要动,靠肘、肩关节的屈伸来切片,拉切要快,中途不要停顿,更不能用拉锯方式进行切片。 每切23片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。如发现材料切面出现倾斜,应修平切面后再继续切片。 3、
4、镜检观察 连续切下很多切片后,挑选最薄的切片放于加了1滴清水的载玻片,盖上盖玻片,制成临时装片,进行镜检、观察。 (3) 植物细胞的结构观察 1、 洋葱表皮细胞的观察 取一洁净载玻片,于载玻片中央加上一滴水。取洋葱一个,剥下一片新鲜的带紫色的南鳞叶,和刀片从外表面(或内表面)切一个面积为4mm2左右的方形小格,然后用镊子将表皮撕下,迅速入入载玻片上的小水滴中(表面向上)。并使其平展,盖上盖玻片,即制成临时装片。将装片放在显微镜下,用低倍镜观察细胞结构。 (1) 细胞的形状 洋葱表皮由一层细胞构成,所有的细胞都有相似的扁砖状。细胞之间排列紧密,没有间隙。(2) 细胞壁 为植物细胞所特有的结构,较
5、透明,因此只能看到其侧壁。初看时,好像两个相邻细胞只有一层壁,但是,通过增加反差和仔细调焦就能发现这实际上是三层,即两侧相邻两细胞的细胞壁及中间的胞间层。 (3) 细胞质 为无色透明的胶状物,充满整个细胞。由于中央有大的液泡,被挤成一薄层,分布于细胞周围,仅细胞两端较明显。 (4) 细胞核 为球形小体。由于中央有大液泡,也被挤向近细胞壁处。 (5) 细胞膜 非常薄,而且与细胞壁紧贴在一起,因此不易观察到。 (6) 液泡 一个或几个,位于细胞中央,里面充满细胞液,所以比细胞质透明。 2、 果肉离散细胞观察 用解剖针挑取少许已经红熟的的番茄果肉(以临近果皮的为好),把它们放在载玻片上的水滴中,用解剖针将果肉细胞拨匀,分散得越开越好,盖上盖玻片,在显微镜下观察。可以看到圆形或卵圆形的离散细胞,同样也可以观察到细胞壁、细胞核和很大的液泡。此外,还可以看到带色的圆形小颗粒,即有色体。 3、 厚角组织 用徒手切片法做芹菜叶柄的横切片,选取薄而透明的切片制成临时装片,置于低倍镜下观察。在芹菜叶柄棱角处的表皮内方有厚角存在,这些细胞的细胞壁在角隅处有增厚。